nur für Forschungszwecke

RAF709 Raf Inhibitor

Name: RAF709
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S8690
Rating: 5 (5 reviews)

Kat.-Nr.S8690

RAF709 ist ein potenter Inhibitor der B/C RAF-Kinase mit nahezu äquivalenten IC50-Werten von 0,4 nM für B-RAF und C-RAF, der eine hohe Selektivität aufweist, die eine mehr als 99%ige On-Target-Bindung an BRAF, BRAFV600E und CRAF bei 1 M demonstriert und sehr wenige Off-Targets mit DDR1 (>99%), DDR2 (86%), FRK (92%) und PDGFRb (96%), den einzigen Kinasen mit einer Bindung >80% bei 1 M.

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 542.55

Springe zu

Qualitätskontrolle

Charge: S869001 DMSO]100 mg/mL]false]Ethanol]100 mg/mL]false]Water]Insoluble]false Reinheit: 99.86%

In Nature Medicine für seine erstklassige Qualität zitiert
COA
NMR
HPLC
SDS
Datenblatt

99.86

Verwandte Ziele	ERK p38 MAPK JNK MEK Ras KRas S6 Kinase MAP4K TAK1 Mixed Lineage Kinase
Weitere Raf Inhibitoren	LY3009120 Exarafenib (KIN-2787) GDC-0879 Avutometinib (Ro5126766, CH5126766) PLX-4720 AZ 628 SB590885 TAK-632 GW5074 RAF265 (CHIR-265)

Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Molekulargewicht	542.55	Formel	C₂₈H₂₉F₃N₄O₄	Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)	3 Jahre-20°CPulver
CAS-Nr.	1628838-42-5	--		Lagerung von Stammlösungen	1 Jahr-80°Cin Lösungsmittel 1 Monat-20°Cin Lösungsmittel
Synonyme	N/A			Smiles	CC1=C(C=C(C=N1)NC(=O)C2=CC(=CC=C2)C(F)(F)F)C3=CC(=C(N=C3)OC4CCOCC4)N5CCOCC5

Löslichkeit

In vitro
Charge:

DMSO : 100 mg/mL (184.31 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 100 mg/mL

Water : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse	Konzentration	Volumen	Molekulargewicht
=	×	×

Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo Charge:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	5.000mg/ml (9.22mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	0.800mg/ml (1.47mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 16 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

Dosierung: mg/kg Durchschnittsgewicht der Tiere: g Dosiervolumen pro Tier:μL Anzahl der Tiere:

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH₂O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus

Targets/IC₅₀/Ki	C-Raf (Cell-free assay) 0.4 nM BRAF(V600E) (Cell-free assay) 1 nM B-Raf (Cell-free assay) 1.5 nM
In vitro	RAF709 scheint sehr langsame Dissoziationskinetiken (T_1/2 > 6,5 h) unter Verwendung der schnellen Verdünnungsmethode zur Messung seiner Dissoziationsgeschwindigkeitskonstante aufzuweisen. In zellulären Assays werden die Dosis-Wirkungs-Beziehungen von pMEK und pERK in Calu-6-Zellen mit EC50 von 0,02 und 0,1 M mit minimaler paradoxer Aktivierung und Hemmung der Proliferation mit EC50 von 0,95 M gemessen. Diese Verbindung stabilisiert BRAF-CRAF-Dimere mit einem EC50 von 0,8 M. Von den 456 getesteten Kinasen zeigt diese Chemikalie eine hohe Selektivität, die eine über 99%ige On-Target-Bindung an BRAF, BRAFV600E und CRAF bei 1 M und sehr wenige Off-Targets mit DDR1 (>99%), DDR2 (86%), FRK (92%) und PDGFRb (96%) demonstriert, den einzigen Kinasen mit einer Bindung >80% bei 1 M. Es zeigt gleiche Aktivität gegen beide RAF-Monomere und -Dimere. In In-vitro-Biochemie-Assays zeigt diese Verbindung eine potente hemmende Aktivität gegen BRAF, BRAFV600E und CRAF mit IC50-Werten zwischen 0,3 und 1,5 nmol/L. Diese chemische Behandlung führt zu einer dosisabhängigen Induktion der B/CRAF-Heterodimerisierung in HCT116, hemmt jedoch die MEK- und ERK-Phosphorylierung, im Einklang mit der Fähigkeit dieser Verbindung, die RAF-Dimere effektiv zu hemmen. Es hemmt selektiv die onkogene Signalübertragung und Proliferation in Tumorzellen mit BRAF-, NRAS- oder KRAS-Mutationen mit minimaler paradoxer Aktivierung.
Kinase-Assay	CRAF-Kinase-Assay
Kinase-Assay	Der CRAF-Kinase-Assay wurde unter Verwendung von 10 nM Kinase-inaktivem MEK1-Proteinsubstrat (mit einer K97R-Mutation), 3 M ATP und 10 pM CRAF Y340E/Y341E durchgeführt. Der Reaktionspuffer enthielt 50 mM Tris pH 7,5, 10 mM MgCl2, 0,05% BSA, 50 mM NaCl, 0,01% Tween-20 und 1 mM DTT. Die Reaktionen wurden bei Raumtemperatur in einem Volumen von 10 L in weißen 384-Flachbodenplatten für 40 min durchgeführt und durch Zugabe von 5 L/Well Quench-Lösung (50 mM Tris pH 7,5, 50 mM EDTA) gestoppt. Die beendeten Reaktionen erhielten 5 L/Well Detektionsreagenzien, bestehend aus 50 mM Tris pH 7,5, 0,01% Tween-20, 1:1000 verdünntem Anti-Phospho-MEK1/2 S217/S221-Antikörper, 0,01 mg/mL jeweils AlphaScreen Protein A-beschichteten Akzeptorperlen und Streptavidin-beschichteten Donorperlen. Die Platten wurden in einem EnVision-Plattenleser nach Inkubation über Nacht bei Raumtemperatur abgelesen. In Verbindungshemmstudien wurde diese Verbindung in einem Konzentrationsbereich von 25 M bis 1,74 × 10⁻⁶ M in einem 16-Punkt-, 3-fach-Format getestet. DMSO lag in einer Endkonzentration von 0,5% vor. Diese Chemikalie wurde 30 min lang mit CRAF vorinkubiert, bevor Substrate zur Start der Reaktion hinzugefügt wurden. Hemmdaten wurden an eine Vier-Parameter-Logistikgleichung angepasst, um die IC50 der Verbindungen zu berechnen.
In vivo	RAF709 ist in KRAS-mutierten Xenograft-Modellen gut verträglich und wirksam. Es ist in Plasma nach 3-stündiger Inkubation bei 37 über verschiedene Spezies hinweg reasonably stabil [Plasmastabilität (% Rest): Ratte 85%, Maus 82%, Hund 95%, Mensch 101%], und die Plasmaproteinbindung wird über die Spezies hinweg mit 98% gemessen. In pharmakokinetischen Experimenten weist diese Verbindung eine moderate Clearance bei Mäusen (35 mL/min/kg) und Hunden (14 mL/min/kg) und eine hohe Clearance bei Ratten (50 mL/min/kg) auf. Cmax bei Mäusen (1 M), Hunden (0,5 M) und Ratten (0,5 M) erreichen pharmakologisch aktive Konzentrationen, und eine akzeptable orale Bioverfügbarkeit wird bei Mäusen (68%), Ratten (24%) und Hunden (48%) beobachtet. Im Calu-6-Xenograft-Nacktmausmodell führt die Behandlung mit dieser Chemikalie zu einer dosisabhängigen Antitumoraktivität, wobei 10 mg/kg subeffizient ist (%T/C = 92%), 30 mg/kg zu einer messbaren Antitumoraktivität führte (% T/C = 46%) und 200 mg/kg zu einer mittleren Tumorregression von 92% führte, während die gleiche hohe Dosis im PC3, KRAS WT-Modell nicht wirksam ist.
Literatur	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28557458/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29343524/

Technischer Support

Handhabungshinweise

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Wenn Sie weitere Fragen haben, hinterlassen Sie bitte eine Nachricht.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):