Home PI3K/Akt/mTOR PI3K Inhibitor Wortmannin (SL-2052)

nur für Forschungszwecke

Wortmannin (SL-2052) PI3K Inhibitor

Kat.-Nr.: S2758

Wortmannin ist der erste beschriebene PI3K-Inhibitor mit einer IC50 von 3 nM in einem zellfreien Assay, mit geringer Selektivität innerhalb der PI3K-Familie. Wortmannin blockiert die Autophagosomenbildung und hemmt potent DNA-PK/ATM mit einer IC50 von 16 nM und 150 nM in zellfreien Assays. Wortmannin hemmt auch die PLK1-Aktivität.
Wortmannin (SL-2052) PI3K Inhibitor Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 428.43

Springe zu

Qualitätskontrolle (Quality Control)

Charge: Reinheit: 99.97%
99.97

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Zelllinien Assay-Typ Konzentration Inkubationszeit Formulierung Aktivitätsbeschreibung PMID
Mel-HO Apoptosis Assay 4/8 μM 24 h enhances TRAIL-induced apoptosis  24113173
A-375-TS  Apoptosis Assay 4/8 μM 24 h enhances TRAIL-induced apoptosis  24113173
A-375 Apoptosis Assay 4/8 μM 24 h enhances TRAIL-induced apoptosis  24113173
Huh7  Function Assay 3 μM 1 h reduces the virus entry into the cells 24184196
BEL/FU Function Assay 1 mM 24 h decreases protein levels of the PI3K/Akt pathway 24232099
HCT 116  Function Assay 100 nM 24 h attenuates the colonies of the tumor cells with upregulation of Akt1 24297510
HepG2 Function Assay 100 nM 24 h attenuates the colonies of the tumor cells with upregulation of Akt1 24297510
SW480  Function Assay 150nM 20 h DMSO reduces cellular accumulation of β-catenin 24324366
HEK-293 Function Assay 150nM 16 h DMSO decreases CRT activity 24324366
5637 Apoptosis Assay 10 μM 40 min reverses p21WAF1 expression, CDK expression, and cell inhibition induced by fucoidan 24333868
MG-63 Apoptosis Assay 10 µM 12 h enhances DP-induced apoptosis 24358301
H1975 Function Assay 10 μM 1 h DMSO decreases cellular phospho-AKT protein levels 24447935
H520 Function Assay 10 μM 1 h DMSO decreases cellular phospho-AKT protein levels 24447935
HepG2  Function Assay 200 nM 0.5 h attenuates FoxO phosphorylation 24535192
HL-60 Function Assay 0.1 μM 72 h blocks cell differentiation 24607273
SK-N-LO Function Assay 100 nM 0.5 h decreases the stimulant effects of on Akt phosphorylation 24654606
A549  Function Assay 10 μm  16 h DMSO modulates the IAV replication and causes retention of NP in the nucleus. 24802111
A549  Growth Inhibition Assay 3 µM  2 h suppresses Akt and GSK3β activation, S-phase arrest, cell apoptosis and caspase-3 activation 24847863
HepG2 Function Assay 100 nM 0.5 h DMSO blocks MA-induced Akt phosphorylation 24863350
MO59J Apoptosis Assay 10 μM 24 h DMSO increases the DSB level induced by or 24953561
MO59K  Apoptosis Assay 10 μM 24 h DMSO increases the DSB level induced by or 24953561
MO59J Cytotoxicity Assay 5 μM 7 d DMSO enhances the cytotoxicity of or 24953561
MO59K  Cytotoxicity Assay 5 μM 7 d DMSO enhances the cytotoxicity of or 24953561
HT-29  Growth Inhibition Assay 1.5 µM 96 h decreases cell growth which can be inhibited by KYNA 25012123
MCF7 Function Assay 100 nM 24 h eliminates E2-induced ARE-Luc activity 25172557
MDA-MB-231 Apoptosis Assay 1 μM  48 h DMSO decreases the cell survival treated with 25 μM of F1 or F2   25300932
APRE-19 Apoptosis Assay 5 μM 24 h abolishes FLZ-mediated pro-survival/anti-apoptosis activity 25329617
HUVECs Cytotoxicity Assay 100 nM 24 h attenuates the abrogative effects of calycosin on VRI-induced cytotoxicity 25450186
H1703 Growth Inhibition Assay 2.5 μM 1-4 d DMSO enhances cell growth inhibition treatment with 25490383
A459 Growth Inhibition Assay 2.5 μM 1-4 d DMSO enhances cell growth inhibition treatment with 25490383
Mel-HO-TS Apoptosis Assay 4/8 μM 24 h enhances TRAIL-induced apoptosis  24113173
MeWo Apoptosis Assay 4/8 μM 24 h enhances TRAIL-induced apoptosis  24113173
