Name: PF-543 hydrochloride
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7177
Rating: 5 (29 reviews)

Springe zu

Qualitätskontrolle

Charge: Reinheit: 99.52%

99.52

Verwandte Ziele	PD-1/PD-L1 CXCR STING AhR Immunology & Inflammation related CD markers Interleukins Anti-infection Antioxidant COX
Weitere SPHK Inhibitoren	Opaganib (ABC294640) SKI II K6PC-5 Defensamide (MHP) SKI-V SKI-178

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration

Zelllinien	Assay-Typ	Konzentration	Inkubationszeit	Aktivitätsbeschreibung	PMID
human PAMSC cells	Function assay	100 nM	24 h	Decrease of SK1 expression in human PAMSC cells at 100 nM after 24 hrs by Western blot analysis	24396570
Sf9 cells	Function assay			Inhibition of human recombinant SphK1 expressed in Sf9 cells assessed as radiolabeled products using 5 uM sphingosine and 10 uM gamma[32P]ATP by liquid scintillation counting	25643074
Sf21 cells	Function assay		90 mins	Inhibition of His6 tagged human SphK1 expressed in Sf21 cells using FITC-sphingosine as substrate preincubated for 90 mins prior substrate addition by Caliper assay, Ki=4.3 nM	25516793
PC3	Antiproliferative assay		72 hrs	Antiproliferative activity against human PC3 cells after 72 hrs by MTS assay, GI50=19μM.	26780304
HEK293	Function assay	10 uM	16 hrs	Induction of SK1 degradation in HEK293 cells at 10 uM after 16 hrs by western blotting analysis in presence of proteasome inhibitor MG132	26780304
MDA1483	Function assay		30 mins	Inhibition of SPHK1 in human MDA1483 cells using C17-sphingosine as substrate assessed as reduction in C17-S1P formation preincubated for 30 mins with substrate measured after 15 mins by LC-MS analysis, IC50=0.0008μM.	28231433
Sf9	Function assay		15 mins	Inhibition of human C-terminal His6-tagged SPHK1 expressed in fall armyworm sf9 cells assessed as reduction in ADP formation using sphingosine as substrate preincubated for 15 mins followed by substrate addition after 1 hr by transcreener-based fluorescen, IC50=0.002μM.	28231433
Sf9	Function assay		1 hr	Inhibition of human C-terminal His6-tagged SPHK1 expressed in fall armyworm sf9 cells assessed as reduction in S1P formation using sphingosine as substrate after 1 hr by FITC-based caliper assay, IC50=0.0027μM.	28231433
Sf21	Function assay		1 hr	Inhibition of recombinant human C-terminal His-tagged SPHK1 expressed in fall armyworm sf21 cells using sphingosine as substrate after 1 hr by FITC-based caliper assay, Ki=0.0036μM.	28406646
Sf21	Function assay		1 hr	Inhibition of recombinant C-terminal His6-tagged human SphK1 expressed in baculovirus infected sf21 cells using FITC-sphingosine as substrate after 1 hr in presence of ATP by microfluidic capillary electrophoresis mobility shift assay, IC50=0.0027μM.	28408190
Sf21	Function assay		1 hr	Inhibition of human recombinant C-terminal His6 tagged SphK2 expressed in baculovirus infected sf21 cells using FITC-sphingosine as substrate after 1 hr in presence of ATP by microfluidic capillary electrophoresis mobility shift assay, IC50=0.36μM.	28408190
Sf21	Function assay			Inhibition of human C-terminal His6-tagged SphK1 expressed in baculovirus infected Sf21 insect cells, Ki=0.0036μM.	28822281
HEK293	Function assay		30 mins	Inhibition of GFP-tagged SK1 (unknown origin) expressed in HEK293 cells using Sph as substrate measured after 30 mins in presence of [gamma32P]ATP by Cerenkov counting analysis, IC50=0.028μM.	30889352
Klicken Sie hier, um weitere experimentelle Daten zu Zelllinien anzuzeigen

Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Molekulargewicht	502.07	Formel	C₂₇H₃₂ClNO₄S	Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)	3 Jahre-20°CPulver
CAS-Nr.	1706522-79-3	SDF herunterladen		Lagerung von Stammlösungen	1 Jahr-80°Cin Lösungsmittel 1 Monat-20°Cin Lösungsmittel
Synonyme	N/A			Smiles	CC1=CC(=CC(=C1)OCC2=CC=C(C=C2)CN3CCCC3CO)CS(=O)(=O)C4=CC=CC=C4.Cl

Löslichkeit

In vitro
Charge:

