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Rhodamine 123 ATPase Inhibitor

Kat.-Nr.S3577

Rhodamine 123 (RH-123, R-22420) ist ein fluoreszierender kationischer dye, der zur Markierung von mitochondria in lebenden Zellen verwendet wird. Diese Verbindung hemmt die ADP-stimulierte Atmung von Mitochondrien mit einem Ki = 12 μM und die ATPase-Aktivität von invertierten inneren Membranvesikeln mit einem Ki von 126 μM und teilweise gereinigter F1-ATPase mit einem Ki von 177 μM.
Rhodamine 123 ATPase Inhibitor Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 380.82

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Qualitätskontrolle

Charge: S357701 DMSO]76 mg/mL]false]Ethanol]15 mg/mL]false]Water]Insoluble]false Reinheit: 99.79%
  • In Nature Medicine für seine erstklassige Qualität zitiert
  • COA
  • SDS
  • Datenblatt
99.79

Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Molekulargewicht 380.82 Formel
C21H17ClN2O3
Lagerung (Ab dem Eingangsdatum) 3 years -20°C powder
CAS-Nr. 62669-70-9 -- Lagerung von Stammlösungen

Synonyme RH-123, R-22420 Smiles Cl.COC(=O)C1=CC=CC=C1C2=C3C=CC(=N)C=C3OC4=C2C=CC(=C4)N

Löslichkeit

In vitro
Charge:

DMSO : 76 mg/mL (199.56 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 15 mg/mL

Water : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse Konzentration Volumen Molekulargewicht
Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo
Charge:

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

mg/kg g μL

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH2O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus

Targets/IC50/Ki
ATPase
(inverted inner membrane vesicles)
126 μM(Ki)
F1-ATPase
(Cell-free assay)
177 μM(Ki)
In vitro

1. Herstellung der Rhodamine 123 Arbeitslösung
1.1 Herstellung der Stammlösung
Lösen Sie 1 mg dieser Verbindung in 525 μL DMSO auf, um 5 mM Stammlösung zu erhalten.
1.2 Herstellung der Arbeitslösung dieser Chemikalie
Verdünnen Sie die Stammlösung in serumfreiem Zellkulturmedium oder PBS, um 1-20 μM Arbeitslösung zu erhalten.
Hinweis: Bitte passen Sie die Konzentration der Arbeitslösung dieser Verbindung an die tatsächliche Situation an.
2. Zellfärbung
2.1 Suspensionszellen (6-Well-Platte)
a. Zentrifugieren Sie bei 1000 g bei 4℃ für 3-5 Minuten und verwerfen Sie dann den Überstand. Waschen Sie zweimal mit PBS, jedes Mal 5 Minuten lang. Die Zelldichte beträgt 1×106/mL.
b. Geben Sie 1 mL Arbeitslösung hinzu und inkubieren Sie dann bei Raumtemperatur für 5-30 Minuten.
c. Zentrifugieren Sie bei 400 g bei 4℃ für 3-4 Minuten und verwerfen Sie dann den Überstand.
d. Waschen Sie zweimal mit PBS, jedes Mal 5 Minuten lang.
e. Resuspendieren Sie die Zellen mit serumfreiem Zellkulturmedium oder PBS. Beobachtung mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie.
2.2 Adhärente Zellen
a. Kultivieren Sie adhärente Zellen auf sterilen Deckgläsern.
b. Entfernen Sie das Deckglas aus dem Medium und saugen Sie überschüssiges Medium ab.
c. Geben Sie 100 μL Arbeitslösung hinzu, schütteln Sie es vorsichtig, um die Zellen vollständig zu bedecken, und inkubieren Sie dann bei Raumtemperatur für 30-60 Minuten.
d. Waschen Sie zweimal mit Medium, jedes Mal 5 Minuten lang. Beobachtung mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie.
Hinweis: Bei der Detektion mittels Durchflusszytometrie müssen die Zellen vor dem Färben resuspendiert werden.

Literatur

Technischer Support

Handhabungshinweise

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

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