Name: Agerafenib (CEP-32496)
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S8015
Rating: 5 (6 reviews)

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Charge: S801501 DMSO]9 mg/mL]false]Water]Insoluble]false]Ethanol]Insoluble]false Reinheit: 99.19%

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COA
NMR
HPLC
SDS
Datenblatt

99.19

Verwandte Ziele	ERK p38 MAPK JNK MEK Ras KRas S6 Kinase MAP4K TAK1 Mixed Lineage Kinase
Weitere Raf Inhibitoren	LY3009120 Exarafenib (KIN-2787) GDC-0879 Avutometinib (Ro5126766, CH5126766) PLX-4720 AZ 628 SB590885 TAK-632 GW5074 RAF265 (CHIR-265)

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration

Zelllinien	Assay-Typ	Konzentration	Inkubationszeit	Aktivitätsbeschreibung	PMID
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of LCK in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.002μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of PDGFRbeta in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.002μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of cKit in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.002μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of Ret in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.002μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of Abl1 in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.003μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of VEGFR2 in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.008μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of CSF1R in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.009μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of EPHA2 in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.014μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of BRAF V600E mutant in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.014μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of EGFR in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.022μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of wild type BRAF in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.036μM.	22168626
COLO205	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human COLO205 cells expressing BRAF V600E mutant after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=0.036μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of CRAF in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.039μM.	22168626
A375	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human A375 cells expressing BRAF V600E mutant after 72 hrs by cell titer blue assay, IC50=0.078μM.	22168626
A375	Function assay		2 hrs	Inhibition of BRAF V600E mutant-mediated MEK phosphorylation in human A375 cells after 2 hrs, IC50=0.082μM.	22168626
HCC827	Function assay			Displacement of [3H]-cyclopamine from SMO V404M mutant in gefitinib resistant human HCC827 cells by scintillation counting, Ki=0.1878μM.	28787156
COLO679	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human COLO679 cells expressing BRAF V600E mutant after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=0.211μM.	22168626
HT144	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human HT144 cells expressing BRAF V600E mutant after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=0.228μM.	22168626
SK-MEL-28	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human SK-MEL-28 cells expressing BRAF V600E mutant after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=0.454μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of cMET in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.513μM.	22168626
HCT116	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human HCT116 cells expressing wild type BRAF after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=0.669μM.	22168626
Hs578T	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human Hs578T cells expressing wild type BRAF after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=2.736μM.	22168626
DU145	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human DU145 cells expressing wild type BRAF after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=2.911μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of JAK2 in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=4.7μM.	22168626
PC3	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human PC3 cells expressing wild type BRAF after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=6.257μM.	22168626
LNCAP	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human LNCAP cells expressing wild type BRAF after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=6.631μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of MEK1 in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=7.1μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of MEK2 in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=8.3μM.	22168626
COLO205	Antitumor assay	10 mg/kg	14 days	Antitumor activity against human COLO205 cells xenografted in athymic nude mouse at 10 mg/kg, po bid for 14 days	22168626
COLO205	Antitumor assay	30 mg/kg	14 days	Antitumor activity against human COLO205 cells xenografted in athymic nude mouse at 30 mg/kg, po bid for 14 days	22168626
COLO205	Antitumor assay	100 mg/kg	14 days	Antitumor activity against human COLO205 cells xenografted in athymic nude mouse at 100 mg/kg, po bid for 14 days	22168626
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Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Molekulargewicht	517.46	Formel	C₂₄H₂₂F₃N₅O₅	Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)	3 Jahre-20°CPulver
CAS-Nr.	1188910-76-0	SDF herunterladen		Lagerung von Stammlösungen	1 Jahr-80°Cin Lösungsmittel 1 Monat-20°Cin Lösungsmittel
Synonyme	RXDX-105			Smiles	CC(C)(C1=CC(=NO1)NC(=O)NC2=CC(=CC=C2)OC3=NC=NC4=CC(=C(C=C43)OC)OC)C(F)(F)F

Löslichkeit

In vitro
Charge:

DMSO : 9 mg/mL (17.39 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse	Konzentration	Volumen	Molekulargewicht
=	×	×

Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo Charge:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	15% Captisol Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	10.000mg/ml (19.33mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, take 10 mg of this product, add it to 1 ml of 15% Captisol clear solution, and mix evenly to form a uniform suspension. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

