Home Cell Cycle Chk Inhibitor MK-8776 (SCH 900776)

nur für Forschungszwecke

MK-8776 (SCH 900776) Chk Inhibitor

Kat.-Nr.S2735

MK-8776 (SCH 900776) ist ein selektiver Chk1-Inhibitor mit einem IC50 von 3 nM in einem zellfreien Assay, der eine 500-fache Selektivität gegenüber Chk2 aufweist. Er befindet sich in Phase 2.
MK-8776 (SCH 900776) Chk Inhibitor Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 376.25

Springe zu

Qualitätskontrolle

Charge: Reinheit: 99.98%
99.98

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration

Zelllinien Assay-Typ Konzentration Inkubationszeit Formulierung Aktivitätsbeschreibung PMID
SKOV3 Growth Inhibition Assay 0.3 µM 8 d sensitizes the cell lines to 23548269
BxPC-3 Growth Inhibition Assay 10-1000 nM 24-48h enhances the chemosensitization to 23804422
MiaPaCa-2 Growth Inhibition Assay 10-1000 nM 24-48h enhances the chemosensitization to 23804422
AsPC-1 Growth Inhibition Assay 10-1000 nM 24-48h enhances the chemosensitization to 23804422
H1299 Growth Inhibition Assay 500 nM 24 h DMSO enhances the chemosensitization to PMX 24113549
H1993 Growth Inhibition Assay 500 nM 24 h DMSO enhances the chemosensitization to PMX 24113549
H1437 Growth Inhibition Assay 500 nM 24 h DMSO enhances the chemosensitization to PMX 24113549
H23 Growth Inhibition Assay 500 nM 24 h DMSO enhances the chemosensitization to PMX 24113549
AsPC-1 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
TK10 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
A498 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
U20S Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
SNB19 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
MDA-MB-435 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
U87 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
HCC2998 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
MDA-MB-231 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
MiaPaCa-2 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
MCF10A Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
HCT116 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
IGROV-1 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
SW620 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
HCT115 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
U251 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
OVCAR-8 Growth Inhibition Assay 0.3 µM 8 d sensitizes the cell lines to 23548269
MV-4-11 Apoptosis Assay 100-700 nM 48 h induces apoptosis dose dependently 23536721
U937 Apoptosis Assay 100-700 nM 48 h induces apoptosis dose dependently 23536721
MOLM-13  Apoptosis Assay 100-700 nM 48 h induces apoptosis dose dependently 23536721
A2058  Cell Viability Assay 37.5-300 nM 72 h DMSO reduces the MK-1775 EC50 by 5-fold to an average of 45 nM 23148684
H2009 Cell Viability Assay 500 nM 72 h DMSO results in G1/S-phase accumulation combined with MK-1775 23148684
Su.86.86 Cell Viability Assay 500 nM 72 h DMSO results in G1/S-phase accumulation combined with MK-1775 23148684
HRE Cell Viability Assay 500 nM 72 h DMSO results in G1/S-phase accumulation combined with MK-1775 23148684
HMEC Cell Viability Assay 500 nM 72 h DMSO results in G1/S-phase accumulation combined with MK-1775 23148684
U2OS  Function Assay 2 µM 0-24 h induces phosphorylation of Chk1 at serine 345 at both concentrations as early as 2 h after administration 22937147
U2OS  Growth Inhibition Assay 0-10 µM 24/48 h inhibits cell growth dose dependently 22937147
U937 Function Assay 100-500 nM 4 h  decreases the cytarabine-induced Chk1 autophosphorylation at Ser296 and prevents Cdc25A downregulation 22869869
U937 Function Assay 100 nM 4 h  reverses the cytarabine-induced inhibition of 3H-thymidine incorporation into DNA 22869869
U937 Function Assay 100-500 nM 4 h  induces increased phosphorylation of H2AX 22869869
HL-60 Apoptosis Assay 30/100/300 nM 24 h DMSO enhances cytarabine-induced apoptosis 22869869
ML-1 Apoptosis Assay 25/50/100 nM 24 h DMSO enhances cytarabine-induced apoptosis 22869869
HCT116 Function Assay 1 µM 24 h abrogates of cell cycle arrest  22510560
U2OS Function Assay 1 µM 24 h abrogates of cell cycle arrest  22510560
Sf9 Function assay Inhibition of recombinant CDK2/Cyclin A expressed in insect Sf9 cells assessed as inhibition of [33P]-ATP incorporation into biotinylated histone H1 after 1 hr by liquid scintillation counting, IC50 = 0.16 μM. 21094607
Klicken Sie hier, um weitere experimentelle Daten zu Zelllinien anzuzeigen

Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Molekulargewicht 376.25 Formel

C15H18BrN7

 Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)
CAS-Nr. 891494-63-6 SDF herunterladen Lagerung von Stammlösungen

Synonyme N/A Smiles CN1C=C(C=N1)C2=C3N=C(C(=C(N3N=C2)N)Br)C4CCCNC4

Löslichkeit

In vitro
Charge:

DMSO : 75 mg/mL (199.33 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse Konzentration Volumen Molekulargewicht
Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo
Charge:

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

mg/kg g μL

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH2O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus

