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Bafilomycin A1 (Baf-A1) V-ATPase-Inhibitor

Name: Bafilomycin A1 (Baf-A1)
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S1413
Availability: InStock
Rating: 5 (562 reviews)

Kat.-Nr.S1413

Bafilomycin A1 (Baf-A1) ist ein Vakuolen-H⁺-ATPase-Hemmer mit einer IC50 von 0,44 nM, der die Autophagie hemmt und gleichzeitig die Apoptose induziert.

Bafilomycin A1 (Baf-A1) Proton Pump Inhibitor Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 622.83

Springe zu Wirkmechanismus Zellkultur & Arbeitskonzentration Löslichkeit Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität Spezifität

Qualitätskontrolle

Charge: Reinheit: >97%

Produkte, die oft zusammen verwendet werden mit Bafilomycin A1 (Baf-A1)

3-Methyladenine (3-MA)

Die Kombination aus diesem Text und 3-Methyladenin (3-MA) sowie Bestrahlung führt zu ausgeprägteren und länger anhaltenden DNA-Schäden in Gliom- und Brustkrebszellen.

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Untersuchen Sie die Signalwege, die an der durch ARV S1133 regulierten Umstellung von Autophagie auf Apoptose beteiligt sind.

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Untersuchen Sie damit den TGFBI-Stoffwechsel und die Autophagie-Beeinträchtigung in TBCD-Hornhautfibroblasten.

Verwandte Ziele	CD markers AChR Calcium Channel Sodium Channel Potassium Channel GABA Receptor TRP Channel ATPase GluR NMDAR P2 Receptor P-gp CFTR SGLT Chloride Channel MCT Amino acid transporter GLUT CRM1 VDAC BCRP NKCC OCT NCX OAT VMAT Aquaporin EAAT GlyT GlyR
Verwandte Produkte	Tenatoprazole Ilaprazole Revaprazan Hydrochloride Ilaprazole sodium PF-3716556 Ufiprazole

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration

Zelllinien	Assay-Typ	Konzentration	Inkubationszeit	Aktivitätsbeschreibung	PMID
human H4 cells	Function assay	0.4 μM	24 h	Induction of light chain 3-GFP level in human H4 cells at 0.4 uM after 24 hrs by high throughput fluorescence microscopy relative to control	18024584
RAW 264.7 cells	Function assay	100 nM		Antimicrobial activity against Salmonella enterica Typhimurium 14028 infected in RAW 264.7 cells assessed as increased nitric oxide production in infected cells at 100 nM	19307359
mouse RAW264.7 cells	Apoptosis assay	100 nM	16 h	Induction of apoptosis in mouse RAW264.7 cells assessed as late apoptotic cells at 100 nM after 16 hrs using annexin V-propidium iodide staining by flow cytometry	19307359
human HeLa cells	Function assay	400 nM		Induction of autophagy in human HeLa cells expressing EGFP-LC3 assessed as increase in LC3-2 level at 400 nM	18391949
human MCF7 cells	Function assay		4 h	Inhibition of rapamycin-induced autophagy in human MCF7 cells expressing EGFP-LC3 assessed as decrease in EGFP levels at 100 nM after 4 hrs by Western blotting relative to control	20028134
RAW 264.7 cells	Bactericidal activity assay	100 nM	16 h	Bactericidal activity against Salmonella enterica Typhimurium 14028 infected in RAW 264.7 cells assessed as decrease in bacterial growth yield at 100 nM after 16 hrs postinfection by flow cytometry in presence of 10 ug/ml of intracellular replication inhi	19307359
RAW 264.7 cells	Antimicrobial activity assay	100 nM		Antimicrobial activity against Salmonella enterica Typhimurium 14028 infected in RAW 264.7 cells assessed as increased nitric oxide production in infected cells at 100 nM	19307359
RAW 264.7 cells	Antimicrobial activity assay	100 nM	30 mins	Antimicrobial activity against Salmonella enterica Typhimurium 14028 infected in RAW 264.7 cells assessed as inhibition of bacterial replication at 100 nM treated 30 mins before infection measured after 2 to 16 hrs postinfection by flow cytometry	19307359
rat 3Y1 cells	Function assay			Induction of morphological changes in rat 3Y1 cells assessed as elongation of cells	29701963
human Huh7.5.1 cells	Antiviral activity		3 h	Antiviral activity against HCV genotype 2a JFH-1 in human Huh7.5.1 cells assessed as reduction of viral entry up to 3 hrs by luciferase assay	26396683
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Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Molekulargewicht	622.83	Formel	C₃₅H₅₈O₉	Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)	3 Jahre-20°CPulver
CAS-Nr.	88899-55-2	SDF herunterladen		Lagerung von Stammlösungen	1 Jahr-80°Cin Lösungsmittel 1 Monat-20°Cin Lösungsmittel
Synonyme	N/A			Smiles	CC1CC(=CC=CC(C(OC(=O)C(=CC(=CC(C1O)C)C)OC)C(C)C(C(C)C2(CC(C(C(O2)C(C)C)C)O)O)O)OC)C

