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GW843682X PLK Inhibitor

Kat.-Nr.S2880

GW843682X ist ein selektiver, ATP-kompetitiver Inhibitor von PLK1 und PLK3, mit IC50-Werten von 2,2 nM bzw. 9,1 nM, und ist auch >100-fach selektiv gegenüber ~30 anderen Kinasen.
GW843682X PLK Inhibitor Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 477.46

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Qualitätskontrolle

Charge: S288001 DMSO]95 mg/mL]false]Ethanol]3 mg/mL]false]Water]Insoluble]false Reinheit: 99.96%
  • In Nature Medicine für seine erstklassige Qualität zitiert
  • COA
  • NMR
  • SDS
  • Datenblatt
99.96

Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Molekulargewicht 477.46 Formel

C22H18F3N3O4S

 Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)
CAS-Nr. 660868-91-7 SDF herunterladen Lagerung von Stammlösungen

Löslichkeit

In vitro
Charge:

DMSO : 95 mg/mL (198.96 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 3 mg/mL

Water : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse Konzentration Volumen Molekulargewicht
Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo
Charge:

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

mg/kg g μL

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH2O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus

Targets/IC50/Ki
PLK1
(in MTT assay)
2.2 nM
PLK3
(in MTT assay)
9.1 nM
In vitro

GW 843682X ist ein submikromolarer Inhibitor der Proliferation der meisten Tumorzellen in Kultur, eine bemerkenswerte Ausnahme ist PC-3, eine Prostatakarzinomzelllinie. GW 843682X ist auch selektiv für Tumorzellen im Vergleich zu normalen diploiden Fibroblasten (HDF), mit einer >10-fachen Potenzdifferenz. GW 843682X ist gleich potent (ca. 200 nmol/L) gegen MES-SA/DX5 und die parentale Linie MES-SA, was darauf hindeutet, dass die Verbindung nicht effektiv durch die P-Glykoprotein-Effluxpumpe in der Zelle entfernt wird. GW 843682X hemmt dosisabhängig die Phosphorylierung von Ser15-p53 durch PLK1 in HeLa-Zellen, die das tet-induzierbare chimäre p53-PLK1-Protein exprimieren. GW 843682X fördert das Auswachsen von HDF-Zellen um 30 % bei 3,3 μM und ist in der Lage, das Auswachsen von H460 bei der niedrigsten Konzentration von 0,37 μM zu fördern. GW 843682X führt zu einem starken G2-M-Arrest bei 3 μM und sehr wenig G2-M-Arrest wird bei 1 μM in HDF-Zellen beobachtet. GW 843682X (3 μM) zeigt einen reduzierten G2-M-Arrest, aber es gibt einen Anstieg des Sub-2N-DNA-Gehalts in H460-Zellen. GW 843682X (0,5 μM) führt zu Zellen, die größer sind als die unbehandelten H460-Zellen und mehrere Kerne aufweisen. GW 843682X hemmt PLK1, PLK2, PLK3 und PLK4 mit Ki-Werten von 4,8 nM, 3,8 nM, 8 nM bzw. 0,163 μM. GW 843682X (1 μM) stört die Lokalisation des endogenen MyoGEF am zentralen Spindel in HeLa-Zellen. GW 843682X (1 μM) stört die Lokalisation von GFP-MyoGEF-wt (GFP-WT), GFP-MyoGEF-T574A (GFP-T574A) und GFP-MyoGEF-T574E (GFP-T574E) am zentralen Spindel in HeLa-Zellen. GW-843682X verursacht eine identische vorzeitige Midzone-Assemblierung und Proteinrekrutierung, was darauf hindeutet, dass die Medikamentenwirkung spezifisch für die PLK1-Hemmung ist. GW 843682X (200 nM) verursacht Mikrotubuli-Bündelung und zentrale Spindlin- und PRC1-Rekrutierungen am Äquator in HeLa-Zellen.

Kinase-Assay
In-vitro-Kinase-Assays
PLK1 und PLK3 werden in weißen 384-Well-Assay-Platten in variablen bekannten Konzentrationen in 100 % DMSO hinzugefügt. DMSO (1–5 % Endkonzentration) und EDTA (65 mM) werden als Kontrollen verwendet. Die Reaktionsmischung enthält die folgenden Komponenten bei 22 °C: 25 mM HEPES (pH 7,2); 15 mM MgCl2; 1 μM ATP; 0,05 μCi/Well [γ-33P]ATP (10 Ci/mmol); 1 μM Substratpeptid; 0,15 mg/mL Rinderserumalbumin; 1 mM DTT; und 2 nM PLK1-Kinasedomäne oder 5 nM PLK3 in voller Länge. Die Reaktionsmischung (10 oder 20 μL) wird sofort nach Zugabe des Enzyms über automatisierte Liquid-Handler schnell zu jedem Well gegeben und für 1 bis 1,5 h bei 22 °C inkubiert. Die 20 μL enzymatischen Reaktionen werden mit 50 μL Stopp-Mischung [50 mM EDTA, 4,0 mg/mL Streptavidin-SPA-Beads in Dulbecco
Literatur
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22621898/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19421227/

Technischer Support

Handhabungshinweise

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

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