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RepSox (E-616452) TGF-beta/Smad Inhibitor

Kat.-Nr.S7223

RepSox (E-616452, SJN 2511, ALK5 Inhibitor II) ist ein potenter und selektiver Inhibitor von TGFβR-1/ALK5 mit einer IC50 von 23 nM und 4 nM für die ATP-Bindung an ALK5 bzw. die ALK5-Autophosphorylierung in zellfreien Assays.

RepSox (E-616452) TGF-beta/Smad Inhibitor Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 287.32

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Qualitätskontrolle

Charge: Reinheit: 99.92%

99.92

Verwandte Ziele	PKC ROCK Bcr-Abl
Weitere TGF-beta/Smad Inhibitoren	SB431542 Vactosertib (TEW-7197) LDN-193189 A-83-01 LDN-193189 Dihydrochloride Galunisertib (LY2157299) SRI-011381 (C381) LY2109761 SIS3 Hydrochloride SB-525334

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration

Zelllinien	Assay-Typ	Konzentration	Inkubationszeit	Formulierung	Aktivitätsbeschreibung	PMID
baculovirus/Sf9 cells	Function assay				Inhibition of recombinant Activin A receptor type II-like kinase (ALK5) expressed in baculovirus/Sf9 cells, IC50=4 nM	15317461
HepG2 cells	Function assay				Stimulation of Transforming growth factor beta receptor I kinase in HepG2 cells, IC50=10 nM	15317461
Sf9	Function assay				Inhibition of human ALK5 expressed in Sf9 insect cells using casein as substrate in presence of [gamma-33P]ATP, IC50 = 0.181 μM.	28135685
Sf9	Function assay				Inhibition of mouse ABL expressed in Sf9 insect cells using GGEAIYAAPFKK as substrate in presence of [gamma-33P]ATP, IC50 = 21 μM.	28135685
HeLa	Function assay	1 uM	30 mins		Inhibition of ALK5 in serum starved human HeLa cells assessed as reduction in TGF-beta-induced SMAD2/3 nuclear transaction at 1 uM pre-incubated for 30 mins before TGF-beta stimulation for 30 mins by immunofluorescence analysis	28135685
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Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Molekulargewicht	287.32	Formel	C₁₇H₁₃N₅	Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)	3 Jahre-20°CPulver
CAS-Nr.	446859-33-2	SDF herunterladen		Lagerung von Stammlösungen	1 Jahr-80°Cin Lösungsmittel 1 Monat-20°Cin Lösungsmittel
Synonyme	SJN 2511,ALK5 Inhibitor II			Smiles	CC1=NC(=CC=C1)C2=C(C=NN2)C3=NC4=C(C=C3)N=CC=C4

Löslichkeit

In vitro
Charge:

DMSO : 57 mg/mL (198.38 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

DMSO : 57 mg/mL (198.38 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

DMSO : 57 mg/mL (198.38 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

DMSO : 57 mg/mL (198.38 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

DMSO : 57 mg/mL (198.38 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse	Konzentration	Volumen	Molekulargewicht
=	×	×

Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo Charge:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

Dosierung: mg/kg Durchschnittsgewicht der Tiere: g Dosiervolumen pro Tier:μL Anzahl der Tiere:

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH₂O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus

Targets/IC₅₀/Ki	TGFβR1(ALK5) (Cell-free assay) 4 nM
In vitro	Es hemmt die ATP-Bindung an ALK5 und die ALK5-Autophosphorylierung mit einem IC50-Wert von 23 nM bzw. 4 nM. Es hemmt auch die TGF-β-induzierte zelluläre PAI-1-Luciferase-Aktivität mit einem IC50-Wert von 18 nM. Diese Verbindung ist in der Lage, Sox2 bei der Reprogrammierung erfolgreich zu ersetzen, indem sie die Signalübertragung des transformierenden Wachstumsfaktors-β (Tgf-β) hemmt, was wiederum die Nanog-Expression induziert. Die Wirkung dieser Substanz, die Reprogrammierung zu induzieren, erfordert keine Chromatin-Remodellierung. Es wurde festgestellt, dass sie bei der Generierung von iPSCs effizient ist.
Kinase-Assay	ALK5-Fluoreszenzpolarisations-Bindungsassay
Kinase-Assay	Die Compound-Bindung an ALK5 wird an gereinigtem rekombinantem GST-ALK5 (Reste 198-503) getestet. Die Verdrängung eines Rhodamin-Grün-fluoreszenzmarkierten ATP-kompetitiven Inhibitors durch verschiedene Konzentrationen von Testverbindungen wird verwendet, um einen pIC50-Wert zu berechnen. GST-ALK5 wird einem Puffer zugesetzt, der 62,5 mM Hepes, pH 7,5, 1 mM DTT, 12,5 mM MgCl₂, 1,25 mM CHAPS und 1 nM Rhodamin-Grün-markierten Liganden enthält, so dass die endgültige ALK5-Konzentration basierend auf der aktiven Zentrums-Titration des Enzyms 10 nM beträgt. Vierzig Mikroliter des Enzym-/Ligandenreagenz werden zu 384-Well-Assay-Platten hinzugefügt, die 1 μL unterschiedlicher Konzentrationen dieser Substanz enthalten. Die Platten werden sofort an einem Fluoreszenzlesegerät mit Anregungs-, Emissions- und dichroitischen Filtern von 485, 530 bzw. 505 nm ausgelesen. Die Fluoreszenzpolarisation für jede Well wird von Acquest berechnet und dann in eine Kurvenanpassungssoftware zur Erstellung von Konzentrations-Wirkungs-Kurven importiert.
In vivo	Bei Injektion in Blastozysten kann es zur Bildung chimärer Embryonen in vivo beitragen. Eine eintägige Behandlung mit dieser Verbindung reicht aus, um transgenes Sox2 zu ersetzen.
Literatur	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15317461/ [2] http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3335195/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36207615/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32066676/

Anwendungen

Methoden	Biomarker	Bilder	PMID
Western blot	α-SMA / Calponin / Histone H3		30365043
Immunofluorescence	Smad2/3 / cytokeratin		28729719

Technischer Support

Handhabungshinweise

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Wenn Sie weitere Fragen haben, hinterlassen Sie bitte eine Nachricht.

product.CellLines}	product.AssayType}	product.Concentration}	product.IncubationTime}	product.Formulation}	product.ActivityDescription}	PMID

Verdünnungsrechner

Berechnen Sie die erforderliche Verdünnung zur Herstellung einer Stammlösung. Der Selleck-Verdünnungsrechner basiert auf der folgenden Gleichung:

Konzentration _(Start) x Volumen _(Start) = Konzentration _(Ende) x Volumen _(Ende)

Diese Gleichung wird üblicherweise abgekürzt als: C1V1 = C2V2 ( Eingabe Ausgabe )

*Verwenden Sie bei der Herstellung von Stammlösungen immer das chargenspezifische Molekulargewicht des Produkts, das auf dem Etikett des Vials und im MSDS / COA (online verfügbar) angegeben ist.

Die Gleichung des Seriellen Verdünnungsrechners

Serielle Verdünnungen

Konzentration (Start):

Verdünnungsfaktoren:

Berechnetes Ergebnis

C1=C0/X	C1:		LOG(C1):
C2=C1/X	C2:		LOG(C2):
C3=C2/X	C3:		LOG(C3):
C4=C3/X	C4:		LOG(C4):
C5=C4/X	C5:		LOG(C5):
C6=C5/X	C6:		LOG(C6):
C7=C6/X	C7:		LOG(C7):
C8=C7/X	C8:		LOG(C8):