nur für Forschungszwecke

D-Luciferin Potassium Salt Dyes Inhibitor

Kat.-Nr.S6580

D-Luciferin ist das natürliche Substrat des Enzyms Luciferase (Luc), das die Produktion des typischen gelb-grünen Lichts von Glühwürmchen katalysiert. Die 560 nm Chemilumineszenz dieser Reaktion erreicht innerhalb von Sekunden ihren Höhepunkt, wobei die Lichtausbeute proportional zur Luciferasekonzentration ist, wenn das Substrat Luciferin im Überschuss vorhanden ist. Das Luciferase (luc)-Gen ist ein beliebtes Reportergen für die Forschung und das Screening von Wirkstoffen. Chemilumineszente Techniken sind praktisch hintergrundfrei, was das luc-Reportergen ideal für den Nachweis einer geringen Genexpression macht. Zusätzlich zu seiner Rolle als Reporter der Genexpression wird Luciferase häufig in einem extrem empfindlichen Assay für ATP verwendet.
D-Luciferin Potassium Salt Dyes Inhibitor Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 318.41

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Qualitätskontrolle

Charge: Reinheit: 99.97%
99.97

Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Molekulargewicht 318.41 Formel

C11H7KN2O3S2

Lagerung (Ab dem Eingangsdatum) 3 years -20°C(in the dark) powder
CAS-Nr. 115144-35-9 -- Lagerung von Stammlösungen

Synonyme N/A Smiles C1C(N=C(S1)C2=NC3=C(S2)C=C(C=C3)O)C(=O)[O-].[K+]

Löslichkeit

In vitro
Charge:

Water : 39 mg/mL

DMSO : 5 mg/mL (15.7 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse Konzentration Volumen Molekulargewicht
Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo
Charge:

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

mg/kg g μL

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH2O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus

In vitro

1.Beispielprotokoll für In-vitro-Biolumineszenz-Bildassays
a) Bereiten Sie eine 100 mM (100-200X) Luciferin-Stammlösung in sterilem Wasser vor. Gut mischen. Sofort verwenden, oder Einzelportionen herstellen und bei -20℃ lagern, Einfrier-Auftau-Zyklen vermeiden, Lichtexposition vermeiden.
b) Bereiten Sie eine 0,5-1 mM Arbeitslösung von D-Luciferin in vorgewärmtem Gewebekulturmedium vor.
c) Aspirieren Sie das Medium von kultivierten Zellen.
d) Geben Sie die Luciferin-Arbeitslösung zu den Zellen und inkubieren Sie die Zellen 5-10 Minuten bei 37℃ direkt vor der Bildgebung.
2.Beispielprotokoll für In-vivo-Biolumineszenz-Bildassays
a) Bereiten Sie eine 15 mg/mL Luciferin-Stammlösung in DPBS, ohne Mg2+ und Ca2+, vor. Gut mischen.
b) Filtrieren Sie die Lösung steril durch einen 0,2 μm Filter. Sofort verwenden, oder Einzelportionen herstellen und bei -20℃ lagern, Einfrier-Auftau-Zyklen vermeiden, Lichtexposition vermeiden.
c) Injizieren Sie das Luciferin intra-peritoneal (i.p.) 10-15 Minuten vor der Bildgebung mit 150 mg/kg (oder 10 μL/g der Luciferin-Stammlösung) des Tierkörpergewichts.
Hinweis: Eine kinetische Studie des Luciferins sollte für jedes Tiermodell durchgeführt werden, um den Zeitpunkt des Spitzensignals zu bestimmen.
3.Beispielprotokoll für Luciferin-Reporterassays
a) Bereiten Sie eine 100 mM Luciferin-Stammlösung in sterilem Wasser vor. Sofort verwenden, oder Einzelportionen herstellen und bei -20℃ lagern, Einfrier-Auftau-Zyklen vermeiden, Lichtexposition vermeiden.
b) Bereiten Sie eine 1 mM Arbeitslösung von D-Luciferin mit 3 mM ATP, 1 mM DTT und 15 mM MgSO4 in 25 mM Tricine-Puffer pH 7.8 vor.
c) Pipettieren Sie 5-10 μL Zelllysat in eine Mikroplatte. Verwenden Sie Lyse-Reagenz oder Puffer ohne Lysat als Blindwert.
d) Luminometer mit Luciferin-Arbeitslösung vorbereiten.
e) Injizieren Sie 200 μL Luciferin-Arbeitslösung ohne Verzögerung und mit einer Integrationszeit von 10 Sekunden.

Literatur

Technischer Support

Handhabungshinweise

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

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