Name: H-89 Dihydrochloride
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S1582
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Qualitätskontrolle

Charge: Reinheit: 99.48%

99.48

Verwandte Ziele	PI3K Akt mTOR GSK-3 ATM/ATR DNA-PK AMPK PDPK1 PTEN PP2A
Weitere PKA Inhibitoren	Dibutyryl cAMP (db cAMP/Bucladesine) sodium 8-Bromo-cAMP (8-Br-cAMP) Sodium Salt H-89 PKI 14-22 amide,myristoylated Bucladesine calcium A-3 hydrochloride Malantide CREBtide PKI(5-24)

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration

Zelllinien	Assay-Typ	Konzentration	Inkubationszeit	Formulierung	Aktivitätsbeschreibung	PMID
CHO	Growth Inhibition Assay	10 μM	1 h		inhibits 5-HT induced cAMP production decrease	12569069
SK-N-MC	Function Assay	30 μM	24 h	DMSO	reduces the down-regulation of β1-AR by isoproterenol by 50%	11705454
Sf9	Function assay				Inhibition of His-tagged human MSK1 expressed in Sf9 cells, IC50 = 0.12 μM.	10998351
Sf9	Function assay				Inhibition of rat ROCK2 expressed in Sf9 cells, IC50 = 0.27 μM.	10998351
SF9	Function assay				Inhibition of human PKBalpha expressed in SF9 cells, IC50 = 2.6 μM.	10998351
OVCAR8	Cytotoxicity assay		72 hrs		Cytotoxicity against human OVCAR8 cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 10.5 μM.	24508830
OVCAR8	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human OVCAR8 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 10.5 μM.	24389511
HL60	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human HL60 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 11.4 μM.	24389511
PC3M	Function assay				Inhibition of GSK3-beta in human PC3M cells by ELISA, IC50 = 15 μM.	18345609
U87MG	Growth inhibition assay				Growth inhibition of human U87MG cells by SRB assay, IC50 = 15 μM.	18345609
U87MG	Antiproliferative assay		96 hrs		Antiproliferative activity against human U87MG cells after 96 hrs by SRB assay, IC50 = 15 μM.	20151677
HCT116	Cytotoxicity assay		72 hrs		Cytotoxicity against human HCT116 cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 15.7 μM.	24508830
HCT116	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human HCT116 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 15.7 μM.	24389511
PC3M	Function assay		96 hrs		Inhibition of PC3M cells by SRB assay after 96 hrs, GI50 = 18 μM.	17451235
PC3M	Growth inhibition assay				Growth inhibition of human PC3M cells by SRB assay, IC50 = 18 μM.	18345609
LS174T	Function assay	20 uM	6 hrs		Inhibition of PGE2-stimulated TCF/LEF transactivation in human LS174T cells at 20 uM measured after 6 hrs by dual luciferase reporter gene assay	27736063
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Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Molekulargewicht	519.28	Formel	C₂₀H₂₀BrN₃O₂S.2HCl	Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)	3 Jahre-20°CPulver
CAS-Nr.	130964-39-5	SDF herunterladen		Lagerung von Stammlösungen	1 Jahr-80°Cin Lösungsmittel 1 Monat-20°Cin Lösungsmittel
Synonyme	N/A			Smiles	C1=CC2=C(C=CN=C2)C(=C1)S(=O)(=O)NCCNCC=CC3=CC=C(C=C3)Br.Cl.Cl

Löslichkeit

In vitro
Charge:

DMSO : 100 mg/mL (192.57 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : 10 mg/mL

Ethanol : Insoluble

DMSO : 100 mg/mL (192.57 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : 4 mg/mL

Ethanol : Insoluble

DMSO : 104 mg/mL (200.27 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : 6 mg/mL

Ethanol : Insoluble

DMSO : 100 mg/mL (192.57 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : 6 mg/mL

Ethanol : Insoluble

DMSO : 100 mg/mL (192.57 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse	Konzentration	Volumen	Molekulargewicht
=	×	×

Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo Charge:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	5.000mg/ml (9.63mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to make it clear; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 Corn oil Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	5.000mg/ml (9.63mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

Dosierung: mg/kg Durchschnittsgewicht der Tiere: g Dosiervolumen pro Tier:μL Anzahl der Tiere:

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH₂O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus

Targets/IC₅₀/Ki	PKA (Cell-free assay) 48 nM(Ki) S6K1 (Cell-free assay) 80 nM PKG (Cell-free assay) 0.48 μM(Ki)
In vitro	H89 2HCl ist ein potenter PKA (cAMP-abhängiger) Proteinkinase A-Inhibitor mit einem K_i von 48 nM, zeigt eine 10-fache Selektivität gegenüber PKG und eine >500-fache Selektivität gegenüber PKC, MLCK, Calmodulin-Kinase II und Casein-Kinase I/II. Eine Vorbehandlung der Zellen mit dieser Verbindung (30 μM) 1 Stunde vor der Zugabe von Forskolin hemmt die Forskolin-induzierte Proteinphosphorylierung dosisabhängig. Diese Verbindung hemmt auch mehrere andere Kinasen mit IC50-Werten von 80, 120, 135, 270, 2600 und 2800 nM für S6K1, MSK1, PKA, ROCKII, PKBα bzw. MAPKAP-K1b. Es hat auch Aktivität an einigen zellulären Rezeptoren und Ionenkanälen, einschließlich Kv1.3 K⁺-Kanälen, β1AR und β2AR.
Kinase-Assay	PKA-Enzymaktivität
Kinase-Assay	Die cAMP-abhängige Proteinkinaseaktivität wird in einer Reaktionsmischung, die in einem Endvolumen von 0,2 ml 50 mM Tris-HC1 (pH 7,0), 10 mM Magnesiumacetat, 2 mM EGTA, 1 μM cAMP oder ohne cAMP, 3,3-20 μM [γ-³²P]ATP (4 × 10⁵ cpm), 0,5 μg des Enzyms, 100 μg Histon H2B und jede angegebene Verbindung enthält, getestet.
In vivo	H89 verursacht deutliche Modifikationen der Proteinphosphorylierung, wobei die stärksten Änderungen der Phosphorylierung Fructose-1,6-Bisphosphatase, heterogenes nukleäres Ribonukleoprotein (hnRNP) und NSFL1-Kofaktor p47 betreffen, die alle potenzielle regulatorische Verbindungen zu cAMP/PKA aufweisen.
Literatur	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2156866/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10998351/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17214602/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18523239/ [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16687476/

Anwendungen

Methoden	Biomarker	Bilder	PMID
Western blot	p-eNOS / T-eNOS / p-PKA p-GPIbβ / GPIbβ / p-BAD p-S6K1 / p-rpS6 / p-GSK3β		31035633
Immunofluorescence	p-eNOS / eNOS iNOS / NFκB p65 myopodin		30513637

Technischer Support

Handhabungshinweise

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Wenn Sie weitere Fragen haben, hinterlassen Sie bitte eine Nachricht.

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C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

H-89 Dihydrochloride PKA Inhibitor

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 519.28

Qualitätskontrolle

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration

Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Löslichkeit

Molaritätsrechner

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Wirkmechanismus

Anwendungen

Technischer Support