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nur für Forschungszwecke

GSK690693 pan-Akt-Inhibitor

Kat.-Nr.: S1113

GSK690693 ist ein pan-Akt-Inhibitor, der Akt1/2/3 mit IC50 von 2 nM/13 nM/9 nM in zellfreien Assays hemmt und auch empfindlich gegenüber der AGC-Kinase-Familie ist: PKA, PrkX und PKC-Isoenzyme. GSK690693 hemmt auch potent AMPK und DAPK3 aus der CAMK-Familie mit IC50 von 50 nM bzw. 81 nM. GSK690693 beeinflusst die Aktivität von Unc-51-like autophagy activating kinase 1 (ULK1) und hemmt robust die STING-abhängige IRF3-Aktivierung. Phase 1.
GSK690693 Akt Inhibitor Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 425.48

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Qualitätskontrolle (Quality Control)

Charge: Reinheit: 99.09%
99.09

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Zelllinien Assay-Typ Konzentration Inkubationszeit Formulierung Aktivitätsbeschreibung PMID
LNCaP Proliferation assay Antiproliferative activity against human LNCaP cells, IC50=20 nM 18800763
BT474 Proliferation assay Antiproliferative activity against human BT474 cells, IC50=50 nM 18800763
Sf9 Function assay Inhibition of human recombinant ROCK1 expressed in Sf9 cells, IC50=0.89 μM 18800763
NCI-H460 Growth inhibition assay 72 h Growth inhibition of human NCI-H460 cells after 72 hrs by coulter counter method, IC50=5.4 μM 24900862
PC3 Proliferation assay 72 h Antiproliferative activity against human PC3 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50=15.5 μM 24308997
HFF Cytotoxic assay Cytotoxicity against HFF cells, IC50=16.3 μM 18800763
LNCAP Antiproliferative assay Antiproliferative activity against human LNCAP cells, IC50 = 0.021 μM. 19179070
BT474 Antiproliferative assay Antiproliferative activity against human BT474 cells, IC50 = 0.069 μM. 19179070
BT474 Function assay Inhibition of GSK3-beta phosphorylation in human BT474 cells, IC50 = 0.138 μM. 19179070
JVM2 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human JVM2 cells after 72 hrs by CellTiter Glo assay, IC50 = 1.6 μM. 28704757
JeKo1 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human JeKo1 cells after 72 hrs by CellTiter Glo assay, IC50 = 3 μM. 28704757
Z138 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human Z138 cells after 72 hrs by CellTiter Glo assay, IC50 = 3.1 μM. 28704757
SP49 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human SP49 cells after 72 hrs by CellTiter Glo assay, IC50 = 4.8 μM. 28704757
Maver1 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human Maver1 cells after 72 hrs by CellTiter Glo assay, IC50 = 5.1 μM. 28704757
C6 Function assay 24 hrs Inhibition of Akt in rat C6 cells after 24 hrs by ELISA, IC50 = 6.97 μM. 29966916
C6 Cytotoxicity assay 24 hrs Cytotoxicity against rat C6 cells assessed as decrease in cell viability after 24 hrs by MTT assay, IC50 = 14.5 μM. 29966916
A549 Function assay 24 hrs Inhibition of Akt in human A549 cells after 24 hrs by ELISA, IC50 = 17.33 μM. 29966916
Mino Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human Mino cells after 72 hrs by CellTiter Glo assay, IC50 = 20.8 μM. 28704757
A673 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells 29435139
RD qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells 29435139
NB1643 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells 29435139
SJ-GBM2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
NB-EBc1 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells 29435139
LAN-5 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells 29435139
MCL Antiproliferative assay 24 hrs Antiproliferative activity against primary human MCL cells up to 60 uM after 24 hrs by CellTiter Glo assay 28704757
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Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität (Chemical Information, Storage & Stability)

Molekulargewicht 425.48 Formel

C21H27N7O3

 Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)
CAS-Nr. 937174-76-0 SDF herunterladen Lagerung von Stammlösungen

Synonyme N/A Smiles CCN1C2=C(C(=NC=C2OCC3CCCNC3)C#CC(C)(C)O)N=C1C4=NON=C4N

Löslichkeit (Solubility)

In vitro
Charge:

DMSO : 21 mg/mL (49.35 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse Konzentration Volumen Molekulargewicht
Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo
Charge:

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

mg/kg g μL

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH2O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
ULK1
STING
AMPK
Akt1
(Cell-free assay)
2 nM
PKCη
(Cell-free assay)
2 nM
PKCθ
(Cell-free assay)
2 nM
PrkX
(Cell-free assay)
5 nM
Akt3
(Cell-free assay)
9 nM
Akt2
(Cell-free assay)
13 nM
PKCδ
(Cell-free assay)
14 nM
PKCβ
(Cell-free assay)
19 nM
PKCε
(Cell-free assay)
21 nM
PKA
(Cell-free assay)
24 nM
PKG1β
(Cell-free assay)
33 nM
In vitro

