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MHY1485 mTOR Aktivator

Kat.-Nr.S7811

MHY1485 ist ein potenter und zellgängiger mTOR-Aktivator, und diese Verbindung hemmt auch potent die Autophagy.
MHY1485 mTOR Aktivator Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 387.39

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Qualitätskontrolle

Charge: Reinheit: 99.97%
99.97

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration

Zelllinien Assay-Typ Konzentration Inkubationszeit Formulierung Aktivitätsbeschreibung PMID
HT-29  Function assay 10 nM, 100 nM, 1 μM, 10 μM 48 h significantly increased the expression of miR-212 in a dose-dependent manner 30021100
RSC96 Function assay 10 μM 1 day or 2 days MHY1485 increased phospho-mTOR (Ser 2448), phosphoS6K1 (Thr 389) and NGF expression in RSC96 cells. 30229399
H9C2 Function assay 5 μM MHY1485 abrogated the effects of Tanshinone IIA on LC3 30798134
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Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Molekulargewicht 387.39 Formel

C17H21N7O4

Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)
CAS-Nr. 326914-06-1 SDF herunterladen Lagerung von Stammlösungen

Synonyme N/A Smiles C1COCCN1C2=NC(=NC(=N2)NC3=CC=C(C=C3)[N+](=O)[O-])N4CCOCC4

Löslichkeit

In vitro
Charge:

DMSO : 10 mg/mL (25.81 mM) Mit 50°C Wasserbad erwärmt; Ultraschallbehandelt;
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse Konzentration Volumen Molekulargewicht
Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo
Charge:

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

mg/kg g μL

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH2O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus

Targets/IC50/Ki
mTOR
In vitro

MHY1485 unterdrückt den basalen autophagischen Fluss. Diese Verbindung führt zu einer Akkumulation von LC3II und einer Vergrößerung der Autophagosomen in dosis- und zeitabhängiger Weise.

Es erhöht die Phospho-mTOR-Spiegel und die Phosphorylierung der nachgeschalteten S6K1- und rpS6-Proteine, ohne den gesamten mTOR-Gehalt, die gesamten S6K1- und rpS6-Spiegel zu beeinflussen. Eine kurzfristige Behandlung von Ovarien mit dieser Chemikalie, gefolgt von einer Allotransplantation, förderte das Wachstum sekundärer Follikel. Die Behandlung damit und die anschließende Transplantation ermöglichten die Gewinnung reifer Eizellen und gesunder Nachkommen.

Kinase-Assay
Aktivierung von mTOR
Die Western-Blot-Analyse wird durchgeführt, um die Veränderung des gesamten Proteingehalts und der Spiegel der phosphorylierten Formen von mTOR und 4E-BP1, die die Aktivität von mTOR widerspiegeln, zu erfassen. Ac2F-Zellen werden 1 Stunde lang mit MHY1485 in verschiedenen Konzentrationen und Rapamycin 5 mM als Positivkontrolle behandelt. Die Zellen werden mit kaltem PBS gewaschen und geerntet. Zelllysate werden unter Verwendung von RIPA-Puffer hergestellt. Die Proteinkonzentration wird mittels der Bicinchoninsäure-Methode (BCA) bestimmt. Gleiche Proteinmengen werden auf 10-12%igen Natriumdodecylsulfat-Polyacrylamidgel-Elektrophorese (SDS-PAGE)-Gelen getrennt. Die Gele werden anschließend durch Elektroblotting für 2 Stunden bei 60-75 V auf eine Polyvinylidendifluoridmembran übertragen. Die Membranen werden in einer 5%igen Magermilchlösung in Tris-gepufferter Salzlösung (TBS) mit 0,5% Tween-20 blockiert und mit primären Antikörpern inkubiert. Vorgefärbte Proteinmarker werden zur Bestimmung des Molekulargewichts verwendet.
In vivo

MHY1485 ist ein potenter und zellgängiger mTORC1-Agonist.

Literatur
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34580888/

Anwendungen

Methoden Biomarker Bilder PMID
Western blot p-mTOR / mTOR / p-AKT / AKT / p-S6K1 / S6K1 p-Nrf2 / Nrf2
S7811-WB1
28061443

Technischer Support

Handhabungshinweise

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

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