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SC79 Akt Aktivator

Kat.-Nr.S7863

SC79 ist ein hirngängiger Akt-Phosphorylierungsaktivator und ein Inhibitor der Akt-PH-Domänen-Translokation.
SC79 Akt Aktivator Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 364.78

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Charge: Reinheit: >97%
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97

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration

Zelllinien Assay-Typ Konzentration Inkubationszeit Formulierung Aktivitätsbeschreibung PMID
A549 Apoptosis assay 5 μmol/L SC80 blocks vitexin-induced apoptosis 30797236
HeLa Function assay decreased the number of autophagosomes induced by HVJ-E in cells 30534001
SH-SY5Y Function assay 10 μM 30 min pre-treatment with SC79 (10 μM) largely attenuated H2O2-induced survival reduction 29560097
Sertoli Function assay 5.5 µM 30 min up-regulate the PFOS-induced down-regulation of p-Akt1 T308 and p-Akt1 S473 28439067
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Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Molekulargewicht 364.78 Formel

C17H17ClN2O5

Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)
CAS-Nr. 305834-79-1 SDF herunterladen Lagerung von Stammlösungen

Synonyme N/A Smiles CCOC(=O)C1=C(OC2=C(C1C(C#N)C(=O)OCC)C=C(C=C2)Cl)N

Löslichkeit

In vitro
Charge:

DMSO : 73 mg/mL (200.12 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 36 mg/mL

Water : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse Konzentration Volumen Molekulargewicht
Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo
Charge:

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

mg/kg g μL

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH2O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus

Targets/IC50/Ki
Akt
In vitro

SC79 unterdrückt die PHAKTM-GFP-Plasmamembran-Translokation und verstärkt die Phosphorylierung aller drei Akt-Isoformen in HEK293-, HeLa-, HL60-, NB4- und HsSulton-Zellen (B-Zellen). Diese Verbindung reduziert die neuronale Exzitotoxizität und verhindert Schlaganfall-induzierten neuronalen Zelltod. Sie stellt die Proliferation von BRAT1-Knockdown-Zellen wieder her und reduziert die Produktion von Superoxid in Mitochondrien von MitoSox-positiven Zellen.

Kinase-Assay
Zytosolische Phosphorylierung von Akt
Hela-Zellen werden 1 Stunde lang serumgehungert und 30 Minuten lang mit IGF (100 ng/ml) oder SC79 (4 μg/ml) behandelt. Die Zellen werden in Lysepuffer, der 250 mM Saccharose, 20 mM HEPES, 10 mM KCl, 1,5 mM MgCl2, 1 mM EDTA, 1 mM EGTA, ergänzt mit Proteaseinhibitoren, enthält, lysiert. Die Zellen werden mehrmals durch eine 25G-Nadel geleitet und 20 Minuten lang auf Eis gelagert. Zu diesem Zeitpunkt wird das gesamte Zelllysat entnommen. Zelllysate werden 30 Minuten lang bei 100.000 g zentrifugiert. Der Überstand wird als zytosolische Fraktion gesammelt. Das Pellet wird mit Lysepuffer gewaschen und stellt die Membranfraktion dar. Das gesamte Zelllysat, zytosolische und Membranfraktionen werden mittels SDS-PAGE aufgetrennt und mittels Western Blotting auf Phospho-Akt (S473), Gesamt-Akt, Tubulin (zytosolischer Marker) und Orai1 (Membranmarker) analysiert.
In vivo

Im Mausmodell der permanenten fokalen zerebralen Ischämie ermöglicht SC79 (0,04 mg/g, i.p.) die zytosolische Aktivierung von Akt und rekapituliert die primäre zelluläre Funktion der Akt-Signalübertragung, was zu einer erhöhten neuronalen Überlebensrate führt.

Literatur

Anwendungen

Methoden Biomarker Bilder PMID
Western blot p-mTOR / mTOR / pAKT / AKT / P62 / Bcl-2 / Bax / LC3 / Cleaved PARP p-Akt / Akt / p-GSK3β / GSK3β / β-catenin / Cyclin D1 p4EBP1 / 4EBP1 / pS6 / RPS6 / ESRP1 / ESRP2
S7863-WB1
30301881

Technischer Support

Handhabungshinweise

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

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