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LDN-193189 BMP-Signalweg-Inhibitor

Kat.-Nr.S2618

LDN-193189 (DM3189) ist ein selektiver BMP-Signalweg-Inhibitor, der die ALK1, ALK2, ALK3 und ALK6 mit IC50-Werten von 0,8 nM, 0,8 nM, 5,3 nM und 16,7 nM im Kinase-Assay hemmt. LDN-193189 hemmt die transkriptionelle Aktivität der BMP-Typ-I-Rezeptoren ALK2 und ALK3 mit IC50-Werten von 5 nM bzw. 30 nM in C2C12-Zellen und zeigt eine 200-fache Selektivität für BMP gegenüber TGF-β. Für Zelltests wird das wasserlösliche S7507 LDN-193189 2HCl empfohlen. Dieses Produkt hat eine schlechte Löslichkeit, Tierversuche sind verfügbar, Zellversuche wählen Sie bitte sorgfältig!
LDN-193189 TGF-beta/Smad Inhibitor Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 406.48

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Qualitätskontrolle

Charge: Reinheit: 99.43%
99.43

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration

Zelllinien Assay-Typ Konzentration Inkubationszeit Formulierung Aktivitätsbeschreibung PMID
C2C12 Kinase Assay inhibits the kinase activity of ALK4 and ActRIIA with IC50 values of 101 and 210 nm, respectively 25368322
EOC216 Growth Inhibition Assay 0.1-10 μM 2-10 d DMSO induce cell death in a dose-dependent manner 25227893
OVAC429 Growth Inhibition Assay 2/5 μM 48 h DMSO decreases the percentage of cells in S phas 25227893
SKOV3 Growth Inhibition Assay 2/5 μM 48 h DMSO decreases the percentage of cells in S phas 25227893
OVCA429 Growth Inhibition Assay 2/5 μM 48 h DMSO decreases the percentage of cells in S phas 25227893
EOC219 Growth Inhibition Assay 2/5 μM 48 h DMSO decreases the percentage of cells in S phas 25227893
A549 Growth Inhibition Assay 0.5-16 μM DMSO inhibits cell growth in a dose-dependent manner 24778011
BEAS-2B  Growth Inhibition Assay 0.5-16 μM DMSO inhibits cell growth in a dose-dependent manner 24778011
hBMSCs Function Assay 0.2 μM 7 d abolishes the silibinin-promoted ALP activity partly 24076187
PANC-1 Growth Inhibition Assay 5-500 nM 48 h inhibits cell growth in a dose-dependent manner 23969729
MIA PaCa-2 Growth Inhibition Assay 5-500 nM 48 h inhibits cell growth in a dose-dependent manner 23969729
Bx-PC3 Growth Inhibition Assay 5-500 nM 48 h inhibits cell growth in a dose-dependent manner 23969729
PC3  Function Assay 500 nM 2 h represses activation of Smad1/5/8 and P-Smad3 levels 22452883
LNCaP Function Assay 0–500 nM 2 h reverses rapamycin-induced cell death 22452883
EOC Function Assay 10-1000 nM 72 h reduces the phosphorylated BMP R-Smad1/5/8  22249415
HaCaT  Function Assay 0.001-10 μM 2 h inhibits BMP2-induced phosphorylation of Smad1/5/8 with an IC50 of ~0.005 μM 21740966
HaCaT  Function Assay 0.001-10 μM 2 h inhibits the ability of ALK2 to phosphorylate GST-Smad1 with an IC50 of 45 nM 21740966
HaCaT  Function Assay 0.001-10 μM 2 h inhibits the ability of ALK3 to phosphorylate Smad1 with an IC50 of 100 nM 21740966
HaCaT  Function Assay 0.001-10 μM 2 h inhibits ALK4 and ALK5 with IC50 values of 0.3 μM and 0.5 μM respectively 21740966
C2C12 Function assay 30 mins Inhibition of BMP6-induced ALK2 transcriptional activity in mouse C2C12 cells expressing BRE-Luc after 30 mins by luciferase reporter gene assay, EC50 = 0.014 μM. 30227946
BT-12 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-12 cells 29435139
fibroblast cell qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for control Hh wild type fibroblast cells 29435139
Rh30 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh30 cells 29435139
KB-3-1 Function assay P-glycoprotein substrates identified in KB-3-1 adenocarcinoma cell line, qHTS therapeutic library screen 31515284
C2C12 Function assay 0.1 uM Inhibition of ALK5 in mouse C2C12 cells assessed as decrease in TGFbeta1-induced Smad1/5 phosphorylation at 0.1 uM by Western blot method 28103025
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Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Molekulargewicht 406.48 Formel