Mel-2a Apoptosis Assay 4/8 μM 24 h enhances TRAIL-induced apoptosis  24113173
MDA-MB-231 Function Assay 0–400 nM 4 h suppresses Akt phosphorylation in a dose-dependent manner 22906259
MDA-MB-231 Function Assay 400 nM 4 h decreases MMP-9 and IL-8 protein in a dose-dependent manner 22906259
Jurkat Growth Inhibition Assay 0.25-1.25 μM 24/48 h DMSO inhibits cell proliferation in both time- and dose- dependent manner 19757185
Namalwa Growth Inhibition Assay 0.25-1.25 μM 24/48 h DMSO inhibits cell proliferation in both time- and dose- dependent manner 19757185
Jurkat Apoptosis Assay 0.25-1.25 μM 24/48 h DMSO induces cell apoptosis in both time- and dose- dependent manner 19757185
Namalwa Apoptosis Assay 0.25-1.25 μM 24/48 h DMSO induces cell apoptosis in both time- and dose- dependent manner 19757185
K562 Growth Inhibition Assay 24 h IC50=25±0.14 nM 19662361
SW1990 Function Assay 0.01-1 μM 1 h inhibits HA-induced Akt phosphorylation 19469020
RT112  Growth Inhibition Assay 10 μM 24 h DMSO decreases the proportion of G2/M cells 18787832
MHG-U1 Growth Inhibition Assay 10 μM 24 h DMSO decreases the proportion of G2/M cells 18787832
SMMC-7721 Apoptosis Assay 200 nM 24 h increases CHX-induced apoptosis 17557191
SMMC-7721 Function Assay 200 nM 24 h up-regulates β1,4GT1 expression 17557191
HeLa Function Assay 100 nM  1 h alters the morphology of the transferrin recycling compartment 16890915
MRC5VI Function Assay 12.5 mM 0.5 h DMSO abolishes the Ser473/Thr308 phosphorylation of AktPKB  16227394
AT5BIVA Function Assay 12.5 mM 0.5 h DMSO abolishes the Ser473/Thr308 phosphorylation of AktPKB  16227394
M059J Function Assay 12.5 mM 0.5 h DMSO abolishes the Ser473/Thr308 phosphorylation of AktPKB  16227394
HeLa Function Assay 12.5 mM 0.5 h DMSO abolishes the Ser473/Thr308 phosphorylation of AktPKB  16227394
N2a Apoptosis Assay 0.1-10 μM 2 h induces decreased cell viability in a concentration-dependent manner 15842767
Jurkat  Kinase Assay IC50 of 24 nM 15664519
Sf9 Function assay Inhibition of human PI3Kalpha expressed in Sf9 cells by fluorescent polarization assay, IC50 = 0.012 μM. 21121631
HeLa Function assay Inhibition of AX-7503 binding to recombinant Plk3 expressed in HeLa cells by Western blot, IC50 = 0.049 μM. 17135248
HeLa Function assay Binding affinity for DNA dependent protein kinase isolated from HeLa cells; Range is 20-120, Ki = 0.12 μM. 15658870
HeLa Function assay Binding affinity for Phosphatidylinositol 3-kinase isolated from HeLa cells; Range is 20-120, Ki = 0.12 μM. 15658870
A549 Function assay Inhibition of Plk3 in human A549 cells assessed as casein substrate phosphorylation by Western blot, IC50 = 0.22 μM. 17135248
A549 Antiproliferative assay 48 hrs Antiproliferative activity against human A549 cells after 48 hrs by SRB method, IC50 = 11.4 μM. 18630894
GM00637 Function assay 1 uM Inhibition of recombinant Plk3 expressed in human GM00637 cells at 1 uM assessed as decrease in p53 serine-20 phosphorylation 17135248
MDA-MB-231 Function assay 1 to 10 uM 24 hrs Inhibition of PI3K in human MDA-MB-231 cells assessed as inhibition of AKT phosphorylation at 1 to 10 uM after 24 hrs by Western blot analysis 24828286
HeLa Function assay 100 nM 10 mins Inhibition of PI3K in human HeLa cells assessed as reduction in EGF-stimulated AKT phosphorylation at S473 at 100 nM preincubated for 10 mins followed by EGF stimulation measured after 5 mins by Western blot analysis 30380865
HeLa Function assay 100 nM 10 mins Inhibition of PI3K in human HeLa cells assessed as reduction in EGF-stimulated AKT phosphorylation at T308 at 100 nM preincubated for 10 mins followed by EGF stimulation measured after 5 mins by Western blot analysis 30380865
Klicken Sie hier, um weitere experimentelle Daten zu Zelllinien anzuzeigen

Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität (Chemical Information, Storage & Stability)

Molekulargewicht 428.43 Formel

C23H24O8

 Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)
CAS-Nr. 19545-26-7 SDF herunterladen Lagerung von Stammlösungen

Synonyme KY 12420, SL-2052, BRN 0067676, NSC 627609 Smiles CC(=O)OC1CC2(C(CCC2=O)C3=C1C4(C(OC(=O)C5=COC(=C54)C3=O)COC)C)C

Löslichkeit (Solubility)

In vitro
Charge:

DMSO : 85 mg/mL (198.39 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse Konzentration Volumen Molekulargewicht
Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo
Charge:

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

mg/kg g μL

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH2O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
PI3K
(Cell-free assay)
3 nM
DNA-PK
(Cell-free assay)
16 nM
ATM
(Cell-free assay)
150 nM
MLCK
(Cell-free assay)
170 nM
In vitro

The inhibition of MLCK by Wortmannin is not affected by calmodulin or peptide substrat, while reduced by high concentration of ATP. This compound directly interacts with the catalytic domain of MLCK and leads to an irreversible loss of the enzyme activity. It has no inhibitory to cAMP-dependent protein kinase, cGMP-dependent protein kinase, and calmodulin-dependent protein kinase II, and has little effect on protein kinase C activity.

This inhibitor inhibits N-formylmethionyl-leucylphenylalanine (fMLP)-stimulated PtdInsP3 (phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate) formation with IC50 of 5 nM and this inhibition is completely abolished when pretreated with 100 nM of this compound in human neutrophils, with increased PtdInsP2 levels and no effects on cellular PtdInsP and PtdIns contents. It could develop oscillatory changes in F-actin content and does not inhibit fMLP-stimulated actin polymerization in neutrophils.

This chemical irreversibly inhibits phosphatidylinositol 3-kinase (PI3-kinase) activity with binding to the 110-kDa protein (IC50 of 3 nM) and has no effect PI4-kinase in RBL-2H3 cells. It also inhibits leukotriene release, with no effect on the activation of the tyrosine kinase Lyn.

This compound completely abolishes the induced hexose uptake in isolated rat adipocytes at 0.1 μM, without impairing stimulated lipolytic activity.

It suppresses induced production of nitric oxide by 50% at 500 nM in human umbilical vein endothelial cells, which is in response to IGF-1.

This chemical suppresses DNA double strand break (DSB) repair and has no effect on DSB levels or the kinetics of single strand break (SSB) repair in Chinese hamster ovary cells at 50 μM. It could potentiate ionizing radiation (IR)-induced cytotoxicity with no toxicity by itself.

This inhibitor inhibits polo-like kinase (PLK1) activity IC50 of 24 nM in intact G2/M-arrested cells.

It increases Toll-like receptor (TLR)-mediated accumulation of IL-6 in human macrophages with EC50 of 50 nM. Meanwhile this compound significantly enhances TLR-mediated inducible nitric-oxide synthase (iNOS) expression and nitrite accumulation in mouse macrphages. It activates the nuclear factor-κB and up-regulates the cytokine mRNA production.

