Name: Hesperadin
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S1529
Rating: 5 (52 reviews)

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Qualitätskontrolle

Charge: Reinheit: 99.09%

99.09

Verwandte Ziele	CDK HSP PD-1/PD-L1 ROCK Wee1 DNA/RNA Synthesis Microtubule Associated Ras KRas Casein Kinase
Weitere Aurora Kinase Inhibitoren	Barasertib-HQPA (AZD2811) Alisertib (MLN8237) Tozasertib (VX-680) ZM 447439 MLN8054 Danusertib (PHA-739358) MK-5108 TCS7010 (Aurora A Inhibitor I) AMG-900 PHA-680632

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration

Zelllinien	Assay-Typ	Konzentration	Inkubationszeit	Formulierung	Aktivitätsbeschreibung	PMID
HepG2 cells	Cytotoxicity assay		48 h		Cytotoxicity against human HepG2 cells after 48 hrs by MTT assay, TC50=0.2 μM
Klicken Sie hier, um weitere experimentelle Daten zu Zelllinien anzuzeigen

Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Molekulargewicht	516.65	Formel	C₂₉H₃₂N₄O₃S	Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)	3 Jahre-20°CPulver
CAS-Nr.	422513-13-1	SDF herunterladen		Lagerung von Stammlösungen	1 Jahr-80°Cin Lösungsmittel 1 Monat-20°Cin Lösungsmittel
Synonyme	N/A			Smiles	CCS(=O)(=O)NC1=CC2=C(C=C1)NC(=C2C(=NC3=CC=C(C=C3)CN4CCCCC4)C5=CC=CC=C5)O

Löslichkeit

In vitro
Charge:

DMSO : 100 mg/mL (193.55 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

DMSO : 103 mg/mL (199.36 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 1 mg/mL

Water : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse	Konzentration	Volumen	Molekulargewicht
=	×	×

Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo Charge:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	2.500mg/ml (4.84mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 50 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to make it clear; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

Dosierung: mg/kg Durchschnittsgewicht der Tiere: g Dosiervolumen pro Tier:μL Anzahl der Tiere:

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH₂O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus

Targets/IC₅₀/Ki	TbAUK1 (Cell-free assay) 40 nM Aurora B (human) (Cell-free assay) 250 nM
In vitro	Hesperadin hemmt die Fähigkeit von immunpräzipitiertem Aurora B, Histon H3 mit einer IC50 von 250 nM zu phosphorylieren, und reduziert die Aktivität anderer Kinasen (AMPK, Lck, MKK1, MAPKAP-K1, CHK1 und PHK) bei einer Konzentration von 1 μM deutlich. Im Gegensatz dazu sind nur 20-100 nM dieser Verbindung ausreichend, um den Verlust der mitotischen Histon H3-Ser10-Phosphorylierung in HeLa-Zellen zu induzieren. Die Behandlung damit führt zu Defekten in der Mitose und Zytokinese, was zum Stillstand der Proliferation von HeLa-Zellen und zur Polyploidisierung führt, die spezifisch auf die Hemmung der Aurora B-Funktion während des Chromosomenanheftungsprozesses zurückzuführen ist. Diese Verbindung (100 nM) überwindet schnell den durch Taxol oder Monastrol induzierten mitotischen Arrest, jedoch nicht den durch Nocodazol. Die Behandlung mit ihr und Nocodazol in HeLa-Zellen hebt die Kinetochorlokalisation von BubR1 auf und verringert die Intensität von Bub1 an den Kinetochoren, was darauf hindeutet, dass die Aurora B-Funktion für die effiziente Kinetochor-Rekrutierung von BubR1 und Bub1 erforderlich ist, was wiederum für eine verlängerte Checkpoint-Signalgebung notwendig sein könnte. Es verhindert die Phosphorylierung von rekombinantem Trypanosomen-Histon H3 durch die T. brucei Aurora kinase-1 (TbAUK1) aus pathogenen Trypanosoma brucei mit einer IC50 von 40 nM in In-vitro-Kinase-Assays. Diese Chemikalie hemmt das Zellwachstum von kultivierten infektiösen Blutstromformen (BF) signifikant mit einer IC50 von 48 nM und hemmt das Zellwachstum von Insektenstadium-Prozyklischen Formen (PF) nur schwach mit einer IC50 von 550 nM.
Kinase-Assay	Der Aurora B-Kinase-Assay
Kinase-Assay	Für den Aurora B-Kinase-Assay werden HeLa-Zellen in einem Puffer, der 50 mM NaCl enthält, lysiert. Der Gesamtzellextrakt wird 20 Minuten lang bei 13.000 U/min und 4 °C in einer Tischzentrifuge zentrifugiert. Der aus 200 mg Gesamtzellextrakt gewonnene Pellet wird erneut in 15 ml Lysepuffer, der 250 mM NaCl enthält, extrahiert, um aktive Aurora B-Kinase aus mitotischem Chromatin zu erhalten. Der Niedriggeschwindigkeitsüberstand des letzteren Extrakts wird für die Immunpräzipitation verwendet. Monoklonales Maus-Anti-AIM-1 oder Maus-Anti-HA wird an GammaBind Plus Sepharose gekoppelt, und die Beads werden 90 Minuten lang bei 4 °C in dem Extrakt über Kopf gedreht. Die Beads werden gewaschen, aliquotiert und in Kinasepuffer (20 mM Tris, pH 7,5, 150 mM NaCl, 10 mM MgCl₂, 1 mM DTT, 10 mM NaF) gewaschen. Der Kinase-Assay wird mit 10 μL Beads in 20 μL Kinasepuffer, der 5 μg Histon H3, 10 μM ATP, 2,5 μCi [γ-³²P]ATP und verschiedene Konzentrationen dieser Verbindung enthält, 20 Minuten lang bei 37 °C durchgeführt. SDS-Probenpuffer wird hinzugefügt, und die Proben werden gekocht und mittels SDS-PAGE aufgetrennt. Das Gel wird getrocknet, und das radioaktive Signal wird mittels PhosphorImager-Analyse detektiert. Die Daten werden mit der ImageQuant-Software analysiert.
Literatur	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12707311/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19320832/

Anwendungen

Methoden	Biomarker	Bilder	PMID
Western blot	trypanosome histone H3		19320832

Technischer Support

Handhabungshinweise

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Wenn Sie weitere Fragen haben, hinterlassen Sie bitte eine Nachricht.

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C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
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C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

Hesperadin Aurora B Inhibitor

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 516.65