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MK-5108 Aurora Kinase Inhibitor

Kat.-Nr.: S2770

MK-5108 (VX-689) ist ein hochselektiver Aurora A-Inhibitor mit einer IC50 von 0,064 nM in einem zellfreien Assay und ist 220- und 190-fach selektiver für Aurora A als für Aurora B/C, während er TrkA mit weniger als 100-facher Selektivität hemmt. Diese Verbindung induziert Autophagy. Phase 1.
MK-5108 Aurora Kinase Inhibitor Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 461.94

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Qualitätskontrolle (Quality Control)

Charge: Reinheit: 99.17%
99.17

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Zelllinien Assay-Typ Konzentration Inkubationszeit Formulierung Aktivitätsbeschreibung PMID
BL21 (DE3) Rosetta Function assay 30 mins Inhibition of His-tagged human Aurora A kinase (122 to 40 residues) expressed in Escherichia coli BL21 (DE3) Rosetta cells using biotinylated STK2 substrate incubated for 30 mins by HTRF assay, IC50 = 0.000064 μM. 27391133
HeLa Kyoto Function assay 20 hrs Inhibition of Aurora A kinase autophosphorylation at Thr288 in human HeLa Kyoto cells incubated for 20 hrs, IC50 = 0.3 μM. 27391133
HCC1143 Antiproliferation assay Antiproliferation activity against human HCC1143 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.42 μM. 28918096
AU565 Antiproliferation assay Antiproliferation activity against human AU565 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.45 μM. 28918096
MCF7 Antiproliferation assay Antiproliferation activity against human MCF7 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.52 μM. 28918096
HCC1806 Antiproliferation assay Antiproliferation activity against human HCC1806 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.56 μM. 28918096
CAL851 Antiproliferation assay Antiproliferation activity against human CAL851 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.74 μM. 28918096
HeLa Function assay 16 mg/kg 2 days Plasma concentration in F344/N Jcl-rnu rat xenografted with luciferase expressing human HeLa cells at 16 mg/kg, po BID for 2 days, Cp = 1.7 μM. 28918096
HeLa Function assay 32 mg/kg 2 days Plasma concentration in F344/N Jcl-rnu rat xenografted with luciferase expressing human HeLa cells at 32 mg/kg, po BID for 2 days, Cp = 4.4 μM. 28918096
Saos-2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells 29435139
MG 63 (6-TG R) qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells 29435139
OHS-50 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
BL21-Codon-Plus(DE3)-RIL Function assay 120 mins Inhibition of human N-terminal His-tagged Aurora A expressed in Escherichia coli BL21-Codon-Plus(DE3)-RIL cells using 5-carboxy-fluorescein-y-aminobutyric acid-Ala-Leu-Arg-Arg-Ala-Ser-Leu-Gly-NH2 as substrate after 120 mins by fluorescence polarization as, IC50 = 0.00054 μM. ChEMBL
HeLaS3 Cytotoxicity assay 3 days Cytotoxicity against human HeLaS3 cells assessed as cell growth inhibition after 3 days by WST-8 assay, IC50 = 1.26 μM. ChEMBL
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Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität (Chemical Information, Storage & Stability)

Molekulargewicht 461.94 Formel

C22H21ClFN3O3S

 Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)
CAS-Nr. 1010085-13-8 SDF herunterladen Lagerung von Stammlösungen

Synonyme VX-689 Smiles C1CC(CCC1OC2=C(C(=CC=C2)Cl)F)(CC3=NC(=CC=C3)NC4=NC=CS4)C(=O)O

Löslichkeit (Solubility)

In vitro
Charge:

DMSO : 92 mg/mL (199.16 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse Konzentration Volumen Molekulargewicht
Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo
Charge:

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

mg/kg g μL

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH2O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
Aurora A
(Cell-free assay)
0.064 nM
In vitro

