RITA p53 Aktivator

Inducer of DNA cross-links, not a DNA intercalator.

RITA zeigt ein hochselektives Muster differentieller zytotoxischer Aktivität in den Tumorzelllinien, aufgrund zellulärer Akkumulation in der zytosolischen (S100) Fraktion. Diese Verbindung hemmt auch das Wachstum anderer Nierenzelllinien, einschließlich ACHN und UO-31, mit IC50-Werten von 13 μM bzw. 37 μM. [1] Es (10 nM) verursacht einen Zellzyklusarrest mit Akkumulation von Zellen in der G2-M-Phase und induziert DNA-Fragmentierung und Apoptosis bei 100 nM, beides mit erhöhten p53-Proteinspiegeln. Diese Chemikalie (30 nM) induziert auch DNA-Protein- und DNA-DNA-Quervernetzungen in A498-Zellen. Gleichzeitig hat sie keine Auswirkungen auf die Top1-vermittelte Entspannung von supercoiled SV40-DNA. [2] Es unterdrückt das Wachstum von HCT116-Zellen signifikant (97%), hemmt aber nur geringfügig das Wachstum von HCT116 TP53^-/--Zellen (13%). Diese Verbindung ist bei der Wachstumsunterdrückung in Tumorzelllinien, die Wildtyp-p53 exprimieren, wesentlich effizienter als in Zelllinien, denen p53 fehlt, und solchen, die mutiertes p53 exprimieren. Es bindet volllängiges p53, aber nicht Glutathion-S-Transferase (GST)-Protein oder HDM-2 (ein Schlüsselregulator von p53 wird durch die Rettung der embryonalen Letalität von MDM2 stark unterstützt). Diese Chemikalie blockiert die p53−HDM-2-Interaktion und die p53-Ubiquitinierung. Es verringert die Menge an HDM-2, die mit p53 co-präzipitiert wird, erheblich, obwohl beide Proteine hochreguliert sind. Diese Verbindung verhindert Interaktionen zwischen den gereinigten GST-p53- und 6XHis-getaggten His-HDM-2-Proteinen. [3] Es wird gezeigt, dass es Apoptosis durch Förderung der p53Ser46-Phosphorylierung induziert. [4] Diese Chemikalie induziert die Aktivierung von p53 in Verbindung mit der Hochregulierung von phosphoryliertem ASK-1, MKK-4 und c-Jun. Es induziert die Aktivierung der JNK-Signalübertragung. [5] Im Gegensatz dazu zeigen jedoch andere Ergebnisse mittels Kernspinresonanz (NMR), dass es die Bildung des Komplexes zwischen p53 (Reste 1-312) und der N-terminalen p53-bindenden Domäne von MDM2 (Reste 1-118) nicht blockiert, was sehr wahrscheinlich darauf hindeutet, dass die Bindung dieser Verbindung eine native Konformation von p53 erfordert. [6]

RITA wird Mäusen nach intraperitonealer Verabreichung gut vertragen, ohne dass bei Dosen von bis zu 10 mg/kg über einen Monat lang ein Gewichtsverlust zu beobachten war. Nach fünf Injektionen von 0,1 mg/kg dieser Verbindung wird das Wachstum der HCT116-Tumoren um 40% unterdrückt, ohne offensichtliche Auswirkungen auf die HCT116 TP53^-/--Tumoren. Bei einer Dosis von 1 oder 10 mg/kg zeigt es eine starke Antitumoraktivität. Fünf 1 mg/kg-Injektionen dieser Chemikalie führen zu einer mehr als zweifachen Verringerung der Wachstumsrate von p53-positiven Xenografts ohne Auswirkungen auf p53-negative Xenografts. HCT116-Tumoren sind bei Mäusen, die mit 10 mg/kg davon behandelt wurden, um 90% kleiner als bei unbehandelten Kontrollmäusen. Diese Verbindung hemmt das Tumorwachstum auf eine Wildtyp-p53-abhängige Weise. [3]