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LY3009120 Raf Inhibitor

Kat.-Nr.S7842

LY3009120 (DP-4978) ist ein potenter Pan-Raf-Inhibitor mit einer IC50 von 44 nM, 31-47 nM und 42 nM für A-Raf, B-Raf und C-Raf in A375-Zellen. Diese Verbindung induziert Autophagy. Phase 1.
LY3009120 Raf Inhibitor Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 424.51

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Qualitätskontrolle

Charge: Reinheit: 99.08%
99.08

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration

Zelllinien Assay-Typ Konzentration Inkubationszeit Formulierung Aktivitätsbeschreibung PMID
A375 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human A375 cells after 72 hrs by resazurin assay, IC50=0.0092μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to EphA2 in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.02μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to BRAF in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.031μM. 25965804
A375 Function assay 72 hrs Inhibition of BRAF V600E mutant in human A375 cells assessed as inhibition of ERK phosphorylation measured after 72 hrs by ELISA assay, IC50=0.037μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to ZAK in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.039μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to CRAF in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.042μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to ARAF in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.044μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to p38 in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.061μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to FYN in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.091μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to MAP3K1 in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.098μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to EphB4 in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.1μM. 25965804
HCT116 Function assay Inhibition of KRAS G13D mutant in human HCT116 cells assessed as inhibition of ERK phosphorylation by ELISA, IC50=0.15μM. 25965804
A375 Function assay In vivo inhibition of BRAF V600E mutant in human A375 cells xenografted in po dosed NIH nude rat assessed as plasma concentration required to inhibit ERK phosphorylation by 50%, INH=0.165μM. 25965804
HCT116 Antiproliferative assay 67 hrs Antiproliferative activity against human HCT116 cells after 67 hrs by resazurin assay, IC50=0.22μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to CSK in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.29μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to SRC in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.31μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to ABL in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.38μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to IRAK1 in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.39μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to GCN2 in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.45μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to JNK in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.47μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to MAP2K5 in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.8μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to KHS1 in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.97μM. 25965804
HCT116 Function assay <100 nM Paradoxical activation of RAS/RAF/MEK signaling pathway in human HCT116 cells expressing wild type BRAF assessed as ERK phosphorylation at <100 nM 25965804
A375 Function assay Inhibition of desthiobiotin-ATP acylphosphate probe binding to B-Raf in human A375 cells by MS analysis, IC50=0.031μM. 30529543
A375 Function assay Inhibition of desthiobiotin-ATP acylphosphate probe binding to C-Raf in human A375 cells by MS analysis, IC50=0.042μM. 30529543
A375 Function assay Inhibition of desthiobiotin-ATP acylphosphate probe binding to A-Raf in human A375 cells by MS analysis, IC50=0.044μM. 30529543
MV4-11 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human MV4-11 cells after 72 hrs by Cell-Titer Glo assay, IC50=0.1μM. 30529543
SK-MEL-2 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human SK-MEL-2 cells after 72 hrs by Cell-Titer Glo assay, IC50=0.2μM. 30529543
A375 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human A375 cells after 72 hrs by Cell-Titer Glo assay, IC50=0.3μM. 30529543
SW579 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human SW579 cells after 72 hrs by Cell-Titer Glo assay, IC50=0.9μM. 30529543
HT-29 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human HT-29 cells after 72 hrs by Cell-Titer Glo assay, IC50=0.9μM. 30529543
HepG2 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human HepG2 cells after 72 hrs by Cell-Titer Glo assay, IC50=2.6μM. 30529543
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Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Molekulargewicht 424.51 Formel

C23H29FN6O

 Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)
CAS-Nr. 1454682-72-4 SDF herunterladen Lagerung von Stammlösungen

Synonyme DP-4978 Smiles CC1=CC(=C(C=C1C2=C(N=C3C(=C2)C=NC(=N3)NC)C)NC(=O)NCCC(C)(C)C)F

Löslichkeit

In vitro
Charge:

DMSO : 20 mg/mL (47.11 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse Konzentration Volumen Molekulargewicht
Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo
Charge:

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

mg/kg g μL

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH2O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus

Targets/IC50/Ki
C-Raf
(Cell-free assay)
4.3 nM
BRAF(V600E)
(Cell-free assay)
5.8 nM
BRAF WT
(Cell-free assay)
15 nM
In vitro
LY3009120 hemmt das Zellwachstum von A375- und HCT116-Zellen mit einer IC50 von 9,2 bzw. 220 μM. Diese Verbindung hemmt die Tyrosinkinase KDR mit einer IC50 von 3,9 μM.
Kinase-Assay
Messung der Kinaseaktivität mittels KiNativ-Assays
Verbindungen werden in A375-Zelllysaten unter Verwendung der ATP-basierten Sonde bei 5 µM gescreent. Die IC50-Werte werden in Mikromol-Einheiten angegeben. Zellpellets werden in vier Volumina Lysepuffer [25 mM Tris pH 7,6, 150 mM NaCl, 1 % CHAPS, 1 % Tergitol NP-40 Typ, 1 % v/v Phosphataseinhibitor-Cocktail II] resuspendiert, mit einem Spitzensonikator beschallt und mit einem Dounce-Homogenisator homogenisiert. Lysate werden durch Zentrifugation bei 100.000 g für 30 Minuten geklärt. Die geklärten Lysate werden durch einen 0,22 μM Spritzenfilter filtriert und in den Reaktionspuffer [20 mM Hepes pH 7,8, 150 mM NaCl, 0,1 % Triton X-100, 1 % v/v Phosphataseinhibitor-Cocktail II] gelfiltriert. Anschließend wird MnCl2 dem Lysat zu einer Endkonzentration von 20 mM vor der Inhibitorbehandlung und Sondenmarkierung zugesetzt. Die für die IC50-Bestimmungen verwendeten finalen Inhibitorkonzentrationen betragen 10, 1, 0,1 und 0,01 μM. ATP-Kompetitionsexperimente werden bei 1.000, 100, 10 und 1 μM ATP durchgeführt. Alle Inhibitorbehandlungen werden bei Raumtemperatur durchgeführt.
In vivo
Bei Ratten mit BRAF V600E ST019VR PDX-Tumoren zeigt LY3009120 (15 oder 30 mg/kg, p.o.) eine dosisabhängige Tumorwachstumshemmung. Bei Nacktratten mit A375-Xenotransplantat zeigt die orale Einzeldosisbehandlung mit dieser Verbindung (3 bis 50 mg/kg, p.o.) eine dosisabhängige Hemmung von Phospho-ERK, mit einer Dosis für 50 % Hemmung von Phospho-ERK (EC50) von 4,36 mg/kg, wobei die Plasmakonzentration zur Erzielung einer 50 %igen Hemmung von Phospho-ERK (EC50) 68,9 ng/mL oder 165 nM beträgt.
Literatur

Anwendungen

Methoden Biomarker Bilder PMID
Western blot Beclin-1 / Mcl-1 / LC3 / p62 p-EGFR / EGFR / p-BRAF / BRAF / p-CRAF / CRAF / p-MEK / MEK / p-AKT / AKT
S7842-WB2
28382170

Klinische Studieninformationen

(Daten von https://clinicaltrials.gov, aktualisiert am 2024-05-22)

NCT-Nummer Rekrutierung Erkrankungen Sponsor/Kooperationspartner Startdatum Phasen
NCT02014116 Terminated
Neoplasms|Neoplasm Metastasis|Melanoma|Carcinoma Non-Small-Cell Lung|Colorectal Neoplasms
Eli Lilly and Company
 November 26 2013 Phase 1

Technischer Support

Handhabungshinweise

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

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Häufig gestellte Fragen

Frage 1:
I am trying to figure out solubility of this compound for in vivo studies. I need some details on the formulation and how it is made to dissolve the chemical?

Antwort:
It can dissolve in 4% DMSO/30% PEG 300/5% Tween 80/ddH2O at 1 mg/ml clearly, and in 0.5% CMC Na at 30 mg/ml as a suspension.