MK-5108 inhibits Aurora-A activity in an ATP-competitive manner. This compound shows robust selectivity against the other family kinases Aurora-B (220-fold) and Aurora-C (190-fold) in the biochemical assay. It also reveals high selectivity for Aurora-A over other protein kinases. The compound inhibits only one kinase (TrkA) with <100-fold selectivity. It may be more Aurora-A selective than MLN8054. Consistent with the induction of pHH3-positive cells, this chemical induces accumulation of cells in the G2-M phase. It inhibits the proliferation of tumor cells including HCC1143, AU565, MCF-7, HCC1806 and CAL85-1 with an IC50 of 0.42 μM, 0.45 μM, 0.52 μM, 0.56μM and 0.74 μM, respectively. This compound decreases cell viability in a dose-dependent fashion in all three cell lines including LEIO285, LEIO505 and SK-LSM1 cells with an IC50 of approximately 100 nM. Incubation with it in LEIO285 increases the proportion of cells in G2/M at 48 and 72 hours post-treatment. The compound significant increases in Caspase 3/7 activity when compared to DMSO-treated control cultures at both time points. In LEIO505 cells, it leads to more cells accumulating at G2/M phases at 24 hours but not 48 hours or 72 hours.  
Kinase-Assay
Biochemische Kinase-Assays
Rekombinantes His-getaggtes humanes Aurora-A-Protein wird in Escherichia coli exprimiert und mit einer HisTrap HP-Säule gereinigt. Gereinigtes rekombinantes humanes Aurora-B- und Aurora-C-Protein wird käuflich erworben. Experimente werden in Fünffachbestimmung in 96-Well-Platten durchgeführt. Die Aurora-A-Assay-Reaktion wird in Gegenwart von 20 μM ATP, 25 μM Tetra-Kemptide [RRR(GLRRASLG)4R-NH2], 1,0 μCi pro Well [γ-33P]-ATP, 0,1 ng pro Well Aurora-A in 50 mM Tris-HCl (pH 7,4), 15 mM Mg(OAc)2 und 0,2 mM EDTA bei 30 °C für 40 Minuten durchgeführt. Um den Hemmmodus von MK-5108 für Aurora-A zu untersuchen, werden die IC50-Werte dieser Verbindung in Gegenwart unterschiedlicher ATP-Konzentrationen bestimmt. Dann wird der IC50-Wert als Funktion der ATP-Konzentration aufgetragen, um den Effekt der ATP-Konzentration auf den IC50-Wert dieser Chemikalie zu analysieren. Die Aurora-B-Assay-Reaktion wird in Gegenwart von 15 μM ATP, 100 μM Kemptide (GLRRASLG-NH2), 1,0 μCi pro Well [γ-33P]-ATP, 5,0 ng pro Well Aurora-B in 50 mM Tris-HCl (pH 7,4), 15 mM Mg(OAc)2 und 0,2 mM EDTA bei 30 °C für 20 Minuten durchgeführt. Die Aurora-C-Assay-Reaktion wird in Gegenwart von 40 μM ATP, 100 μM Kemptide, 1,0 μCi pro Well [γ-33P]-ATP, 15 ng pro Well Aurora-C in 10 mM MOPS-NaOH (pH 7,4), 5 mM Mg(OAc)2, 1 mM (±) DTT und 1 mM EGTA bei 30 °C für 20 Minuten durchgeführt. Nach Beendigung der Kinase-Reaktionen durch Zugabe von 2,0 % Phosphorsäure werden Tetra-Kemptide oder Kemptide auf der MultiScreen-PH-Platte eingefangen. Die Wells werden fünfmal mit 0,64 % Phosphorsäure gewaschen und dann auf Radioaktivität in einem Flüssigkeitsszintillationszähler überwacht.
In vivo

MK-5108 induces pHH3-positive cells at doses of 16 mg/kg and 32 mg/kg. Plasma concentration of this compound at 8 mg/kg and 16 mg/kg are 1.7 μM and 4.4 μM, respectively. This compound treatment results in the induction of pHH3 in tumor and skin tissues, which starts at 2 hours and reachs a maximum at 4 hours. This chemical treatments at 15 mg/kg and 30 mg/kg results in significant tumor growth inhibition with the change in mean tumor volume for the treatment group as a percentage of the mean change in the control group (%T/C) of 10% and −6% at day 11, and 17% and 5% at day 18, respectively. It is well tolerated at both doses, with minimal reduction in body weight. This compound also exhibits significant antitumor activity through intermittent dosing in nude rats bearing SW48 tumors, it at 15 mg/kg and 45 mg/kg causes dose-dependent tumor growth inhibition with a %T/C of 35% and 7% at day 10, and 58% and 32% at day 27, respectively.

Literatur

Anwendungen (Applications)

Methoden Biomarker Bilder PMID
Western blot p-Aurora A / Aurora-A / N-MYC
S2770-WB1
29262328
Growth inhibition assay Cell viability
S2770-viability1
24756365

Klinische Studieninformationen (Clinical Trial Information)

(Daten von https://clinicaltrials.gov, aktualisiert am 2024-06-05)

NCT-Nummer Rekrutierung Erkrankungen Sponsor/Kooperationspartner Startdatum Phasen
NCT00543387 COMPLETED
Cancer, Neoplasms, Tumors
Merck Sharp & Dohme LLC
 2008-03-27 PHASE1