C25H22N6

 Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)
CAS-Nr. 1062368-24-4 SDF herunterladen Lagerung von Stammlösungen

Synonyme DM3189 Smiles C1CN(CCN1)C2=CC=C(C=C2)C3=CN4C(=C(C=N4)C5=CC=NC6=CC=CC=C56)N=C3

Löslichkeit

In vitro
Charge:

0.01M HCl : 2.5 mg/mL

DMSO : Insoluble
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse Konzentration Volumen Molekulargewicht
Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo
Charge:

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

mg/kg g μL

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH2O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus

Targets/IC50/Ki
ALK1
(Cell-free assay)
0.8 nM
ALK2
(Cell-free assay)
0.8 nM
ALK3
(Cell-free assay)
5.3 nM
ALK6
(Cell-free assay)
16.7 nM
In vitro

LDN-193189 hemmt potent die BMP4-vermittelte Smad1-, Smad5- und Smad8-Aktivierung mit einer IC50 von 5 nM und hemmt effizient die Transkriptionsaktivität der BMP-Typ-I-Rezeptoren ALK2 und ALK3 mit einer IC50 von 5 nM bzw. 30 nM. Darüber hinaus zeigt diese Verbindung auch eine hemmende Wirkung auf die Transkriptionsaktivität, die entweder durch konstitutiv aktive ALK2R206H- oder ALK2Q207D-Mutationsproteine induziert wird.

Eine aktuelle Studie zeigt, dass diese Chemikalie die Produktion reaktiver Sauerstoffspezies blockiert, die durch oxidiertes LDL während der Atherogenese in menschlichen Endothelzellen der Aorta induziert werden.

Kinase-Assay
Alkalische Phosphatase-Aktivität
C2C12-Zellen werden in 96-Well-Platten mit 2.000 Zellen pro Well in DMEM, ergänzt mit 2 % FBS, ausgesät. Die Wells werden in Vierfachbestimmung mit BMP-Liganden und LDN-193189 oder Vehikel behandelt. Die Zellen werden nach 6 Tagen Kultur in 50 μL Tris-gepufferter Salzlösung und 1 % Triton X-100 gesammelt. Die Lysate werden für 1 Stunde zu p-Nitro-Phenylphosphat-Reagenz in 96-Well-Platten gegeben und anschließend die alkalische Phosphatase-Aktivität (Absorption bei 405 nm) evaluiert. Die Zellviabilität und -quantität werden mit Cell Titer Aqueous One (Absorption bei 490 nm) gemessen, wobei replizierte Wells identisch zu denen für die alkalische Phosphatase-Messung behandelt werden.
In vivo

Bei transgenen Mäusen mit konditionaler caALK2 und Ad.Cre am postnatalen Tag 7 (P7) führt LDN-193189 (3 mg/kg i.p.) zu leichten Verkalkungen um die linke Tibia und Fibula, die erstmals am P13 sichtbar sind, und verhindert radiologische Läsionen am P15, ohne Gewichtsverlust oder Wachstumsverzögerung, spontane Frakturen, verminderte Knochendichte oder Verhaltensauffälligkeiten zu verursachen.

Diese Verbindung dorsaliert Zebrafischembryonen, indem sie Signalwege hemmt, die durch das Knochenmorphogenetische Protein (BMP)6 induziert werden, ohne die vaskuläre Entwicklung zu beeinflussen.

Bei PCa-118b-Tumor-tragenden Mäusen schwächt diese chemische Behandlung das Tumorwachstum ab und reduziert die Knochenbildung in den Tumoren.

Bei LDL-Rezeptor-defizienten (LDLR-/-) Mäusen hemmt dieses Mittel die Entwicklung von Atheromen potent. Darüber hinaus zeigt es auch hemmende Wirkungen auf die damit verbundene vaskuläre Entzündung, osteogene Aktivität und Verkalkung.

Literatur
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22223731/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23646137/

Anwendungen

Methoden Biomarker Bilder PMID
Western blot pSMAD1 / pSMAD5 / pSMAD8 / SMAD1 / SMAD5 / SMAD8 / ID1 / SMAD4 / PARP / Cleaved PARP
S2618-WB1
31098401
Immunofluorescence Tbx18 / Hcn4
S2618-IF1
30906456
Growth inhibition assay Cell viability
S2618-viability1
31098401

Technischer Support

Handhabungshinweise

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

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