Name: GSK-J4 Hydrochloride
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7070
Rating: 5 (64 reviews)

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Qualitätskontrolle

Charge: Reinheit: 99.48%

99.48

Verwandte Ziele	HDAC JAK BET Histone Methyltransferase PKC PARP HIF PRMT EZH2 AMPK
Weitere Histone Demethylase Inhibitoren	SP2509 GSK-LSD1 2HCl Ladademstat (ORY-1001) Dihydrochloride JIB-04 CPI-455 HCl OG-L002 IOX1 GSK J1 ML324 CPI-455

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration

Zelllinien	Assay-Typ	Konzentration	Inkubationszeit	Formulierung	Aktivitätsbeschreibung	PMID
CUTLL1	Growth inhibitory assay	2 μM		DMSO	affects cell growth	25132549
CUTLL1	Apoptosis assay	2 μM		DMSO	induces apoptosis	25132549
CUTLL1	Function assay	2 μM		DMSO	induces cell cycle arrest	25132549
CUTLL1	Kinase assay	6 μM		DMSO	leads to increased H3K27me3	25132549
SF7761	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K27 methylation	25401693
SF8628	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K28 methylation	25401693
H3.3	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K29 methylation	25401693
SF9012	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K30 methylation	25401693
SF9402	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K31 methylation	25401693
SF9427	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K32 methylation	25401693
human astrocytes	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K33 methylation	25401693
SF7761	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K27M glioma cell growth	25401693
SF8628	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K28M glioma cell growth	25401693
H3.3	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K29M glioma cell growth	25401693
SF9012	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K30M glioma cell growth	25401693
SF9402	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K31M glioma cell growth	25401693
SF9427	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K32M glioma cell growth	25401693
human astrocytes	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K33M glioma cell growth	25401693
TG neurons	Function assay	50 μM		DMSO	inhibits HSV-1 reactivation from sensory neurons	25552720
Th17	Function assay	80 nM		DMSO	inhibits cell differentiation	25840993
β-cells	Function assay	20 μM		DMSO	blunts IFNγ, Il-1β, and TNFα-induced chemokine gene expression	26505193
β-cells	Function assay	20 μM		DMSO	induces β-cell dysfunction	26505193
ESCs	Function assay	1.8 µM		DMSO	induces DNA damage along with activation of the DNA damage response	26759175
Raw 264.7	Function assay	0.8192 µM		DMSO	inhibits TNF-α production	26776360
MCF7	Function assay	1 to 10 uM	30 hrs		Inhibition of KDM5A in human MCF7 cells assessed as effect on H3K4me3 methylation levels at 1 to 10 uM after 30 hrs by Western blot analysis	30392349
MCF7	Function assay	1 to 10 uM	30 hrs		Inhibition of KDM5A in human MCF7 cells assessed as effect on H3K27me3 methylation levels at 1 to 10 uM after 30 hrs by Western blot analysis	30392349
RAW264.7		0.82 uM	24 hrs		Inhibition of LPS-induced TNFalpha production in mouse RAW264.7 cells 0.82 uM after 24 hrs by ELISA	26776360
RAW264.7			24 hrs		Inhibition of LPS-induced TNFalpha production in mouse RAW264.7 cells after 24 hrs by ELISA	26776360
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Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Molekulargewicht	453.96	Formel	C₂₄H₂₇N₅O₂.HCl	Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)	3 Jahre-20°CPulver
CAS-Nr.	1797983-09-5	SDF herunterladen		Lagerung von Stammlösungen	1 Jahr-80°Cin Lösungsmittel 1 Monat-20°Cin Lösungsmittel

Löslichkeit

In vitro
Charge:

DMSO : 91 mg/mL (200.45 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 91 mg/mL

Water : 10 mg/mL

DMSO : 90 mg/mL (198.25 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 90 mg/mL

Water : 10 mg/mL

DMSO : 90 mg/mL (198.25 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 90 mg/mL

Water : 10 mg/mL

DMSO : 90 mg/mL (198.25 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 90 mg/mL

Water : 9.4 mg/mL

DMSO : 91 mg/mL (200.45 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 91 mg/mL

Water : 9.4 mg/mL

Molaritätsrechner

Masse	Konzentration	Volumen	Molekulargewicht
=	×	×

Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo Charge:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	5.000mg/ml (11.01mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 20%PEG300 2 5%Tween80 3 70%ddH2O Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	1.000mg/ml (2.20mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL 20 mg/ml clarified DMSO stock solution to 200 μL PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL Tween80 to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 700 μL ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

Dosierung: mg/kg Durchschnittsgewicht der Tiere: g Dosiervolumen pro Tier:μL Anzahl der Tiere:

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH₂O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus

Targets/IC₅₀/Ki	JMJD3 (Cell-free assay) 60 nM
In vitro	GSK J4 HCl ist ein Ethylester-Derivat des JMJD3-selektiven Histon-Demethylase-Inhibitors GSK-J1 mit einem IC50-Wert von mehr als 50 μM in vitro. Diese Verbindung wird verwendet, um die Folgen der Demethylierung von H3K27me3 zu untersuchen. In menschlichen primären Makrophagen hemmt diese Chemikalie die Lipopolysaccharid-induzierte Produktion von Zytokinen, einschließlich des proinflammatorischen Tumornekrosefaktors (TNF). Darüber hinaus verhindert es den Lipopolysaccharid-induzierten Verlust von H3K27me3, der mit den TNF-Transkriptionsstartstellen assoziiert ist, und blockiert die Rekrutierung der RNA-Polymerase II.
Kinase-Assay	Histon-Demethylase AlphaScreen
Kinase-Assay	Die Hemmung von Histon-Demethylasen wird mithilfe des Histon-Demethylase-AlphaScreen-Assays (Amplified Luminescence Proximity Homogenous Assay) beurteilt. Dieser Assay verwendet ein biotinyliertes Peptidsubstrat und basiert auf dem Nachweis des Produktmethylierungszeichens mithilfe eines spezifischen Antikörpers, der an Protein-A-Akzeptor-Beads gekoppelt ist, und einer Streptavidin-Donor-Bead zum Einfangen des Peptids. Kurz gesagt, rekombinante Demethylase-Enzyme werden in Gegenwart von Fe2+ in Form von Eisenammoniumsulfat (FAS), α-Ketoglutarat (KG) und biotinyliertem Peptidsubstrat inkubiert. L-Ascorbinsäure wird hinzugefügt, um ein reduzierendes Milieu zu schaffen und die Oxidation von Fe2+ zu verhindern. Nach der Inkubation mit Peptidsubstrat wird das Vorhandensein des Produkts mithilfe der AlphaScreen-Technologie nachgewiesen. Die Demethylase-AlphaScreen-Assays werden im 384-Well-Plattenformat unter Verwendung von weißen Proxiplatten durchgeführt. Alle Schritte werden in Assay-Puffer (50 mM HEPES pH 7,5, 0,1 % (w/v) BSA und 0,01 % (v/v) Tween-20) durchgeführt. FAS wird jeden Tag frisch in 20 mM HCl auf eine Konzentration von 400 mM gelöst und in entionisiertem Wasser auf 1,0 mM verdünnt. Alle anderen Komponenten werden jeden Tag frisch in entionisiertem Wasser gelöst. Für IC50-Bestimmungen werden 5 μL Assay-Puffer, der Demethylase-Enzym enthält, in die Vertiefungen einer 384-Well-Proxiplatte überführt. Titrationen dieser Verbindung (0,1 μL) werden in jede Vertiefung überführt und die Enzyme 15 Minuten lang mit dieser Chemikalie vorinkubiert (die endgültige DMSO-Konzentration beträgt 1 %). Die Enzymreaktion wird durch Zugabe von 5 μL eines Substratmischung, bestehend aus α-KG, FAS, L-Ascorbinsäure und biotinyliertem Peptidsubstrat, initiiert und die Reaktion für die angegebene Zeit bei Raumtemperatur inkubiert. Die Enzymreaktion wird nach der angegebenen Zeit durch Zugabe von 5 μL EDTA (7,5 mM Endkonzentration im Assay-Puffer) gestoppt. Streptavidin-Donor-Beads (0,08 mg/ml) und Protein-A-konjugierte Akzeptor-Beads (0,08 mg/ml) werden 1 Stunde lang mit einem Antikörper gegen die Produktmethylierungsmarkierung vorinkubiert und das Vorhandensein von Biotin-H3-Produkt wird durch Zugabe von 5 μL der vorinkubierten AlphaScreen-Beads nachgewiesen (Endkonzentrationen von 0,02 mg/ml bezogen auf Akzeptor- und Donor-Beads). Der Nachweis erfolgt 1 Stunde lang bei Raumtemperatur und die Assay-Platten werden in einem BMG Labtech Pherastar FS Plattenlesegerät ausgelesen. Die Daten werden auf die enzymfreie Kontrolle normiert und die IC50 aus der nichtlinearen Regressionskurvenanpassung mit GraphPad Prism 5 bestimmt.
In vivo	GSK-J4 hydrochloride ist ein potenter dualer Inhibitor der H3K27me3/me2-Demethylasen JMJD3/KDM6B und UTX/KDM6A. Es hemmt die LPS-induzierte TNF-α-Produktion in menschlichen primären Makrophagen. Diese Verbindung ist ein zellgängiges Prodrug von GSK-J1.
Literatur	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22842901/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29227285/

Technischer Support

Handhabungshinweise

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

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C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

GSK-J4 Hydrochloride H3K27 Histon-Demethylase-Inhibitor

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 453.96

Qualitätskontrolle

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration

Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Löslichkeit

Molaritätsrechner

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Wirkmechanismus

Technischer Support