Name: Pelitinib (EKB-569)
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S1392
Rating: 5 (11 reviews)

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Qualitätskontrolle

Charge: Reinheit: 99.49%

99.49

Verwandte Ziele	VEGFR PDGFR FGFR c-Met Src MEK CSF-1R FLT3 HER2 c-Kit
Weitere EGFR Inhibitoren	Lazertinib (YH25448) Icotinib Hydrochloride Sunvozertinib AG-490 AG-1478 Canertinib (CI-1033) WZ4002 Rociletinib (CO-1686) Poziotinib (NOV120101, HM781-36B) Genistein

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration

Zelllinien	Assay-Typ	Inkubationszeit	Aktivitätsbeschreibung	PMID
A431	Function assay		Inhibition of EGFR autophosphorylation in human A431 cells, IC50=0.00802μM.	20797871
Sf9	Function assay	10 mins	Inhibition of recombinant human His6-tagged EGFR cytoplasmic domain (645 to 1186 residues) expressed in baculovirus infected Sf9 insect cells assessed as reduction in autophosphorylation preincubated for 10 mins followed by ATP-MgCl2 addition and measured, IC50=0.0385μM.	30600149
A431	Function assay	90 mins	Inhibition of EGFR in human A431 cells assessed as reduction in EGF-stimulated EGFR autophosphorylation preincuabted for 90 mins followed by EGF-stimulation by sandwich-ELISA, IC50=0.039μM.	30973735
DiFi	Function assay	2 hrs	Inhibition autophosphorylation of EGFR in human DiFi cells after 2 hrs by ELISA, IC50=0.07943μM.	17689836
UCH1	Antiproliferative assay	72 hrs	Antiproliferative activity against human UCH1 cells measured after 72 hrs by alamar blue assay, IC50=0.09μM.	30973735
UCH2	Antiproliferative assay	72 hrs	Antiproliferative activity against human UCH2 cells measured after 72 hrs by alamar blue assay, IC50=1.6μM.	30973735
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Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Molekulargewicht	467.92	Formel	C₂₄H₂₃ClFN₅O₂	Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)	3 Jahre-20°CPulver
CAS-Nr.	257933-82-7	SDF herunterladen		Lagerung von Stammlösungen	1 Jahr-80°Cin Lösungsmittel 1 Monat-20°Cin Lösungsmittel
Synonyme	N/A			Smiles	CCOC1=C(C=C2C(=C1)N=CC(=C2NC3=CC(=C(C=C3)F)Cl)C#N)NC(=O)C=CCN(C)C

Löslichkeit

In vitro
Charge:

DMSO : 13 mg/mL (27.78 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

DMSO : 13 mg/mL (27.78 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

DMSO : 13 mg/mL (27.78 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

DMSO : 13 mg/mL (27.78 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse	Konzentration	Volumen	Molekulargewicht
=	×	×

Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo Charge:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	0.650mg/ml (1.39mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 13 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	0.650mg/ml (1.39mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 13 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

Dosierung: mg/kg Durchschnittsgewicht der Tiere: g Dosiervolumen pro Tier:μL Anzahl der Tiere:

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH₂O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus

Merkmale	An improved version of EKI-785.
Targets/IC₅₀/Ki	EGFR 38.5 nM Src 282 nM MEK/ERK 800 nM ErbB2 1.255 μM Raf 3.353 μM
In vitro	Pelitinib (EKB-569) zeigt eine wesentlich höhere Hemmaktivität gegen EGFR im Vergleich zum eng verwandten c-erbB-2 sowie zu anderen Kinasen wie Src, Cdk4, c-Met, Raf und MEK/ERK, mit einer IC50 im Bereich von 282 nM für Src bis >20 μM für Cdk4. Übereinstimmend hemmt diese Verbindung die Autophosphorylierung von EGFR, aber nicht von c-Met in A431-Zellen signifikant. Es hemmt potent die Proliferation von normalen menschlichen Keratinozyten (NHEK) sowie von A431- und MDA-468-Tumorzellen mit einer IC50 von 61 nM, 125 nM bzw. 260 nM, während es wenig Aktivität gegen MCF-7-Zellen mit einer IC50 von 3,6 μM zeigt. Diese Chemikalie hemmt die EGF-induzierte Phosphorylierung von EGFR in A431- und NHEK-Zellen mit einer IC50 von 20-80 nM sowie die Phosphorylierung von STAT3 mit einer IC50 von 30-70 nM. Es hemmt bei 75-500 nM auch spezifisch die Aktivierung von AKT und ERK1/2, ohne den NF-κB-Signalweg zu beeinflussen. In NHEK-Zellen hemmt diese Verbindung auch potent die TGF-α-vermittelte EGFR-Aktivierung mit einer IC50 von 56 nM sowie die Aktivierung von STAT3 und ERK1/2 mit einer IC50 von 60 nM bzw. 62 nM.
Kinase-Assay	Autophosphorylierung von EGFR in Zellen
Kinase-Assay	Für Experimente mit Zellen in Kultur werden A431-Zellen 2,75 Stunden lang mit verschiedenen Konzentrationen von Pelitinib (EKB-569) behandelt, bevor sie 0,25 Stunden lang mit 100 ng/mL EGF koinkubiert werden. Die Zellen werden zweimal mit kalter phosphatgepufferter Salzlösung (PBS) gewaschen, bevor sie in Lysepuffer (10 mM Tris, pH 7,5, 5 mM Ethylendiamintetraessigsäure (EDTA), 150 mM NaCl, 1% Triton X-100, 1% Natriumdesoxycholat, 0,1% SDS, 1 mM PMSF, 10 mg/mL Pepstatin A, 10 mg/mL Leupeptin, 20 KIU/mL Aprotinin, 2 mM Natriumorthovanadat und 100 mM Natriumfluorid) für 20 Minuten auf Eis gegeben werden, vor der Immunpräzipitation und SDS-PAGE-Immunblotting. Für die Immunpräzipitation werden kultivierte Zellen in kalten Lysepuffer gegeben und sofort auf Eis mit einem Polytron mit mehreren Impulsen homogenisiert. Das Homogenat wird zuerst bei 2500 U/min (20 Minuten, 4 °C) und dann erneut bei 14.000 U/min in einer Mikrozentrifuge (10 Minuten, 4 °C) zentrifugiert. Überstände (1000 μg Protein) werden 2 Stunden lang bei 4 °C mit 15 mL polyklonalem EGFR-Antikörper inkubiert. Nach 2 Stunden werden 50 μL Protein G plus/Protein A Agarose-Kügelchen hinzugefügt und unter konstanter Rotation 2 Stunden lang bei 4 °C inkubiert. Nach dem Waschen mit Lysepuffer werden die Kügelchen 2 Minuten lang in Laemmli-Probenpuffer gekocht. Proteine werden dann durch SDS-PAGE aufgetrennt, auf eine Immobilon-Membran übertragen und über Nacht mit einem an Meerrettichperoxidase (HRP) konjugierten Anti-Phosphotyrosin-Antikörper inkubiert. Membranen werden mit dem ECL-Reagenz entwickelt. Das Gesamt-EGFR-Protein wird durch Strippen der Membranen und erneutes Inkubieren mit rezeptorspezifischen Antikörpern bestimmt. Die Quantifizierung der Banden erfolgt durch Densitometrie unter Verwendung der ImageQuant-Software mit einem Molecular Dynamics Laser-Transmissionsscanner.
In vivo	Eine einzelne orale Dosis von 10 mg/kg Pelitinib (EKB-569) hemmt potent die EGFR-Phosphorylierung in A431-Xenotransplantaten mit überexprimiertem EGFR um 90% innerhalb von 1 Stunde und um >50% nach 24 Stunden. Die Verabreichung dieser Verbindung in einer Dosis von 20 mg/kg/Tag hemmt die Tumorentstehung in APC^Min/+-Mäusen um 87%, was dem Effekt von EKI-785 in 2-facher Dosis (40 mg/kg/Tag) entspricht, was mit einer größeren In-vivo-Potenz übereinstimmt. Diese Chemikalie hemmt selektiv die EGFR-Signalübertragung in Atemwegsepithelzellen in vivo. Im Mausmodell der Atemwegsepithelumbildung, die durch Virusinfektion induzierbar ist und eine verzögerte, aber dauerhafte Umstellung auf Becherzellenmetaplasie aufweist, korrigiert diese Verbindung in einer Dosis von 20 mg/kg/Tag alle 3 Aspekte der Epithelumbildung, indem sie die Zunahme von ziliierten Zellen und die Abnahme von Clara-Zellen vollständig blockiert und die Metaplasie von Becherzellen signifikant hemmt.
Literatur	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10973323/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14749472/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16453019/

Technischer Support

Handhabungshinweise

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

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C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
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C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

Pelitinib (EKB-569) EGFR Inhibitor

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 467.92

Qualitätskontrolle

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration

Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Löslichkeit

Molaritätsrechner

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Wirkmechanismus

Technischer Support