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CFSE Dyes Chemikalie

Kat.-Nr.S8269

Carboxyfluorescein-Succinimidylester (CFSE, 5(6)-Carboxyfluorescein-diacetat-succinimidylester, CFDA-SE, 5(6)-CFDA-N-Succinimidylester) ist ein fluoreszierender Zellfärbstoff. Diese Verbindung wird häufig in Zellproliferationstests und Motilitätstests verwendet. Sie ist zellgängig und koppelt über ihre Succinimidylgruppe kovalent an intrazelluläre Moleküle, insbesondere an intrazelluläre Lysinreste und andere Aminquellen.
CFSE Dyes Chemikalie Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 557.46

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Qualitätskontrolle

Charge: Reinheit: 99.85%
99.85

Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Molekulargewicht 557.46 Formel

C29H19NO11

Lagerung (Ab dem Eingangsdatum) 3 years -20°C(in the dark) powder
CAS-Nr. 150347-59-4 SDF herunterladen Lagerung von Stammlösungen

Synonyme Carboxyfluorescein succinimidyl ester, 5(6)-Carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester, CFDA-SE, 5(6)-CFDA N-succinmidyl ester Smiles CC(=O)OC1=CC=C2C(=C1)OC3=C(C=CC(=C3)OC(C)=O)C24OC(=O)C5=CC(=CC=C45)C(=O)ON6C(=O)CCC6=O.CC(=O)OC7=CC=C8C(=C7)OC9=C(C=CC(=C9)OC(C)=O)C8%10OC(=O)C%11=CC=C(C=C%10%11)C(=O)ON%12C(=O)CCC%12=O

Löslichkeit

In vitro
Charge:

DMSO : 100 mg/mL (179.38 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse Konzentration Volumen Molekulargewicht
Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo
Charge:

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

mg/kg g μL

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH2O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus

In vitro

Vorbereitung der CFDA-SE-Arbeitslösung
1.1 Vorbereitung der Stammlösung
Lösen Sie 1 mg CFDA-SE in 0,1794 mL DMSO, um 10 mM CFSE zu erhalten.
Hinweis: Es wird empfohlen, die Stammlösung bei -20 ℃ oder -80 ℃ lichtgeschützt zu lagern und wiederholte Einfrier-Auftau-Zyklen zu vermeiden.
1.2 Vorbereitung dieser chemischen Arbeitslösung
Verdünnen Sie die Stammlösung in serumfreiem Zellkulturmedium oder PBS, um 5-10 μM dieser chemischen Arbeitslösung zu erhalten.
Hinweis: Bitte passen Sie die Konzentration dieser chemischen Arbeitslösung an die tatsächliche Situation an.
Zellfärbung
2.1 Für Suspensionszellen: Bei 1000 g bei 4℃ für 3-5 Minuten zentrifugieren und dann den Überstand verwerfen. Zweimal mit PBS waschen, jeweils 5 Minuten.
Für adhärente Zellen: Zellkulturmedium verwerfen und Trypsin hinzufügen, um die Zellen zu dissoziieren, um eine Einzelzellsuspension zu erhalten. Bei 1000 g bei 4℃ für 3-5 Minuten zentrifugieren und dann den Überstand verwerfen. Zweimal mit PBS waschen, jeweils 5 Minuten.
2.2 1 mL dieser chemischen Arbeitslösung hinzufügen und dann 30 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren.
2.3 Bei 400 g bei 4℃ für 3-4 Minuten zentrifugieren und dann den Überstand verwerfen.
2.4 Zweimal mit PBS waschen, jeweils 5 Minuten.
2.5 Zellen mit serumfreiem Zellkulturmedium oder PBS resuspendieren und dann mit Fluoreszenzmikroskop oder Durchflusszytometer nachweisen.

In vivo

Die In-vivo-Markierung von Zellen mit CFSE ist praktisch ohne toxische Wirkung auf die markierten oder angrenzenden Zellen möglich. Dies hat Vorteile bei relativ langfristigen Migrationsstudien, wie die Gewinnung von T-Zellen in den peripheren lymphatischen Organen zeigt.

Literatur

Klinische Studieninformationen

(Daten von https://clinicaltrials.gov, aktualisiert am 2024-05-22)

NCT-Nummer Rekrutierung Erkrankungen Sponsor/Kooperationspartner Startdatum Phasen
NCT02028403 Completed
HIV Infections
National Institute of Allergy and Infectious Diseases (NIAID)
June 2014 Phase 1
NCT01376726 Completed
HIV Infections
National Institute of Allergy and Infectious Diseases (NIAID)|Novartis Vaccines and Diagnostics Inc
July 2011 Phase 1
NCT01029548 Completed
HIV Infections
Barbara Ensoli MD|Istituto Superiore di Sanità
April 2008 --
NCT01024556 Completed
HIV Infection
Barbara Ensoli MD|Istituto Superiore di Sanità
March 2008 --

Technischer Support

Handhabungshinweise

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

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