Name: PD0166285
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S8148
Rating: 5 (8 reviews)

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Qualitätskontrolle

Charge: S814801 DMSO]100 mg/mL]false]Ethanol]100 mg/mL]false]Water]Insoluble]false Reinheit: 99.59%

In Nature Medicine für seine erstklassige Qualität zitiert
COA
NMR
SDS
Datenblatt

99.59

Verwandte Ziele	CDK HSP PD-1/PD-L1 ROCK DNA/RNA Synthesis Microtubule Associated Ras KRas Aurora Kinase Casein Kinase
Weitere Wee1 Inhibitoren	Adavosertib (AZD1775, MK-1775) Zedoresertib (Debio-0123, WEE1-IN-5) Azenosertib (Zn-C3) Potrasertib

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration

Zelllinien	Assay-Typ	Konzentration	Inkubationszeit	Aktivitätsbeschreibung	PMID
NIH3T3	Function assay			Inhibition of PDGF-induced autophosphorylation of PDGF-R in NIH3T3 cells, IC50=0.0018μM	9703473
C6	Function assay			Inhibition of PDGF-induced autophosphorylation of PDGF-R in C6 cells, IC50=0.005μM	9703473
MCF-7	Function assay	12 mg/kg		Weight change of MCF-7 tumor cells in mice at 12 mg/kg peroral dose, days 1-15 administration	9703473
C6	Function assay		2 hr	Inhibition of PDGF-stimulated Platelet-derived growth factor receptor autophosphorylation in C6 rat glioma cells after 2 hr, IC50=0.005μM	9784112
RAVSMCs	Function assay		2 hr	Inhibition of PDGF-stimulated Platelet-derived growth factor receptor autophosphorylation in rat aortic vascular smooth muscle cells (RAVSMCs) after 2 hr, IC50=0.0065μM	9784112
SW-620	Function assay			Inhibitory activity against SW-620 human colon adenocarcinoma cells was determined, IC50=0.27μM	10956222
HT-29	Function assay			Inhibitory activity against HT-29 human colon adenocarcinoma cells was determined, IC50=0.28μM	10956222
HCT-8	Function assay			Inhibitory activity against HCT-8 human colon adenocarcinoma cells was determined, IC50=0.42μM	10956222
HEK293	Function assay			Binding affinity to human full-length His-tagged Myt1 kinase expressed in HEK293 cells by TR-FRET based binding assay, IC50=0.0072μM	22770610
MDA-MB-231	Antiproliferative assay		72 hrs	Antiproliferative activity against human MDA-MB-231 cells measured after 72 hrs by CellTiter-Blue assay, IC50=0.16μM	28792760
HEK293T	Antiproliferative assay		72 hrs	Antiproliferative activity against HEK293T cells measured after 72 hrs by CellTiter-Blue assay, IC50=0.29μM	28792760
MM1S	Antiproliferative assay		72 hrs	Antiproliferative activity against human MM1S cells measured after 72 hrs by CellTiter-Blue assay, IC50=0.52μM	28792760
TC32	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for TC32 cells	29435139
DAOY	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for DAOY cells	29435139
SJ-GBM2	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells	29435139
A673	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells	29435139
SK-N-MC	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells	29435139
BT-37	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-37 cells	29435139
NB-EBc1	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells	29435139
U-2 OS	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for U-2 OS cells	29435139
Saos-2	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells	29435139
SK-N-SH	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-SH cells	29435139
NB1643	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells	29435139
LAN-5	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells	29435139
BT-12	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-12 cells	29435139
Rh18	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh18 cells	29435139
OHS-50	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells	29435139
RD	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells	29435139
MG 63 (6-TG R)	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells	29435139
Rh41	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh41 cells	29435139
NB1643	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for NB1643 cells	29435139
A673	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for A673 cells)	29435139
SK-N-MC	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for SK-N-MC cells	29435139
BT-12	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for BT-12 cells	29435139
DAOY	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for DAOY cells	29435139
NB-EBc1	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for NB-EBc1 cells	29435139
SJ-GBM2	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for SJ-GBM2 cells	29435139
BT-37	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for BT-37 cells	29435139
TC32	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for TC32 cells	29435139
MG 63 (6-TG R)	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for MG 63 (6-TG R) cells	29435139
U-2 OS	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for U-2 OS cells	29435139
Rh41	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for Rh41 cells	29435139
RD	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for RD cells	29435139
Rh18	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for Rh18 cells	29435139
Rh30	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for Rh30 cells	29435139
Saos-2	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for Saos-2 cells	29435139
OHS-50	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for OHS-50 cells	29435139
SK-N-SH	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for SK-N-SH cells	29435139
HEK293	qHTS assay			Inhibition of human full length PKMYT1 expressed in HEK293 cells using EFS (247 to 259 residues) as substrate after 1 hr by fluorescence polarization immunoasay, Ki=0.0008μM	29941193
HEK293	qHTS assay			Inhibition of human full length PKMYT1 expressed in HEK293 cells using EFS (247 to 259 residues) as substrate after 1 hr by fluorescence polarization immunoasay, IC50=0.008μM	29941193
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Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Molekulargewicht	512.43	Formel	C₂₆H₂₇Cl₂N₅O₂	Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)	3 Jahre-20°CPulver
CAS-Nr.	185039-89-8	SDF herunterladen		Lagerung von Stammlösungen	1 Jahr-80°Cin Lösungsmittel 1 Monat-20°Cin Lösungsmittel
Synonyme	N/A			Smiles	CCN(CC)CCOC1=CC=C(C=C1)NC2=NC=C3C=C(C(=O)N(C3=N2)C)C4=C(C=CC=C4Cl)Cl