Löslichkeit

In vitro
Charge:

DMSO : 100 mg/mL (160.55 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

DMSO : 100 mg/mL (160.55 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

DMSO : 100 mg/mL (160.55 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse	Konzentration	Volumen	Molekulargewicht
=	×	×

Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo Charge:
Klare Lösung	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	0.300mg/ml (0.48mM)	Nehmen Sie als Beispiel die 1-ml-Arbeitslösung, geben Sie 50 μl einer 6 mg/ml geklärten DMSO-Stammlösung zu 400 μl PEG300 hinzu, mischen Sie alles gleichmäßig, um es zu klären; geben Sie 50 μl Tween80 zu dem oben genannten System hinzu, mischen Sie alles gleichmäßig, um es zu klären; fügen Sie dann 500 μl ddH2O hinzu, um das Volumen auf 1 ml einzustellen. Die gemischte Lösung sollte für optimale Ergebnisse sofort verwendet werden.
Klare Lösung	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	5.000mg/ml (8.03mM)	Nehmen Sie als Beispiel die 1-ml-Arbeitslösung, geben Sie 50 μl einer 100 mg/ml geklärten DMSO-Stammlösung zu 400 μl PEG300 hinzu, mischen Sie alles gleichmäßig, um es zu klären; geben Sie 50 μl Tween80 zu dem oben genannten System hinzu, mischen Sie alles gleichmäßig, um es zu klären; fügen Sie dann 500 μl ddH2O hinzu, um das Volumen auf 1 ml einzustellen. Die gemischte Lösung sollte für optimale Ergebnisse sofort verwendet werden.
Homogene Suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Nehmen Sie als Beispiel die 1-ml-Arbeitslösung: Geben Sie 5 mg dieses Produkts zu 1 ml CMC-Na-Lösung hinzu und mischen Sie alles gleichmäßig, um eine homogene Suspension mit einer Endkonzentration von 5 mg/ml zu erhalten.
Klare Lösung	5% DMSO 1 95% Corn oil Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	1.650mg/ml (2.65mM)	Nehmen Sie als Beispiel die 1-ml-Arbeitslösung: Geben Sie 50 μl einer 33 mg/ml klaren DMSO-Stammlösung zu 950 μl Maisöl hinzu und mischen Sie alles gleichmäßig. Die gemischte Lösung sollte für optimale Ergebnisse sofort verwendet werden.
Homogene Suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Nehmen Sie als Beispiel die 1-ml-Arbeitslösung: Geben Sie 5 mg dieses Produkts zu 1 ml CMC-Na-Lösung hinzu, mischen Sie alles gleichmäßig, um eine homogene Suspension mit einer Endkonzentration von 5 mg/ml zu erhalten.
Homogene Suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Nehmen Sie als Beispiel die 1-ml-Arbeitslösung: Geben Sie 5 mg dieses Produkts zu 1 ml CMC-Na-Lösung hinzu und mischen Sie alles gleichmäßig, um eine homogene Suspension mit einer Endkonzentration von 5 mg/ml zu erhalten.