DMSO : 100 mg/mL (199.17 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 100 mg/mL

Water : Insoluble

DMSO : 100 mg/mL (199.17 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 100 mg/mL

Water : Insoluble

DMSO : 93 mg/mL (185.23 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 93 mg/mL

Water : Insoluble

DMSO : 100 mg/mL (199.17 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 100 mg/mL

Water : 12 mg/mL

Molaritätsrechner

Masse	Konzentration	Volumen	Molekulargewicht
=	×	×

Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo Charge:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	5.000mg/ml (9.96mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	0.800mg/ml (1.59mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 16 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

Dosierung: mg/kg Durchschnittsgewicht der Tiere: g Dosiervolumen pro Tier:μL Anzahl der Tiere:

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH₂O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus

Merkmale	The most potent inhibitor of SphK1 described to date.
Targets/IC₅₀/Ki	SphK1 (Cell-free assay) 2.0 nM SphK1 (Cell-free assay) 3.6 nM(Ki)
In vitro	PF543 ist eine zellgängige Hydroxyl-Methylpyrrolidin-Verbindung, die die SphK-1/SphK1-katalysierte Sphingosinphosphorylierung reversibel und Sphingosin-kompetitiv hemmt, keine Affinität zu S1P-Rezeptoren aufweist und eine stark reduzierte Hemmaktivität gegenüber Sphk2 (6,8 % Hemmung bei 10 μM) oder 46 anderen Lipid- und Proteinkinasen (IC50 >10 μM) zeigt. In den SphK1-überexprimierenden 1483 Kopf- und Halskarzinomzellen verringert diese Verbindung den Spiegel des endogenen S1P um das 10-fache mit einem proportionalen Anstieg des Sphingosinspiegels. Es bindet SphK1 reversibel (k _off t1/2=8,5 min) und mit hoher Affinität, wobei die Bindungskonstante (K_d) 5 nM beträgt. Diese Chemikalie hatte trotz einer dramatischen Veränderung des zellulären S1P/Sphingosin-Verhältnisses keine Auswirkung auf die Proliferation und das Überleben von 1483-, A549-, LN229-, Jurkat-, U937- und MCF-7-Zellen. Es ist als potenter Inhibitor der S1P-Bildung in Vollblut wirksam, was darauf hindeutet, dass die SphK1-Isoform der Sphingosinkinase die Hauptquelle von S1P im menschlichen Blut ist.
Kinase-Assay	FITC-S1P-Quantifizierung/Caliper-Assay
Kinase-Assay	Es wird ein 384-Well-Format des SphK-Enzymassays entwickelt, das auf der Trennung von FITC-S1P von unreagiertem FITC-Sphingosin-Substrat unter Verwendung eines mikrofluidischen Kapillarelektrophorese-Mobilitätsshift-Systems basiert. Kurz gesagt, 3 nM SphK1–His6 werden mit 1 μM FITC-Sphingosin, 20 μM ATP und 10 μM dieser Verbindung (eine Endkonzentration von DMSO von 2 %) in einem Puffer inkubiert, der 100 mM Hepes (pH 7,4), 1 mM MgCl₂, 0,01 % Triton X-100, 10 % Glycerin, 100 μM Natriumorthovanadat und 1 mM DTT enthält, und zwar für 1 Stunde in einer 384-Well-Matrical MP-101-1-PP-Platte. Reaktionsgemische (10 μL) werden durch Zugabe von 20 μL 30 mM EDTA und 0,15 % Beschichtungsreagens-3 in 100 mM Hepes gelöscht, und ein kleines Aliquot jeder Reaktion (einige Nanoliter) wird im Caliper LabChip 3000-Instrument unter -1,5 psi (psi = 6,9 kPa) Druck, einer nachgeschalteten Spannung von -1900 V und einer Ansaugzeit von 0,2 s analysiert. Phosphoryliertes Fluoreszenzprodukt und unphosphoryliertes Fluoreszenzsubstrat erschienen als charakteristische Peaks und werden mit den Caliper-Daten quantifiziert.
In vivo	PF-543 hydrochloride, ein potenter Sphingosinkinase-1-Inhibitor, reduzierte die dysfunktionale Hypertrophie, verbunden mit Schutz vor Kardiomyozyten-Apoptose.
Literatur	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22397330/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27063355/

Technischer Support

Handhabungshinweise

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Wenn Sie weitere Fragen haben, hinterlassen Sie bitte eine Nachricht.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

PF-543 hydrochloride SPHK Inhibitor

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 502.07

Qualitätskontrolle

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration

Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Löslichkeit

Molaritätsrechner

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Wirkmechanismus

Technischer Support