nur für Forschungszwecke

D-Luciferin Dyes Inhibitor

Kat.-Nr.S7763

D-Luciferin ist ein beliebtes biolumineszentes Substrat der Luciferase in Anwesenheit von ATP, das in Luciferase-basierten Biolumineszenz-Bildgebungs- und zellbasierten Hochdurchsatz-Screening-Anwendungen verwendet wird. In einem immunkompetenten Mausmodell für Eierstockkrebs bewahrt die Verwendung dieser Verbindung und Glühwürmchen-Luciferase die Immuninteraktionen zwischen Tumor und Wirt, da die biolumineszente Bildgebung ein empfindlicherer Indikator für Tumorwachstum ist als die Gewichtszunahme.
D-Luciferin Dyes Inhibitor Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 280.32

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Qualitätskontrolle

Charge: Reinheit: 99.48%
99.48

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration

Zelllinien Assay-Typ Konzentration Inkubationszeit Formulierung Aktivitätsbeschreibung PMID
CHO cells Function assay Displacement of [3H]PSB-13253 from human recombinant GPR35 exprssed in CHO cells by liquid scintillation counting analysis, Ki=9.86 μM 23888932
HT29 cells  Function assay Agonist activity at human GPR35 expressed in human HT29 cells by DMR assay, EC50=12.9 μM 23888932
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Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Molekulargewicht 280.32 Formel

C11H8N2O3S2

Lagerung (Ab dem Eingangsdatum) 3 years -20°C(in the dark) powder
CAS-Nr. 2591-17-5 SDF herunterladen Lagerung von Stammlösungen

Synonyme Firefly luciferin, Beetle Luciferin Smiles C1C(N=C(S1)C2=NC3=C(S2)C=C(C=C3)O)C(=O)O

Löslichkeit

In vitro
Charge:

DMSO : 26 mg/mL (92.75 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse Konzentration Volumen Molekulargewicht
Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo
Charge:

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

mg/kg g μL

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH2O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus

In vitro

1. Beispielprotokoll für In-vitro-Biolumineszenz-Bildgebungsassays
a) Eine 100 mM (100-200X) Luciferin-Stammlösung in sterilem Wasser herstellen. Gut mischen. Sofort verwenden oder Einweg-Aliquots herstellen und bei -20℃ lagern, Einfrier-Auftau-Zyklen und Lichteinwirkung vermeiden.
b) Eine 0,5-1 mM Arbeitslösung von D-Luciferin in vorgewärmtem Gewebekulturmedium herstellen.
c) Medium von kultivierten Zellen absaugen.
d) Diese Arbeitslösung zu den Zellen geben und die Zellen 5-10 Minuten bei 37℃ direkt vor der Bildgebung inkubieren.
2. Beispielprotokoll für In-vivo-Biolumineszenz-Bildgebungsassays
a) Eine 15 mg/mL Luciferin-Stammlösung in DPBS, ohne Mg2+ und Ca2+, herstellen. Gut mischen.
b) Die Lösung durch einen 0,2 μm Filter sterilisieren. Sofort verwenden oder Einweg-Aliquots herstellen und bei -20℃ lagern, Einfrier-Auftau-Zyklen und Lichteinwirkung vermeiden.
c) Das Luciferin 10-15 Minuten vor der Bildgebung intra-peritoneal (i.p.) mit 150 mg/kg (oder 10 μL/g dieser chemischen Stammlösung) des Tierkörpergewichts injizieren.
Hinweis: Eine kinetische Studie von Luciferin sollte für jedes Tiermodell durchgeführt werden, um die Spitzen-Signalzeit zu bestimmen.
3. Beispielprotokoll für Luciferin-Reporter-Assays
a) Eine 100 mM Luciferin-Stammlösung in sterilem Wasser herstellen. Sofort verwenden oder Einweg-Aliquots herstellen und bei -20℃ lagern, Einfrier-Auftau-Zyklen und Lichteinwirkung vermeiden.
b) Eine 1 mM Arbeitslösung dieser Verbindung mit 3 mM ATP, 1 mM DTT und 15 mM MgSO4 in 25 mM Tricinpuffer pH 7,8 herstellen.
c) 5-10 μL Zelllysat in eine Mikrotiterplatte pipettieren. Lyse-Reagens oder Puffer ohne Lysat als Leerwert verwenden.
d) Luminometer mit dieser chemischen Arbeitslösung primen.
e) 200 μL dieser Arbeitslösung ohne Verzögerung und mit einer Integrationszeit von 10 Sekunden injizieren.

In vivo

In einem immunkompetenten Mausmodell für Eierstockkrebs erhält die Verwendung von D-Luciferin-Substrat und Firefly-Luciferase die Immuninteraktionen zwischen Tumor und Wirt, da die Biolumineszenz-Bildgebung ein empfindlicherer Indikator für das Tumorwachstum ist als die Gewichtszunahme.

Literatur

Technischer Support

Handhabungshinweise

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

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