Dosierung: mg/kg Durchschnittsgewicht der Tiere: g Dosiervolumen pro Tier:μL Anzahl der Tiere:

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH₂O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus

Merkmale	High binding affinity for both BRAF (V600E) mutation and related c-Raf, but no significant affinity for other kinases of MAPK pathway.
Targets/IC₅₀/Ki	c-Kit 2 nM(Kd) LCK 2 nM(Kd) PDGFRβ 2 nM(Kd) RET 2 nM(Kd) Abl1 3 nM(Kd) VEGFR2 8 nM(Kd) CSF-1R 9 nM(Kd) B-Raf (V600E) 14 nM(Kd) EphA2 14 nM(Kd) EGFR 22 nM(Kd) B-Raf 36 nM(Kd) C-Raf 39 nM(Kd) c-Met 513 nM(Kd)
In vitro	Agerafenib (CEP-32496) hemmt die Proliferation von A375-Zellen (BRAF^V600E) mit einer EC50 von 78 nM. Es zeigt eine empfindlichere Zytotoxizität für Tumorzelllinien (A375, SK-MEL-28, Colo-205, Colo-679 und HT-144), die mutiertes BRAF exprimieren, als für solche, die Wildtyp-BRAF exprimieren (HCT116, Hs578T, LNCaP, DU145 und PC-3). Diese Verbindung hemmt die Phosphorylierung der Mitogen-aktivierten Protein (MAP)/extrazellulären Signal-regulierten (ER) Kinase (MEK) (pMEK) in humanen Melanom (A375) und kolorektalen Karzinom (Colo-205) Zelllinien mit IC50-Werten von 78 nM bzw. 60 nM.
Kinase-Assay	Bindungsassay
Kinase-Assay	Kinasen werden auf T7-Phagen oder durch Expression in HEK-293-Zellen produziert und mit DNA markiert. Bindungsreaktionen werden bei Raumtemperatur für 1 Stunde durchgeführt, und der Anteil der Kinase, der nicht an die Testverbindung gebunden ist, wird durch Fang mit einem immobilisierten Affinitätsliganden und Quantifizierung mittels quantitativer PCR bestimmt. Jede Kinase wird einzeln gegen Agerafenib (CEP-32496) getestet. Die Kd-Werte für diese Verbindung werden unter Verwendung von elf seriellen 3-fachen Verdünnungen bestimmt und als Mittelwerte aus Doppelversuchen dargestellt. Die Variabilität zwischen den einzelnen Werten beträgt weniger als das 2-fache.
In vivo	Agerafenib (CEP-32496) zeigt eine gute Stabilität in Lebermikrosomenpräparaten von Maus, Hund, Affe und Mensch mit gemessenen intrinsischen Clearance-Werten von <23 (μL/min)/mg und t_1/2 > 60 min in allen Assays. Diese Verbindung (30 mg/kg, oral, BID) zeigt Tumorstase und eine 40%ige Inzidenz von partiellen Tumorregressionen (PRs) im Colo-205-Xenograft-Mausmodell, während die 100 mg/kg-Dosisgruppe sowohl Tumorstase als auch eine 80%ige Inzidenz von PRs aufweist. Es (30 mg/kg, oral, BID) führt zu einer 50%igen und 75%igen Hemmung von normalisiertem pMEK in Tumorlysat-Proben zum Zeitpunkt von 2 Stunden bzw. 6 Stunden nach der Dosis, während eine Dosis von 55 mg/kg zu einer 75%igen bis 57%igen Hemmung von pMEK nach 2 Stunden bis 10 Stunden nach der Verabreichung im Colo-205-Xenograft-Mausmodell führt. Es ist oral in mehreren präklinischen Spezies bioverfügbar (>95% bei Ratten, Hunden und Affen). Diese Verbindung (100 mg/kg) führt zur Hemmung von pMEK und pERK und zu anhaltender Tumorstase und Regressionen in BRAF(V600E)-Kolonkarzinom-Xenotransplantaten in Nacktmäusen.
Literatur	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22168626/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22319199/

Anwendungen

Methoden	Biomarker	Bilder	PMID
Growth inhibition assay	Cell viability		31695841
Western blot	p-RET / RET / p-PLCγ / PLCγ / p-ERK / ERK / p-MEK / MEK		28011461

Technischer Support

Handhabungshinweise

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Wenn Sie weitere Fragen haben, hinterlassen Sie bitte eine Nachricht.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
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C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

Agerafenib (CEP-32496) Raf Inhibitor

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 517.46