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Anisomycin (Flagecidin) Protein-Synthese-Inhibitor

Kat.-Nr.S7409

Anisomycin (Flagecidin, Wuningmeisu C) ist ein bakterielles Antibiotikum, das aus Streptomyces griseolus isoliert wurde, das die Proteinsynthese hemmt und auch als JNK-Aktivator wirkt. Anisomycin reguliert die Autophagy hoch und erhöht die Apoptosis.

Anisomycin (Flagecidin) JNK Aktivator Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 265.3

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Qualitätskontrolle

Charge: Reinheit: 99.93%

99.93

Verwandte Ziele	ERK p38 MAPK Raf MEK Ras KRas S6 Kinase MAP4K TAK1 Mixed Lineage Kinase
Weitere JNK Inhibitoren	CC-90001 SP600125 JNK-IN-8 JNK Inhibitor IX Tanzisertib Hydrochloride (CC-930) JNK Inhibitor VIII Polyphyllin I DTP3 BI-78D3 Bentamapimod (AS602801)

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration

Zelllinien	Assay-Typ	Konzentration	Inkubationszeit	Formulierung	Aktivitätsbeschreibung	PMID
HEK293	Function assay				Inhibitory concentration required to produce cytotoxicity against HEK293 cells, IC50=0.02μM.	16005213
HeLa	Function assay	10 uM			Inhibition of translation in human HeLa cells at 10 uM by 35S-methionine metabolic labeling study	15165136
HEK293	Function assay	100 uM	15 mins		Increase of JNK phosphorylation in U50488 treated untransfected HEK293 cells at 100 uM after 15 mins	17702750
HEK293	Function assay	50 uM	15 mins		Increase of U50488-induced JNK phosphorylation in untransfected HEK293 cells at 50 uM after 15 mins	17702750
RAW264.7	Function assay	5 uM	30 mins		Activation of p38MAPK in mouse RAW264.7 cells assessed as phosphorylation at Thr180/Tyr182 at 5 uM after 30 mins by Western blotting analysis	23294286
Sf9	Function assay	10 uM	6 to 24 hr		Increase of ATP level in Spodoptera frugiperda (fall armyworm) Sf9 cells at 10 uM after 6 to 24 hr by luminescent cell viability assay	ChEMBL
Sf9	Cytotoxicity assay	10 uM	72 hr		Cytotoxicity against Spodoptera frugiperda (fall armyworm) Sf9 cells at 10 uM after 72 hr by trypan blue dye exclusion test	ChEMBL
VERO-E6	Function assay		48 hrs		Determination of IC50 values for inhibition of SARS-CoV-2 induced cytotoxicity of VERO-E6 cells after 48 hours exposure to 0.01 MOI SARS CoV-2 virus by high content imaging, IC50=0.09μM.	ChEMBL
VERO-E6	Function assay		48 hrs		Toxicity CC50 against VERO-E6 cells determined at 48 hours by high content imaging (same conditions as 2_LEY without exposure to 0.01 MOI SARS CoV-2 virus), CC50=0.1μM.	ChEMBL
Vero E6	Function assay				CC50 determination at MOI 0.004 using CellTiter- Glo (CTG) assay, performed 3 days post-infection in Vero E6 cells, CC50<0.39μM.	ChEMBL
Vero E6	Function assay				CC50 determination at MOI 0.01 using CellTiter- Glo (CTG) assay, performed 3 days post-infection in Vero E6 cells, CC50<0.39μM.	ChEMBL
Klicken Sie hier, um weitere experimentelle Daten zu Zelllinien anzuzeigen

Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Molekulargewicht	265.3	Formel	C₁₄H₁₉NO₄	Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)	3 Jahre-20°CPulver
CAS-Nr.	22862-76-6	SDF herunterladen		Lagerung von Stammlösungen	1 Jahr-80°Cin Lösungsmittel 1 Monat-20°Cin Lösungsmittel

Löslichkeit

In vitro
Charge:

DMSO : 53 mg/mL (199.77 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 16 mg/mL

Water : Insoluble

DMSO : 53 mg/mL (199.77 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 53 mg/mL

Water : 2 mg/mL

DMSO : 53 mg/mL (199.77 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 42 mg/mL

Water : Insoluble

DMSO : 53 mg/mL (199.77 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 53 mg/mL

Water : Insoluble

DMSO : 53 mg/mL (199.77 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 17 mg/mL

Water : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse	Konzentration	Volumen	Molekulargewicht
=	×	×

Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo Charge:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	2.650mg/ml (9.99mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 53 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	0.850mg/ml (3.20mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 17 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

Dosierung: mg/kg Durchschnittsgewicht der Tiere: g Dosiervolumen pro Tier:μL Anzahl der Tiere:

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH₂O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus

Targets/IC₅₀/Ki	JNK
In vitro	Anisomycin (3 μM) verringert die Proteinsynthese in MDA16- und MDA-MB-468-Zellen und reduziert die Koloniebildung durch MDA-MB-468-Zellen. Diese Verbindung führt zu einer Zunahme der Anzahl apoptotischer Zellen in MDA-MB-468-Kulturen, jedoch nicht in MDA16-Kulturen. Es aktiviert die JNK-Phosphorylierung in MDA-MB-468-Zellen. In U251- und U87-Zellen hemmt diese Chemikalie (0,01-8 μM) das Zellwachstum in zeit- und konzentrationsabhängiger Weise mit den IC50-Werten (48 h) von 0,233 bzw. 0,192 μmol/L. Es (4 μM) verursacht 21,5 % und 25,3 % Apoptose in U251- bzw. U87-Zellen und aktiviert p38 MAPK und JNK, während ERK1/2 inaktiviert wird. Diese Verbindung (4 μM) reduziert den PP2A/C-Untereinheitspiegel in zeitabhängiger Weise in U251- und U87-Zellen. Es hemmt die EAC-Zellproliferation in konzentrationsabhängiger Weise.
Kinase-Assay	JNK-Phosphorylierung
Kinase-Assay	500.000 Zellen/Well werden in 6-Well-Platten ausgesät und über Nacht inkubiert. Die Zellen werden dann 1 h lang mit Testverbindungen oder DMSO als Vehikelkontrolle (Endkonzentration 1 % v/v) inkubiert. Puromycin wird hinzugefügt (Endkonzentration 18 μM) und die Zellen weitere 10 min inkubiert, um neu entstehende Polypeptidketten zu markieren. Die Hintergrundmarkierung wird durch Inkubation von Zellen ohne Puromycin bestimmt. Die Zellen werden dann in HBSS gewaschen, durch Schaben geerntet und zentrifugiert (300 g, 5 min). Die Zellen werden in 0,5 mL 50 mM DTT, das Phosphataseinhibitoren enthält, resuspendiert und 10 min bei 95 °C inkubiert. Die Proben werden dann in flüssigem Stickstoff schockgefroren und bei -20 °C gelagert, bis sie geblottet werden. Proben (20–30 μg Protein/Probe) werden auf eine PVDF-Membran geblottet. Die Membran wird blockiert und über Nacht bei 4 °C mit einem Anti-phospho-Thr183/Tyr185-JNK-Antikörper inkubiert. Sekundärantikörper werden verwendet, um den primären Antikörper zu markieren und mit einem Infrarot-Scanner nachgewiesen. Die Intensität des Fluoreszenzsignals für den Anti-phospho-JNK-Antikörper wird hintergrundkorrigiert und für die Beladung normalisiert.
In vivo	Die peritumorale Verabreichung von Anisomycin (5 mg/kg) unterdrückt das Wachstum des Ehrlich-Ascites-Karzinoms (EAC) signifikant, was zum Überleben von etwa 60 % der Mäuse 90 Tage nach der EAC-Inokulation führt.
Literatur	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9154836/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24333448/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22684030/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23525555/

Anwendungen

Methoden	Biomarker	Bilder	PMID
Western blot	p-Keratin 20 / Keratin 20 / p-Keratin 18 / Keratin 18 / p-Keratin 8 / Keratin 8 / p-MK2 / p-hHSPB1 / hHSPB1 PP2A / PP2C p-ERK / ERK / p-JNK / JNK / p-p38 / ATF3		20724476
Immunofluorescence	p-Keratin 8 / p-Keratin 18 / p-Keratin 20		20724476
Growth inhibition assay	Cell viability		22684030

Technischer Support

Handhabungshinweise

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Wenn Sie weitere Fragen haben, hinterlassen Sie bitte eine Nachricht.

product.CellLines}	product.AssayType}	product.Concentration}	product.IncubationTime}	product.Formulation}	product.ActivityDescription}	PMID

Verdünnungsrechner

Berechnen Sie die erforderliche Verdünnung zur Herstellung einer Stammlösung. Der Selleck-Verdünnungsrechner basiert auf der folgenden Gleichung:

Konzentration _(Start) x Volumen _(Start) = Konzentration _(Ende) x Volumen _(Ende)

Diese Gleichung wird üblicherweise abgekürzt als: C1V1 = C2V2 ( Eingabe Ausgabe )

*Verwenden Sie bei der Herstellung von Stammlösungen immer das chargenspezifische Molekulargewicht des Produkts, das auf dem Etikett des Vials und im MSDS / COA (online verfügbar) angegeben ist.

Die Gleichung des Seriellen Verdünnungsrechners

Serielle Verdünnungen

Konzentration (Start):

Verdünnungsfaktoren:

Berechnetes Ergebnis

C1=C0/X	C1:		LOG(C1):
C2=C1/X	C2:		LOG(C2):
C3=C2/X	C3:		LOG(C3):
C4=C3/X	C4:		LOG(C4):
C5=C4/X	C5:		LOG(C5):
C6=C5/X	C6:		LOG(C6):
C7=C6/X	C7:		LOG(C7):
C8=C7/X	C8:		LOG(C8):