Löslichkeit

In vitro
Charge:

DMSO : 100 mg/mL (195.14 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 100 mg/mL

Water : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse	Konzentration	Volumen	Molekulargewicht
=	×	×

Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo Charge:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	2.500mg/ml (4.88mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 50 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	0.500mg/ml (0.98mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 10 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

Dosierung: mg/kg Durchschnittsgewicht der Tiere: g Dosiervolumen pro Tier:μL Anzahl der Tiere:

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH₂O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus

Targets/IC₅₀/Ki	Wee1 (Cell-free assay) 24 nM Myt1 (Cell-free assay) 72 nM Chk1 (Cell-free assay) 3.4 μM
In vitro	PD0166285 inhibiert nachweislich die Wee1-Aktivität in nanomolaren Konzentrationen. Der Inhibitor hebt den G2/M-Kontrollpunkt auf und induziert eine frühe Zellteilung. Auf zellulärer Ebene inhibiert 0,5 μM dieser Verbindung die strahleninduzierte Cdc2-Phosphorylierung an Tyr-15 und Thr-14 in sieben von sieben getesteten Krebszelllinien dramatisch. Diese Aufhebung des G2-Kontrollpunkts durch diese Chemikalie tötet nachweislich Krebszellen ab. Es inhibiert Cdc2/Cyclin B nicht, aber Chk1-Kinase bei einer viel höheren Konzentration (3433 nM). Die Behandlung von Zellen mit dem Inhibitor ist mit Mikrotubuli-Stabilisierung und einer Abnahme der Cyclin-D-Transkription verbunden. Daher kann diese Verbindung eine potenziell nützliche Anti-Krebs-Therapie sein.
Kinase-Assay	Wee1-Massenscreening
Kinase-Assay	Das Wee1-Massenscreening wird mit dem p34cdc2-Kinase-SPA-Kit von Amersham mit einigen Modifikationen durchgeführt. Kurz gesagt, 45–60 nM vollständige Wee1-Kinase wird mit 25 μM dieser Verbindung, 20 μM ATP und 122–441 nM Cdc2/Cyclin B in einem Endvolumen von 50 μl Enzymverdünnungspuffer [50 mM Tris (pH 8,0), 10 mM NaCl, 10 mM MgCl2, 1 mM DTT und 0,1 mM Na3VO4] inkubiert. Nach 30 Minuten Inkubation bei 30 °C werden 30 μl [33P]ATP-haltiger Kinasepuffer [67 mM Tris (pH 8,0), 40 mM NaCl, 13 mM MgCl2, 1 mM DTT und 0,13 mM Na3VO4], der 1 μM biotinyliertes Peptid und 0,25 μCi [γ-33P]ATP enthält, zur Reaktion gegeben und weitere 30 Minuten bei 30 °C inkubiert. Die Reaktion wird durch Zugabe von 200 μl Stopppuffer [50 μM ATP, 5 mM EDTA, 0,1 % Triton X-100 und 1,25 mg/ml SPA-Beads in PBS] gestoppt. Nach Zentrifugation bei 2400 U/min für 15 Minuten wird die Platte mit Wallacs Microbeta-Zähler gezählt.
In vivo	PD0166285 in einer Konzentration von 0,5 μM kann die Cdc2Y15/T14-Phosphorylierung in allen getesteten Zelllinien hemmen, unabhängig von ihrem p53-Status, und die pharmakologische Hemmung von WEE1 durch diese Verbindung sensibilisiert U251-FM-GBM-Tumoren für IR in vivo.
Literatur	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11719452/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17177986/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20832752/

Anwendungen

Methoden	Biomarker	Bilder	PMID
Western blot	p-Cdc2 / Cdc2 / Wee1 / Cyclin B		17177986
Immunofluorescence	Wee1 / α-tubulin		17177986

Technischer Support

Handhabungshinweise

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Wenn Sie weitere Fragen haben, hinterlassen Sie bitte eine Nachricht.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
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PD0166285 Wee1 Inhibitor

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 512.43