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Danoprevir HCV Protease inhibitor

Kat.-Nr.: S1183

Danoprevir is a peptidomimetic inhibitor of the NS3/4A protease of hepatitis C virus (HCV) with IC50 of 0.2-3.5 nM, inhibition effect for HCV genotypes 1A/1B/4/5/6 is ~10-fold higher than 2B/3A. Phase 2.
Danoprevir HCV Protease inhibitor Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 731.83

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Qualitätskontrolle (Quality Control)

Charge: S118301 DMSO]144 mg/mL]false]Ethanol]144 mg/mL]false]Water]Insoluble]false Reinheit: 99.94%
  • In Nature Medicine für seine erstklassige Qualität zitiert
  • COA
  • NMR
  • SDS
  • Datenblatt
99.94

Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität (Chemical Information, Storage & Stability)

Molekulargewicht 731.83 Formel

C35H46FN5O9S

 Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)
CAS-Nr. 850876-88-9 SDF herunterladen Lagerung von Stammlösungen

Synonyme ITMN-191, RG7227 Smiles CC(C)(C)OC(=O)NC1CCCCCC=CC2CC2(NC(=O)C3CC(CN3C1=O)OC(=O)N4CC5=C(C4)C(=CC=C5)F)C(=O)NS(=O)(=O)C6CC6

Löslichkeit (Solubility)

In vitro
Charge:

DMSO : 144 mg/mL (196.76 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 144 mg/mL

Water : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse Konzentration Volumen Molekulargewicht
Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo
Charge:

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

mg/kg g μL

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH2O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus (Mechanism of Action)

Merkmale
A peptidomimetic inhibitor of the NS3/4A protease of hepatitis C virus (HCV).
Targets/IC50/Ki
HCV NS3/4A protease
0.2 nM-3.5 nM
In vitro

Danoprevir (0.29 nM) inhibits the reference genotype 1 NS3/4A protease half-maximally, but a high dose of this compound (10 μM) shows no appreciably inhibition in a panel of 79 proteases, ion channels, transporters, and cell surface receptors. It remains bound to and inhibits NS3/4A for more than 5 hours after its initial association. This chemical (45 nM) eliminates a patient-derived HCV genotype 1b replicon from hepatocyte-derived Huh7 cells with an EC50 of 1.8 nM. In HCV subgenomic replicon cell lines containing the individual mutations, V36M, R109K, and V170A substitutions confer little or no resistance to it, but the R155K substitution confers a high level (62-fold increase) of resistance to this compound. In Huh7.5 cells transfected with chimeric recombinant virus, it shows antiviral inhibition effects against HCV genotypes 1, 4 and 6 with IC50 of 2-3 nM, which are >100-fold lower than genotypes 2/3/5 (280-750 nM).

Kinase-Assay
Kontinuierlicher Fluoreszenzresonanzenergietransfer (FRET)-Assay
Der Assay-Puffer enthält 25 μM NS4A-Peptid, 50 mM Tris-HCl, pH 7,5, 15% Vol./Vol., 10 mM Dithiothreitol und 0,5 μM QXL520-markiertes FRET-Substrat {Ac-DE-Dap(QXL520)-EE-Abu-ψ-[COO]-AS-Cys(5-FAMsp)-NH2}. K2040-Enzym (50 pM) wird hinzugefügt, um die Reaktion zu initiieren. Reaktionen werden in schwarzen 96-Well-Platten angesetzt, und Fluoreszenzdaten werden gesammelt. Kontrollreaktionen ohne Inhibitoren und Enzym sind enthalten. Die Anfangsraten werden aus der linearen Phase der Reaktion (bis zu 1 Stunde) berechnet und zur Bestimmung der IC50 verwendet. Die Wiederherstellung der Aktivität aus dem vorgebildeten Danoprevir-NS3/4A-Komplex wird durch Vorinkubation von 10 nM NS3/4A mit einem zweifachen Überschuss dieser Chemikalie in 1× Assay-Puffer für 15 Minuten beurteilt, gefolgt von einer schnellen 200-fachen Verdünnung des vorgebildeten Komplexes in Assay-Puffer, der Substrat enthält. Eine Kontrollreaktion mit den gleichen Endbedingungen ohne Vorinkubation von NS3/4A und Danoprevir wird durch Zugabe von Enzym zu einem ansonsten vollständigen Reaktionsgemisch initiiert. Zusätzliche Kontrollreaktionen enthalten entweder Danoprevir oder NS3 nicht. Der Verlauf der Reaktionen wird über 5 Stunden verfolgt.
In vivo

Danoprevir (30 mg/kg) administered to rats or monkeys shows that its concentrations in liver 12 hours after dosing exceed the concentration of this compound required to eliminate replicon RNA from cells.

Literatur

Klinische Studieninformationen (Clinical Trial Information)

(Daten von https://clinicaltrials.gov, aktualisiert am 2024-05-22)

NCT-Nummer Rekrutierung Erkrankungen Sponsor/Kooperationspartner Startdatum Phasen
NCT01714154 Completed
Healthy Volunteer
Hoffmann-La Roche
 November 2012 Phase 1
NCT01592318 Completed
Healthy Volunteer
Hoffmann-La Roche
 May 2012 Phase 1
NCT01588002 Completed
Healthy Volunteer
Hoffmann-La Roche
 April 2012 Phase 1
NCT01519336 Completed
Healthy Volunteer
Hoffmann-La Roche
 February 2012 Phase 1