Targets/IC50/Ki
Chk1
(Cell-free assay)
3 nM
CDK2
(Cell-free assay)
0.16 μM
In vitro

MK-8776 (SCH 900776) ist ein weniger potenter Inhibitor von Chk2 und CDK2 mit einer IC50 von 1,5 μM bzw. 0,16 μM. Es zeigt keine signifikante Hemmung der Cytochrom P450 humanen Lebermikrosomenisoformen 1A2, 2C9, 2C19, 2D6 und 3A4. In Kombination mit einem Antimetaboliten induziert diese Verbindung innerhalb von 2 Stunden die Akkumulation von γ-H2AX, was auf einen Kollaps der Replikationsgabel und Doppelstrang-DNA-Brüche hindeutet. Zusätzlich unterdrückt es die Akkumulation der Chk1 pS296 Autophosphorylierung dosisabhängig. Die Exposition proliferierender WS1-Zellen gegenüber SCH 900776 ist mit einer schnellen, dosisabhängigen Akkumulation von Chk1 pS345 verbunden, was darauf hindeutet, dass zyklische Populationen normaler Zellen nach Exposition gegenüber Chk1 pS345 als Teil eines nutzlosen Zyklus, möglicherweise angetrieben durch AT-Familienkinasen und DNA-PK, induzieren.
Kinase-Assay
Chk1 SPA-Assay
Ein In-vitro-Assay unter Verwendung von rekombinantem His-Chk1, das im Baculovirus-Expressionssystem als Enzymquelle exprimiert wurde, und einem biotinylierten Peptid auf Basis von CDC25C als Substrat. His-Chk1 wird in Kinasepuffer, der 50 mM Tris pH 8,0, 10 mM MgCl2 und 1 mM DTT enthält, auf 32 nM verdünnt. CDC25C (CDC25 Ser216 C-terminal biotinyliertes Peptid)-Peptid wird in Kinasepuffer auf 1,93 μM verdünnt. Für jede Kinase-Reaktion werden 20 μL einer 32 nM Chk1-Enzymlösung und 20 μL von 1,926 μM CDC25C gemischt und mit 10 μL MK-8776 (SCH 900776), verdünnt in 10 % DMSO, kombiniert, wodurch nach Zugabe der Startlösung Endkonzentrationen von 6,2 nM Chk1, 385 nM CDC25C und 1 % DMSO entstehen. Die Reaktion wird durch Zugabe von 50 μL Startlösung, bestehend aus 2 μM ATP und 0,2 μCi 33P-ATP, gestartet, wodurch eine Endkonzentration von 1 μM ATP mit 0,2 μCi 33P-ATP pro Reaktion erreicht wird. Die Kinase-Reaktionen laufen 2 Stunden bei Raumtemperatur und werden durch Zugabe von 100 μL Stopplösung, bestehend aus 2 M NaCl, 1 % H3PO4 und 5 mg/mL Streptavidin-beschichteten SPA-Beads, gestoppt. Die SPA-Beads werden mit einer 96-Well-GF/B-Filterplatte und einem Filtermate Universal-Harvester gesammelt. Die Beads werden zweimal mit 2 M NaCl und zweimal mit 2 M NaCl mit 1 % Phosphorsäure gewaschen. Das Signal wird anschließend mit einem TopCount 96-Well-Flüssigszintillationszähler gemessen. Dosis-Wirkungs-Kurven werden aus doppelten 8-Punkt-Serienverdünnungen dieser Verbindung erstellt. Die IC50-Werte werden durch nichtlineare Regressionsanalyse abgeleitet.
In vivo

Eine Dosissteigerung von MK-8776 (SCH 900776) (16 mg/kg und 32 mg/kg) führt zu inkrementellen Verbesserungen des Tumoransprechens. Wichtig ist, dass Dosen dieser Verbindung, die mit einer robusten Biomarkeraktivierung und einem verbesserten Tumoransprechen einhergehen, nicht mit einer erhöhten Toxizität auf hämatologische Parameter bei BALB/c-Mäusen verbunden sind.

Literatur
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34267371/

Anwendungen

Methoden Biomarker Bilder PMID
Western blot Cyclin E / pY15-CDK / γH2AX p-chk1(ser345) / CDC25A
S2735-WB2
26595527

Klinische Studieninformationen

(Daten von https://clinicaltrials.gov, aktualisiert am 2024-05-22)

NCT-Nummer Rekrutierung Erkrankungen Sponsor/Kooperationspartner Startdatum Phasen
NCT00779584 Completed
Hodgkin Disease|Lymphoma Non-Hodgkin|Neoplasms
Merck Sharp & Dohme LLC
 October 17 2008 Phase 1

Technischer Support

Handhabungshinweise

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Wenn Sie weitere Fragen haben, hinterlassen Sie bitte eine Nachricht.

Bitte geben Sie Ihren Namen ein.
Bitte geben Sie Ihre E-Mail-Adresse ein. Bitte geben Sie eine gültige E-Mail-Adresse ein.
Bitte schreiben Sie uns etwas.

Häufig gestellte Fragen

Frage 1:
I would like to know whether your product S2735 is the optically pure R enantiomer or whether it is a racemic mix.

Antwort:
It is the R enantiomer of our S2735.