nur für Forschungszwecke
Kat.-Nr.S7811
| Verwandte Ziele | PI3K Akt GSK-3 ATM/ATR DNA-PK AMPK PDPK1 PTEN PP2A PDK |
|---|---|
| Weitere mTOR Inhibitoren | Torin 1 Torin 2 AZD8055 Ridaforolimus (Deforolimus, MK-8669) Sapanisertib (MLN0128, INK-128) Torkinib (PP242) Vistusertib (AZD2014) KU-0063794 OSI-027 WYE-354 |
| Zelllinien | Assay-Typ | Konzentration | Inkubationszeit | Formulierung | Aktivitätsbeschreibung | PMID |
|---|---|---|---|---|---|---|
| HT-29 | Function assay | 10 nM, 100 nM, 1 μM, 10 μM | 48 h | significantly increased the expression of miR-212 in a dose-dependent manner | 30021100 | |
| RSC96 | Function assay | 10 μM | 1 day or 2 days | MHY1485 increased phospho-mTOR (Ser 2448), phosphoS6K1 (Thr 389) and NGF expression in RSC96 cells. | 30229399 | |
| H9C2 | Function assay | 5 μM | MHY1485 abrogated the effects of Tanshinone IIA on LC3 | 30798134 | ||
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| Molekulargewicht | 387.39 | Formel | C17H21N7O4 |
Lagerung (Ab dem Eingangsdatum) | |
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| CAS-Nr. | 326914-06-1 | SDF herunterladen | Lagerung von Stammlösungen |
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| Synonyme | N/A | Smiles | C1COCCN1C2=NC(=NC(=N2)NC3=CC=C(C=C3)[N+](=O)[O-])N4CCOCC4 | ||
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In vitro |
DMSO
: 10 mg/mL
(25.81 mM)
Mit 50°C Wasserbad erwärmt;
Ultraschallbehandelt;
Water : Insoluble Ethanol : Insoluble |
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In vivo |
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Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)
Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)
Berechnungsergebnisse:
Arbeitskonzentration: mg/ml;
Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )
Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH2O, mischen und klären.
Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.
Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.
| Targets/IC50/Ki |
mTOR
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| In vitro |
MHY1485 unterdrückt den basalen autophagischen Fluss. Diese Verbindung führt zu einer Akkumulation von LC3II und einer Vergrößerung der Autophagosomen in dosis- und zeitabhängiger Weise. Es erhöht die Phospho-mTOR-Spiegel und die Phosphorylierung der nachgeschalteten S6K1- und rpS6-Proteine, ohne den gesamten mTOR-Gehalt, die gesamten S6K1- und rpS6-Spiegel zu beeinflussen. Eine kurzfristige Behandlung von Ovarien mit dieser Chemikalie, gefolgt von einer Allotransplantation, förderte das Wachstum sekundärer Follikel. Die Behandlung damit und die anschließende Transplantation ermöglichten die Gewinnung reifer Eizellen und gesunder Nachkommen. |
| Kinase-Assay |
Aktivierung von mTOR
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Die Western-Blot-Analyse wird durchgeführt, um die Veränderung des gesamten Proteingehalts und der Spiegel der phosphorylierten Formen von mTOR und 4E-BP1, die die Aktivität von mTOR widerspiegeln, zu erfassen. Ac2F-Zellen werden 1 Stunde lang mit MHY1485 in verschiedenen Konzentrationen und Rapamycin 5 mM als Positivkontrolle behandelt. Die Zellen werden mit kaltem PBS gewaschen und geerntet. Zelllysate werden unter Verwendung von RIPA-Puffer hergestellt. Die Proteinkonzentration wird mittels der Bicinchoninsäure-Methode (BCA) bestimmt. Gleiche Proteinmengen werden auf 10-12%igen Natriumdodecylsulfat-Polyacrylamidgel-Elektrophorese (SDS-PAGE)-Gelen getrennt. Die Gele werden anschließend durch Elektroblotting für 2 Stunden bei 60-75 V auf eine Polyvinylidendifluoridmembran übertragen. Die Membranen werden in einer 5%igen Magermilchlösung in Tris-gepufferter Salzlösung (TBS) mit 0,5% Tween-20 blockiert und mit primären Antikörpern inkubiert. Vorgefärbte Proteinmarker werden zur Bestimmung des Molekulargewichts verwendet.
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| In vivo |
MHY1485 ist ein potenter und zellgängiger mTORC1-Agonist. |
Literatur |
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| Methoden | Biomarker | Bilder | PMID |
|---|---|---|---|
| Western blot | p-mTOR / mTOR / p-AKT / AKT / p-S6K1 / S6K1 p-Nrf2 / Nrf2 |
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28061443 |
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