GSK690693 is very selective for the Akt isoforms versus the majority of kinases in other families. However, this compound is less selective for members of the AGC kinase family including PKA, PrkX, and PKC isozymes with IC50 of 24 nM, 5 nM, and 2-21 nM, respectively. It also potently inhibits AMPK and DAPK3 from the CAMK family with IC50 of 50 nM and 81 nM, respectively, and PAK4, 5, and 6 from the STE family with IC50 of 10 nM, 52 nM, and 6 nM, respectively. This chemical inhibits the phosphorylation of GSK3β in tumor cells with IC50 ranging from 43 nM to 150 nM. Its treatment leads to a dose-dependent increase in the nuclear accumulation of the transcription factor FOXO3A. This compound potently inhibits the proliferation of T47D, ZR-75-1, BT474, HCC1954, MDA-MB-453, and LNCaP cells with IC50 of 72 nM, 79 nM, 86 nM, 119 nM, 975 nM, and 147 nM, respectively. Its treatment induces apoptosis at concentrations >100 nM in both LNCaP and BT474 cells. Consistent with the role of AKT in cell survival, it induces apoptosis in sensitive ALL cell lines.

Kinase-Assay
In-vitro-Kinase-Assays
His-markierte, vollständige Akt1, 2 oder 3 werden aus Baculovirus exprimiert und gereinigt. Die Aktivierung erfolgt mit gereinigtem PDK1 zur Phosphorylierung von Thr308 und gereinigtem MK2 zur Phosphorylierung von Ser473. Um die zeitabhängige Hemmung von Akt genauer zu messen, werden aktivierte Akt-Enzyme mit GSK690693 in verschiedenen Konzentrationen bei Raumtemperatur für 30 Minuten inkubiert, bevor die Reaktion durch Zugabe des Substrats eingeleitet wird. Die Endreaktion enthält 5 nM bis 15 nM Akt1-, 2- und 3-Enzyme; 2 μM ATP; 0,15 μCi/μL [γ-33P]ATP; 1 μM Peptid (Biotin-aminohexansäure-ARKR-ERAYSFGHHA-amid); 10 mM MgCl2; 25 mM MOPS (pH 7,5); 1 mM DTT; 1 mM CHAPS; und 50 mM KCl. Die Reaktionen werden 45 Minuten bei Raumtemperatur inkubiert und anschließend mit Leadseeker-Beads in PBS, das EDTA enthält (Endkonzentration: 2 mg/mL Beads und 75 mM EDTA), abgebrochen. Die Platten werden dann versiegelt, die Beads dürfen sich mindestens 5 Stunden lang absetzen, und die Produktbildung wird mit einem Viewlux Imager quantifiziert.
In vivo

A single administration of GSK690693 inhibits GSK3β phosphorylation in human breast carcinoma (BT474) xenografts in a dose- and time-dependent manner. Similarly, this compound induces a reduction in phosphorylation of the Akt substrates, PRAS40, and FKHR/FKHRL1. It also results in an acute increase in blood glucose, returning to baseline 8 to 10 hours after drug administration. Administration of this chemical induces reductions in phosphorylated Akt substrates in vivo, and potently inhibits the growth of human SKOV-3 ovarian, LNCaP prostate, and BT474 and HCC-1954 breast carcinoma xenografts, with maximal inhibition of 58% to 75% at the dose of 30 mg/kg/day. This compound exhibits efficacy irrespective of the mechanism of Akt activation involved. It is most effective in delaying tumor progression in Lck-MyrAkt2 mice expressing a membrane-bound, constitutively active form of Akt.

Literatur
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29694889/

Anwendungen (Applications)

Methoden Biomarker Bilder PMID
Western blot p-Akt / Akt / p-GSK3 / p-mTOR / mTOR / p-p70S6K / p-FoxO3a / p-FoxO1 pPRAS40 / PRAS40 / pBAD / BAD
S1113-WB1
20075391
Growth inhibition assay Cell viability
S1113-viability1
20075391

Klinische Studieninformationen (Clinical Trial Information)

(Daten von https://clinicaltrials.gov, aktualisiert am 2024-05-22)

NCT-Nummer Rekrutierung Erkrankungen Sponsor/Kooperationspartner Startdatum Phasen
NCT00666081 Withdrawn
Cancer
GlaxoSmithKline
 April 2008 Phase 1
NCT00493818 Terminated
Cancer
GlaxoSmithKline
 April 2007 Phase 1

Häufig gestellte Fragen (Frequently Asked Questions)

Frage 1:
Why did pAKT increase after treatment with it?

Antwort:
It actually inhibits AKT, but does not necessarily decrease p-Akt level. Treatment with this compound caused AKT hyper phosphorylation which has already been reported in some papers. (For example, http://www.bloodjournal.org/content/113/8/1723.short?sso-checked=true). To test the inhibition of AKT activity, you might have to look at the level of AKT substrates.