This chemical also inhibits Polo-like kinase (PlK) 1 and PlK3, which play important roles in mitosis. Its treatment could lead to a reduction in phosphorylation of p53 on serine 20 induced by DNA damage.

It suppresses hyaluronan-induced Akt phosphorylation and cell motility/migration in SW1990 cells.

Kinase-Assay
MLCK assay
Die MLCK-Aktivität wird mit Peptidsubstrat (KKRPQRATSNVFS-NH2) oder Myosin-Leichtkette bestimmt. Das Peptidsubstrat (24 μM) wird in einem Reaktionsgemisch phosphoryliert, das 25 mM Tris-HCl (pH 7,5), 0,5 mg/mL Rinderserumalbumin, 4 mM MgCl2, 0,5 mM CaCl2, 2,6 nM Calmodulin, 1,5 nM MLCK und 400 μM ATP in einem Endvolumen von 0,25 mL enthält. Nach einer 10-minütigen Vorinkubation bei 28 ºC ohne ATP wird die Reaktion durch Zugabe von ATP bei 28 ºC gestartet und nach 30 min durch Zugabe von 0,1 mL 10 % (v/v) Essigsäure beendet. Das Gemisch wird mittels Hochleistungsflüssigkeitschromatographie analysiert: Säule, Unisil Pack 5C18 4,6 x 150 mm; Lösungsmittel, 18 % (v/v) Acetonitril, 0,1 % (v/v) Trifluoressigsäure in Wasser; Flussrate, 1,0 mL/min; Temperatur, 40 ºC; Detektion, Absorption bei 220 nm. Der Reaktionsprozentsatz wird aus dem Verhältnis der Peakflächen der phosphorylierten Form zu denen der unphosphorylierten Form berechnet. Die unter den oben beschriebenen Bedingungen gemessene spezifische Aktivität beträgt 0,81 μmol/min/mg. Myosin-Leichtkette (108 μg/mL) wird in einem Reaktionsgemisch phosphoryliert, das 25 mM Tris-HCl (pH 7,5), 0,5 mg/mL Rinderserumalbumin, 4 mM MgCl2, 0,5 mM CaCl2, 4,2 nM Calmodulin, 0,92 nM Enzym und 10 μM [γ-32P]ATP (100-900 cpm/pmol) in einem Endvolumen von 0,25 mL enthält. Nach einer 3-minütigen Vorinkubation bei 30 ºC ohne ATP wird die Reaktion durch Zugabe von [γ-32P]ATP bei 30 ºC gestartet und nach 5 min durch Zugabe von 0,125 mL Trichloressigsäure gestoppt. Die säurefällbaren Materialien werden auf einem Nitrozellulosemembranfilter gesammelt und mit vier 1-mL-Aliquoten von 5 % (v/v) Trichloressigsäure gewaschen. Die Radioaktivität auf dem Filter wird in einem Toluol-Szintillationsfluid mit einem Packard Tri-Carb Flüssigszintillationsspektrometer Modell 4530 gemessen. Die unter diesen Bedingungen gemessene spezifische Aktivität beträgt 1,23 μmol/min/mg.
In vivo

Wortmannin inhibits peritoneal metastasis of SW1990 in mice at 1 mg/kg, without any weight loss.

This compound inhibits phosphatidylinositide 3-kinase-protein kinase B (PKB)/Akt phosphorylation in both normal tissues (lung, heart and brain homogenates) and tumor tissue in mice, without mortality or acute toxicity at 0.7 mg/kg. Combination with LY188011, this chemical significantly increases apoptosis and inhibit tumor growth in orthotopic tumor, while both monotherapy could not.

Literatur
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8106400/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8770859/
  • [6] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8968039/
  • [7] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15664519/
  • [8] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16474002/
  • [9] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17135248/
  • [10] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19469020/
  • [11] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19469020/
  • [12] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9766667/
  • [13] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35027451/

Anwendungen (Applications)

Methoden Biomarker Bilder PMID
Western blot p-AKT / AKT / p-GSK3β / GSK3β / Bcl-xl / Bax / Caspase-3 / Cleaved caspase-3
S2758-WB1
25344912
Immunofluorescence DNMT1
S2758-IF1
24001151
Growth inhibition assay Cell viability
S2758-viability1
25344912