Home PI3K/Akt/mTOR mTOR Inhibitor WYE-125132 (WYE-132)

nur für Forschungszwecke

WYE-125132 (WYE-132) mTOR Inhibitor

Kat.-Nr.: S2661

WYE-125132 (WYE-132) ist ein hochwirksamer, ATP-kompetitiver mTOR-Inhibitor mit einer IC50 von 0,19 nM; er ist hochselektiv für mTOR gegenüber PI3Ks oder PI3K-verwandten Kinasen hSMG1 und ATR.
WYE-125132 (WYE-132) mTOR Inhibitor Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 519.6

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Qualitätskontrolle (Quality Control)

Charge: S266101 DMSO]104 mg/mL]false]Water]Insoluble]false]Ethanol]Insoluble]false Reinheit: 100.00%
  • In Nature Medicine für seine erstklassige Qualität zitiert
  • COA
  • NMR
  • HPLC
  • SDS
  • Datenblatt
100.00

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Zelllinien Assay-Typ Konzentration Inkubationszeit Formulierung Aktivitätsbeschreibung PMID
LNCAP cells Cytotoxicity assay Cytotoxicity against human LNCAP cells, IC50=0.002 μM
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Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität (Chemical Information, Storage & Stability)

Molekulargewicht 519.6 Formel

C27H33N7O4

 Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)
CAS-Nr. 1144068-46-1 SDF herunterladen Lagerung von Stammlösungen

Synonyme N/A Smiles CNC(=O)NC1=CC=C(C=C1)C2=NC3=C(C=NN3C4CCC5(CC4)OCCO5)C(=N2)N6CC7CCC(C6)O7

Löslichkeit (Solubility)

In vitro
Charge:

DMSO : 104 mg/mL (200.15 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse Konzentration Volumen Molekulargewicht
Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo
Charge:

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

mg/kg g μL

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH2O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus (Mechanism of Action)

Merkmale
A highly potent, ATP-competitive, and specific mTOR kinase inhibitor.
Targets/IC50/Ki
mTOR
(Cell-free assay)
0.19 nM
In vitro
WYE-125132 (WYE-132) potently and ATP-competitively inhibits recombinant mTOR kinase with IC50 of 0.19 nM and also shows high selectivity over various PI3Ks and a panel of 230 protein kinases. In vitro, it exhibits significant anti-proliferative activity against a panel of tumor cell lines with IC50 ranging from 2 nM (LNCap) to 380 nM (HTC116). Besides, this compound also causes cell cycle progression, induction of apoptosis, and inhibition of protein synthesis and cell size. It results in a significant reduction in the synthesis of pre-tRNALeu by 72%, 80%, and 53% in actively proliferating cells of MG63, MDA361, and HEK293, respectively by inhibiting mTORC1. Moreover, WYE-125132 is also found to induce the dephosphorylation of Maf1 (negative regulator of Pol III transcription) and its accumulation in the nucleus.
Kinase-Assay
Kinase-Assays
mTOR-Enzymassays mittels Dissociations-Enhanced Lanthanide Fluorescent Immunoassay (DELFIA), ATP-Matrix-Assays und mTOR-Immunkomplex-Kinase-Assays werden wie folgt für WYE-125132 (WYE-132) durchgeführt. Das endogene TOR aus LNCap-Zelllysat wird durch Anti-FRAP/TOR (N-19) immunpräzipitiert. Zelllysat (1,0 mg) wird mit 4 μg Antikörper, gekoppelt an Protein-G/A-Agarose, in 1 ml Lysebuffer gemischt. Die Immunkomplexe werden nacheinander mit Lysebuffer, Lysebuffer plus 500 mM KCl und Kinasebuffer-Waschlösung gewaschen. Die Immunkomplexe werden 30 Minuten lang bei 30 °C in einem Endvolumen von 50 μl, das 10 mM Hepes (pH 7,4), 50 mM NaCl, 50 mM β-Glycerophosphat und 0,5 μM Microcystin LR, 1 mM DTT, 10 mM MnCl2, 100 μM ATP, 1 μg His6-S6K oder 1 μg His6-4EBP1 enthält, einer Kinase-Reaktion unterzogen. Kinase-Reaktionen (Immunkomplex und gereinigte Enzyme) werden durch NuPAGE LDS-Probenpuffer beendet und in einem 4-12% NuPAGE Bis-Tris-Gel für Western Blotting mit Anti-P(T389)-p70S6K und Anti-P(T46)-4EBP1, Anti-FRAP/TOR (N-19), Anti-FLAG M2 und Anti-His6 (Klon His-1) aufgetrennt. Im radioaktiven Assay werden 10 μCi [γ-32P]ATP (3000 Ci/mmol) und 100 μM kaltes ATP verwendet. 32P-markierte Produkte werden durch SDS-PAGE aufgetrennt und einem Autoradiogramm auf Kodak-Röntgenfilmen unterzogen.
In vivo
WYE-125132 (WYE-132) (5 mg/kg p.o.) produces significant antitumor activity and causes dose-dependent tumor growth delay in the PI3K/mTOR- and HER2-hyperactive MDA361 tumor model. In addition, it also shows potent antitumor efficacy in the PTEN-null glioma U87MG, non-small cell lung cancer H1975 and A549 models.
Literatur

Häufig gestellte Fragen (Frequently Asked Questions)

Frage 1:
Whether the vehicle “30% PEG400+0.5% Tween80+5% Propylene glycol” you recommended for it is a clear solution or not? What’s the suggested formula for i.p. injection?

Antwort:
The formula on our website “30% PEG400+0.5% Tween80+5% Propylene glycol” is not a clear solution and can be used for p.o. administration. For i.p. solution, there are two methods to prepare it: 1）2% DMSO+30% PEG 300+ddH2O, 2.5mg/ml, stable for 1h at RT; 2）2% DMSO+30% PEG 300+ 2% Tween80 +ddH2O, 2.5mg/ml, stable for 2h at RT.