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GSK2606414 PERK Inhibitor

Name: GSK2606414
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7307
Rating: 5 (96 reviews)

Kat.-Nr.S7307

GSK2606414 ist ein oral verfügbarer, potenter und selektiver PERK-Inhibitor mit einer IC50 von 0,4 nM, der eine mindestens 100-fache Selektivität gegenüber den anderen untersuchten EIF2AKs aufweist. Diese Verbindung beeinträchtigt die GANT-61-induzierte Autophagy in NB-Zellen mit MYCN-Amplifikation. Es verstärkt die ER stress-induced apoptosis in HCT116-Zellen, während es die apoptosis in SIL1 KD HeLa-Zellen reduziert.

GSK2606414 PERK Inhibitor Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 451.44

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Qualitätskontrolle

Charge: Reinheit: 99.92%

99.92

Verwandte Ziele	Bcl-2 Caspase PD-1/PD-L1 Ferroptosis p53 Apoptosis related Synthetic Lethality STAT TNF-alpha Ras
Weitere PERK Inhibitoren	GSK2656157 Salubrinal ISRIB (trans-isomer) Azoramide Sal003 BTdCPU CCT020312 MK-28 AMG PERK 44

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration

Zelllinien	Assay-Typ	Konzentration	Inkubationszeit	Aktivitätsbeschreibung	PMID
L929	Anti-neprotic assay			Anti-neprotic activity in mouse L929 cells assessed as reduction in TNF-induced necroptosis and measured every 1 hr by SYTOX Green dye based fluorescence assay, IC50=0.0004μM.	31622096
MEF	Anti-neprotic assay			Anti-neprotic activity in mouse MEF cells assessed as reduction in TNF-induced necroptosis and measured every 1 hr in presence of z-VAD by SYTOX Green dye based fluorescence assay, IC50=0.0073μM.	31622096
A549	Function assay		2 hrs	Inhibition of thapsigargin-induced autophosphorylation of PERK in human A549 cells after 2 hrs by Western blotting, IC50<0.03μM.	22827572
A549	Function assay		1 hr	Inhibition of thapsigargin-induced autophosphorylation of PERK in human A549 cells preincubated for 1 hr followed by thapsigargin-induction measured after 1 hr by Western blotting analysis, IC50<0.03μM.	24900593
A549	Function assay	0.03 uM	2 hrs	Inhibition of thapsigargin-induced autophosphorylation of PERK in human A549 cells at 0.03 uM after 2 hrs by Western blotting	22827572
Caco-2	Function assay		48 hours	Determination of IC50 values for inhibition of SARS-CoV-2 induced cytotoxicity of Caco-2 cells after 48 hours by high content imaging, IC50=0.25μM.	ChEMBL
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Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Molekulargewicht	451.44	Formel	C₂₄H₂₀F₃N₅O	Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)	3 Jahre-20°CPulver
CAS-Nr.	1337531-36-8	SDF herunterladen		Lagerung von Stammlösungen	1 Jahr-80°Cin Lösungsmittel 1 Monat-20°Cin Lösungsmittel
Synonyme	N/A			Smiles	CN1C=C(C2=C(N=CN=C21)N)C3=CC4=C(C=C3)N(CC4)C(=O)CC5=CC(=CC=C5)C(F)(F)F

Löslichkeit

In vitro
Charge:

DMSO : 90 mg/mL (199.36 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 19 mg/mL

Water : Insoluble

DMSO : 90 mg/mL (199.36 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 19 mg/mL

Water : Insoluble

DMSO : 200 mg/mL (443.02 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 21 mg/mL

Water : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse	Konzentration	Volumen	Molekulargewicht
=	×	×

Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo Charge:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 Corn oil Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	4.500mg/ml (9.97mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 90 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5% DMSO 1 45% PEG 300 2 ddH2O Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	1.000mg/ml (2.22mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 20 mg/ml clarified DMSO stock solution to 450 μL PEG 300, mix evenly to clarify it; then continue to add 500 μL ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	10.000mg/ml (22.15mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 200 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	0.900mg/ml (1.99mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 18 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

Dosierung: mg/kg Durchschnittsgewicht der Tiere: g Dosiervolumen pro Tier:μL Anzahl der Tiere:

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH₂O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus

Merkmale	The first PERK-selective inhibitor with good oral bioavailability and crosses the blood-brain barrier.
Targets/IC₅₀/Ki	EIF2AK3 (PERK) (Cell-free assay) 0.4 nM
In vitro	Diese Verbindung hemmt die PERK-Autophosphorylierung in A459-Zellen mit einer IC50 von <0,3 μM.
Kinase-Assay	PKR-ähnliche Endoplasmatisches Retikulum Kinase (PERK) Assay (HTRF-Format)
Kinase-Assay	Die zytoplasmatische Domäne von GST-PERK wird käuflich erworben. 6-His-Volllängen-Human-eIF2α wird aus Baculovirus-Expression in Sf9-Insektenzellen gereinigt. Das eIF2α-Protein wird durch Dialyse in PBS umgepuffert, chemisch durch NHS-LC-Biotin modifiziert und anschließend durch Dialyse in 50 mM Tris, pH 7,2, 250 mM NaCl, 5 mM DTT umgepuffert. Das Protein wird aliquotiert und bei –80 °C gelagert. Die Quench-Lösung wird frisch zubereitet und ergibt bei Zugabe zur Reaktion Endkonzentrationen von 4 nM eIF2α-Phospho-Ser51-Antikörper, 4 nM Eu-1024-markiertem Anti-Kaninchen-IgG, 40 nM Streptavidin Surelight APC und 15 mM EDTA. Die Reaktionen wurden in schwarzen 384-Well-Polystyrol-Low-Volume-Platten in einem Endvolumen von 10 μL durchgeführt. Das Reaktionsvolumen enthält in Endkonzentrationen 10 mM HEPES, 5 mM MgCl₂, 5 μM ATP, 1 mM DTT, 2 mM CHAPS, 40 nM biotinyliertes 6-His-eIF2α und 0,4 nM GST-PERK. Die zu analysierenden Verbindungen werden in DMSO auf 1,0 mM gelöst und seriell 1–3 mit DMSO über 11 Verdünnungen verdünnt. Eine Menge von 0,1 μL jeder Konzentration wird in das entsprechende Well einer Assay-Platte überführt. Dies erzeugt einen Endkonzentrationsbereich der Verbindung von 0,00017 bis 10 μM. Die GST-PERK-Lösung wird zu den Assay-Platten mit Verbindungen gegeben und 30 min bei Raumtemperatur vorinkubiert. Die Reaktion wird durch Zugabe von ATP und eIF2α-Substratlösung initiiert. Nach 1 Stunde Inkubation wird die Quench-Lösung hinzugefügt. Die Platten werden 2 Stunden bei Raumtemperatur abgedeckt, bevor das Signal bestimmt wird. Das resultierende Signal wird auf einem Viewlux-Lesegerät quantifiziert. Das APC-Signal wird durch Transformation der Daten mittels einer APC/Eu-Berechnung auf das Europium-Signal normalisiert. Die Daten für die Konzentrations-Wirkungs-Kurven werden als % Hemmung, berechnet mit der Datenreduktionsformel 100 × [1 – (U1 – C2)/(C1 – C2)], gegenüber der Konzentration der Verbindung aufgetragen, wobei U der unbekannte Wert, C1 der durchschnittliche Kontrollwert für 1% DMSO und C2 der durchschnittliche Kontrollwert für 0,1 M EDTA ist. Die Daten werden mit einer Kurve angepasst, die beschrieben wird durch , wobei A die minimale Reaktion, B die maximale Reaktion, D der Steigungsfaktor, x die Konzentration der Verbindung und C die IC50 ist. Die Ergebnisse für jede Verbindung werden als IC50-Werte aufgezeichnet.
In vivo	GSK2606414 weist eine hohe orale Bioverfügbarkeit und eine geringe bis moderate Blutclearance bei Maus, Ratte und Hund auf. Diese oral verabreichte Verbindung hemmt das Tumorwachstum dosisabhängig in Mäusen mit pankreatischen humanen BxPC3-Tumoren.
Literatur	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22827572/

Anwendungen

Methoden	Biomarker	Bilder	PMID
Western blot	p-PERK / PERK p-KIT / KIT / p-STAT5 / p-ERK		28332979

Technischer Support

Handhabungshinweise

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Wenn Sie weitere Fragen haben, hinterlassen Sie bitte eine Nachricht.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):