Name: PIK-75 HCl
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S1205
Rating: 5 (45 reviews)

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Qualitätskontrolle

Charge: Reinheit: 99.78%

99.78

Verwandte Ziele	Akt mTOR GSK-3 ATM/ATR DNA-PK AMPK PDPK1 PTEN PP2A PDK
Weitere PI3K Inhibitoren	GDC-0077 (Inavolisib) SAR405 Quercetin (Sophoretin) LY294002 XL147 analogue Tersolisib (STX-478) Buparlisib (BKM120) 740 Y-P (PDGFR 740Y-P) GO-203 TFA Eganelisib (IPI-549)

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration

Zelllinien	Assay-Typ	Inkubationszeit	Aktivitätsbeschreibung
human MV4-11 cells	Cytotoxic assay	72 h	Cytotoxicity against human MV4-11 cells after 72 hrs by CellTiter-Glo assay, IC50=0.003 μM
human NZOV9 cells	Proliferation assay		Antiproliferative activity against human NZOV9 cells, IC50=0.066 μM
human NZB5 cells	Proliferation assay		Antiproliferative activity against human NZB5 cells, IC50=0.069 μM
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Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Molekulargewicht	488.74	Formel	C₁₆H₁₄BrN₅O₄S.HCl	Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)	3 Jahre-20°CPulver
CAS-Nr.	372196-77-5	SDF herunterladen		Lagerung von Stammlösungen	1 Jahr-80°Cin Lösungsmittel 1 Monat-20°Cin Lösungsmittel
Synonyme	N/A			Smiles	CC1=C(C=C(C=C1)[N+](=O)[O-])S(=O)(=O)N(C)N=CC2=CN=C3N2C=C(C=C3)Br.Cl

Löslichkeit

In vitro
Charge:

DMSO : 98 mg/mL (200.51 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 9 mg/mL

Water : Insoluble

DMSO : 3 mg/mL (6.13 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse	Konzentration	Volumen	Molekulargewicht
=	×	×

Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo Charge:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	0.150mg/ml (0.31mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 3 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	0.150mg/ml (0.31mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 3 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

Dosierung: mg/kg Durchschnittsgewicht der Tiere: g Dosiervolumen pro Tier:μL Anzahl der Tiere:

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH₂O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus

Merkmale	PI3K and DNA-PK inhibitor.
Targets/IC₅₀/Ki	DNA-PK (Cell-free assay) 2 nM p110α (Cell-free assay) 5.8 nM p110γ (Cell-free assay) 76 nM p110δ (Cell-free assay) 0.51 μM
In vitro	PIK-75 zeigt eine beeindruckende Potenz und Isoform-Selektivität bei p110α, während die entsprechenden IC50-Werte für andere PI3K-Isoformen, p110β, -γ und -δ, 1300 nM, 76 nM bzw. 510 nM betragen. Darüber hinaus ist PIK-75 bei Bindung an gereinigtes p110α ein nicht-kompetitiver Inhibitor bezüglich ATP mit K_i von 36 nM und kompetitiv bezüglich des Substrats PI mit K_i von 2,3 nM. PIK-75 zeigt auch eine potente Hemmung der DNA-PK. PIK-75 (1 μM) reduziert die Zellüberlebensfähigkeit durch signifikante Verringerung der mitochondrialen Aktivität in unstimulierten nicht-asthmatischen glatten Atemwegsmuskelzellen (ASM), asthmatischen ASM-Zellen und Lungenfibroblasten. Während in TGFβ-stimulierten ASM-Zellen PIK75 die mitochondriale Aktivität nur in asthmatischen Zellen verringert, ohne Effekte in nicht-asthmatischen Zellen. Eine aktuelle Studie zeigt, dass PIK-75 (10 nM) die TNF-α-induzierte CD38-mRNA-Expression hemmt und die TNF-α-induzierte ADP-Ribosyl-Cyclase-Aktivität in menschlichen glatten Atemwegsmuskelzellen signifikant abschwächt.
Kinase-Assay	Inhibitionsassays
Kinase-Assay	Der PI3K-Inhibitor PIK-75 wird in Dimethylsulfoxid zu 10 mM gelöst und bis zur Verwendung bei –20 °C gelagert. Die PI3K-Enzymaktivität wird in 50 μL 20 mM HEPES, pH 7,5, und 5 mM MgCl₂, das 180 μM Phosphatidylinositol enthält, bestimmt, wobei die Reaktion durch Zugabe von 100 μM ATP (enthaltend 2,5 μCi [γ-³²P]ATP) gestartet wird. Nach einer 30-minütigen Inkubation bei Raumtemperatur wird die Enzymreaktion durch Zugabe von 50 μL 1 M HCl gestoppt. Phospholipide werden anschließend mit 100 μL Chloroform/Methanol [1:1 (v/v)] und 250 μL 2 M KCl extrahiert, gefolgt von einer Flüssigszintillationszählung. Inhibitoren werden in 20 % (v/v) Dimethylsulfoxid verdünnt, um eine Konzentrations- versus Enzymaktivitäts-Hemmkurve zu erstellen, die dann mit Prism Version 5.00 für Windows analysiert wird, um die IC50 zu berechnen. Für kinetische Analysen wird ein lumineszierender Assay zur Messung des ATP-Verbrauchs verwendet. Die PI3K-Enzymaktivität wird in 50 μL 20 mM HEPES, pH 7,5, und 5 mM MgCl₂ mit PI und ATP in verschiedenen Konzentrationen bestimmt. Nach einer 60-minütigen Inkubation bei Raumtemperatur wird die Reaktion durch Zugabe von 50 μL Kinase-Glo gestoppt, gefolgt von einer weiteren 15-minütigen Inkubation. Die Lumineszenz wird dann mit einem Fluostar-Plattenlesegerät abgelesen. Die Ergebnisse werden mit Prism analysiert.
In vivo	Im ErbB3WT-Tumormodell reduziert PIK-75 die In-vitro-chemotaktische Reaktion auf HRGβ1 und senkt die pAkt-Spiegel um 40 %. Außerdem reduziert PIK-75 signifikant die Tumorzellmotilität und die In-vivo-Invasion in primären ErbB3WT-Tumoren. Bei CD1-Männermäusen führt PIK-75 zu schwerwiegenden Beeinträchtigungen im Insulintoleranztest (ITT) und Glukosetoleranztest (GTT) sowie zu einem Anstieg der Glukoseproduktion während eines Pyruvat-Toleranztests (PTT).
Literatur	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21778304/ [2] # [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21349933/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22556157/ [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21725367/ [6] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22142257/

Anwendungen

Methoden	Biomarker	PMID
Western blot	p-AKT / AKT MYCN / p-rpS6 p-AKT / AKT / p-GSK3β / GSK3β / PARP / Survivin / XIAP	23077605
Growth inhibition assay	Cell viability	24366069
Immunofluorescence	Ac-tubulin	23873844