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D 4476 Casein Kinase Inhibitor

Name: D 4476
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7642
Rating: 5 (21 reviews)

Kat.-Nr.S7642

D 4476 ist ein potenter, selektiver und zellgängiger CK1 (casein kinase 1) Inhibitor mit einer IC50 von 200 nM und 300 nM in einem zellfreien Assay für CK1 aus Schizosaccharomyces pombe bzw. CK1δ. Wirkt auch als ALK5 Inhibitor mit einer IC50 von 500 nM.

D 4476 Casein Kinase Inhibitor Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 398.41

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Qualitätskontrolle

Charge: Reinheit: 99.73%

99.73

Verwandte Ziele	Dehydrogenase HSP Transferase P450 (e.g. CYP17) PDE phosphatase PPAR Vitamin Carbohydrate Metabolism Mitochondrial Metabolism
Weitere Casein Kinase Inhibitoren	Silmitasertib (CX-4945) Silmitasertib (CX-4945) sodium salt TBB IC261 PF-670462 Ellagic Acid hydrate TTP 22 Longdaysin PF 4800567 (E/Z)-GO289

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration

Zelllinien	Assay-Typ	Konzentration	Inkubationszeit	Formulierung	Aktivitätsbeschreibung	PMID
A375 cells	Function assay	10-80 μM	48 h		Inhibition of CK1-MDM2 complex in human A375 cells assessed as increase in p21 protein level at 10 to 80 uM after 48 hrs by immunoblotting analysis
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Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Molekulargewicht	398.41	Formel	C₂₃H₁₈N₄O₃	Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)	3 Jahre-20°CPulver
CAS-Nr.	301836-43-1	SDF herunterladen		Lagerung von Stammlösungen	1 Jahr-80°Cin Lösungsmittel 1 Monat-20°Cin Lösungsmittel
Synonyme	N/A			Smiles	C1COC2=C(O1)C=CC(=C2)C3=C(NC(=N3)C4=CC=C(C=C4)C(=O)N)C5=CC=CC=N5

Löslichkeit

In vitro
Charge:

DMSO : 79 mg/mL (198.28 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

DMSO : 79 mg/mL (198.28 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 79 mg/mL

Water : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse	Konzentration	Volumen	Molekulargewicht
=	×	×

Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo Charge:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 Corn oil Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	3.950mg/ml (9.91mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 79 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

Dosierung: mg/kg Durchschnittsgewicht der Tiere: g Dosiervolumen pro Tier:μL Anzahl der Tiere:

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH₂O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus

Targets/IC₅₀/Ki	CK1 from Schizosaccharomyces pombe 200 nM CK1δ 300 nM ALK5 500 nM
In vitro	D4476 (10 μM) hemmt CK1 und ALK5 effektiv mit Aktivitäten von etwa 7 % bzw. 22 % im Vergleich zur Kontrollgruppe. In H4IIE-Hepatomzellen hemmt D4476 spezifisch die Phosphorylierung des endogenen Forkhead-Box-Transkriptionsfaktors O1a (FOXO1a) an Ser322 und Ser325, ohne die Phosphorylierung anderer Stellen zu beeinflussen. D4476 induziert Zytotoxizität in den Linien ANBL6, INA6 und RPMI8226; die Linien MM1S und U266 sind weniger empfindlich; und die Linie OPM1 ist vollständig resistent. Hohe Konzentrationen (50 μM) von D4476 induzierten Toxizität in allen Multiplen Myelom (MM)-Linien. In MM-Zellen erhöht D4476 die Proteinspiegel von TP53, P27 und FADD sowie die Zellzyklusprogression und die Induktion der Apoptose. Die Behandlung von Leukämie-Stammzellen (LSCs) mit D4476 zeigt eine hochselektive Abtötung von LSCs gegenüber normalen HSPCs.
Kinase-Assay	CK1 kinase assay
Kinase-Assay	Alle Proteinkinase-Assays (25 μL) werden bei Raumtemperatur (21℃) durchgeführt. Die Assays werden 40 min lang mit einer Biomek 2000 Laboratory Automation Workstation in einem 96-Well-Format durchgeführt. Die Konzentrationen von Magnesiumacetat und [γ-^33P]ATP (800 cpm/pmol) in den Assays betragen 10 mM bzw. 0,1 mM. Die Assays werden mit MgATP gestartet und durch Zugabe von 5 μL 0,5 M Orthophosphorsäure gestoppt. Aliquots werden dann auf P30-Filtermatten getupft, viermal in 75 mM Phosphorsäure gewaschen, um ATP zu entfernen, einmal in Methanol, dann getrocknet und auf Radioaktivität gezählt. CK1 δ (5-20 m-Einheiten), verdünnt in 20 mM Hepes, pH 7,5, 0,15 M NaCl, 0,1 mM EGTA, 0,1 % (v/v) Triton X-100, 5 mM Dithiothreit, 50 % (v/v) Glycerin, wird gegen das Peptid RRKDLHDDEEDEAMSITA in einer Inkubation getestet, die 20 mM Hepes, pH 7,5, 0,15 M NaCl, 0,1 mM EDTA, 5 mM DTT, 0,1 % (v/v) Triton X-100 und 0,5 mM Substratpeptid enthält.
Literatur	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14710188/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24962017/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24616378/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12534346/

Anwendungen

Methoden	Biomarker	Bilder	PMID
Western blot	MDM2 / p53 / p21 / E2F-1 / pRB		19759023

Technischer Support

Handhabungshinweise

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Wenn Sie weitere Fragen haben, hinterlassen Sie bitte eine Nachricht.

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C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
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C8=C7/X	C8:	LOG(C8):