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

Dosierung: mg/kg Durchschnittsgewicht der Tiere: g Dosiervolumen pro Tier:μL Anzahl der Tiere:

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH₂O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus

Targets/IC₅₀/Ki	H+-ATPase ^[1] (Cell-free assay) 0.44 nM
In vitro	Bafilomycin A1 (Baf-A1) ist ein toxisches Makrolid-Antibiotikum, das aus Streptomyces griseus gewonnen wird und den durch das äußere Mantelepithel (OME) induzierten Kurzschlussstrom hemmt. Die IC50- und maximale Hemmdosis dieser Verbindung betragen 0,17 μM bzw. 0,5 μM.^[2]Darüber hinaus hemmt sie den Säreeinstrom mit einem IC50-Wert von 0,4 nM. Sie hemmt auch die Säuerung dosisabhängig, was zu einer geringeren Löschung und damit zu einer höheren Fluoreszenz führt.^[3] Es verhindert die durch H. pylori induzierte Vakuolisierung von Hela-Zellen mit einer Hemmkonzentration von 4 nM (ID50), die 50 % des Maximums entspricht, und ist sehr effizient bei der Wiederherstellung des normalen Aussehens vakuolisierter Zellen.^[4] Es beeinflusst auch den Transport von endozytiertem Material von frühen zu späten endozytischen Kompartimenten, wodurch nicht nur der niedrige endosomale pH-Wert aufgehoben, sondern auch der Transport von frühen zu späten Endosomen in HeLa-Zellen blockiert wird.^[5] Bei Konzentrationen von 0,1–1 μM hemmt es die Ansäuerung von Lysosomen vollständig, was durch Inkubation mit Acridinorange in BNL CL.2- und A431-Zellen nachgewiesen wurde.^[6]Wird es zu Hanks' ausgewogener Salzlösung gegeben, wird der endogene Proteinabbau stark gehemmt und es sammeln sich zahlreiche Autophagosomen in H-4-II-E-Zellen an. Zudem verhindert es das Auftreten von endozytiertem HRP in autophagischen Vakuolen. ^[7]
Kinase-Assay	ATPase-Enzymaktivitätsassays
Kinase-Assay	Das ATPase-Enzym-Assay-Medium enthält 6 mM MgSO₄, 50 mM HEPES (pH 7,4), 200 mM Na₂SO₃ (V-ATPase-Aktivator), 0,5 mM Natriumorthovanadat (P-ATPase-Inhibitor), 0,5 mM Natriumazid (F-ATPase-Inhibitor) und 3 mM Na₂ATP. Dieses Medium (1,0 ml) wird mit oder ohne Zugabe des V-Typ-ATPase-Inhibitors Bafilomycin A1 (Baf-A1) 60 Minuten lang bei 23–25 °C mit dem gefilterten Homogenat (0,1 ml) inkubiert. Die Reaktion wird durch Zugabe von 1 ml TCA 3 % gestoppt. Spektrometrische Blindproben werden wie für den Enzymtest vorbereitet, mit der Ausnahme, dass die Gewebeprobe nach der Säure hinzugefügt wird. Die Phosphatanalyse erfolgt durch Zugabe von 2 ml 1-Butanol und 0,2 ml Molybdatlösung (5 g Ammoniummolybdat, 22 ml H₂SO₄ auf 100 ml). Nach 15 Sekunden Vortexen wird die Lösung mit 0,5 ml Citratlösung (100 g/500 ml, pH 7,0) neutralisiert und erneut 15 Sekunden lang vortexiert. Die Lösung wird dann zentrifugiert (2000 × g; 3 Minuten), um die Butanolphase abzutrennen, und die Absorption dieser Phase wird bei 400 nm gemessen. Orthophosphat-Standards werden hergestellt (0,1 μM–2,0 μM) und auf die gleiche Weise wie die Enzymaktivitätstests behandelt. Die Enzymaktivität wird in μmol freigesetztem Orthophosphat pro Stunde und pro Milligramm Protein angegeben. Die V-ATPase-Aktivität wird als Differenz zwischen der gesamten ATPase-Aktivität, gemessen in Gegenwart von Na₂SO₃, Natriumorthovanadat und Natriumazid, und der ATPase-Aktivität, gemessen in Gegenwart dieser Reagenzien und dieser Verbindung, betrachtet.
In vivo	Bafilomycin A1 (Baf-A1) (1 μM und 0,1 μM) hemmt die Resorptionsaktivität kultivierter Osteoklasten vollständig.^[8]Es hemmt dosisabhängig die Na+-Aufnahmerate bei jungen Tilapias mit einem Ki-Wert von 0,16 μM. ^[9]
Literatur	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9684329/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15596387/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17576165/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8446034/ [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9811698/ [6] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1832676/ [7] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9639028/ [8] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7817803/ [9] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10574743/ [10] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14713959/