Home Apoptosis MDM2/MDMX Antagonist Nutlin-3

nur für Forschungszwecke

Nutlin-3 p53-MDM2 Inhibitor

Kat.-Nr.S1061

Nutlin-3 ist ein potenter und selektiver Mdm2 (RING-Finger-abhängige Ubiquitin-Protein-Ligase für sich selbst und p53) Antagonist mit einer IC50 von 90 nM in einem zellfreien Assay; stabilisiert p73 in p53-defizienten Zellen.
Nutlin-3 MDM2/MDMX Antagonist Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 581.5

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Qualitätskontrolle

Charge: Reinheit: 99.59%
99.59

Produkte, die oft zusammen verwendet werden mit Nutlin-3

Tozasertib (VX-680)

Combined with Tozasertib, this compound selectively kills p53-compromised cells and inhibits the proliferation of cells expressing wild-type p53.

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration

Zelllinien Assay-Typ Konzentration Inkubationszeit Formulierung Aktivitätsbeschreibung PMID
SMMC-7721  Function Assay 10 μM 36 h DMSO down-regulates the protein expression level of phospho-Ser392-p53 24286312
HuH-7 Apoptosis Assay 20 μM 48 h DMSO induces apoptosis 24286312
SMMC-7721  Apoptosis Assay 20 μM 48 h DMSO induces apoptosis 24286312
HuH-7 Cell Viability Assay 1.25-20 μM 24/48/72 h DMSO inhibits cell proliferation dose and time dependently 24286312
SMMC-7721  Cell Viability Assay 1.25-20 μM 24/48/72 h DMSO inhibits cell proliferation dose and time dependently 24286312
RKO Function Assay 20 μM 24 h induces HO-1 expression at the level of transcription 24366007
U2OS  Function Assay 20 μM 24 h induces HO-1 expression at the level of transcription 24366007
RKO Function Assay 20 μM 24 h increases the levels of the HO-1 protein as well as the p53 protein 24366007
U2OS  Function Assay 20 μM 24 h increases the levels of the HO-1 protein as well as the p53 protein 24366007
MOLM Function Assay 10 μM 24 h upregulates the SOCS-1 expression 24473562
OCI Function Assay 10 μM 24 h upregulates the SOCS-1 expression 24473562
BeWo Apoptosis Assay 30 µM 24 h increases apoptosis 24498154
BeWo Function Assay 30 µM 24 h increases p53, Mdm2, p21 and Puma at the protein level 24498154
MOML13 Function Assay 10μM 2/4 h increases the level of p53 24659749
AML3 Function Assay 10μM 2/4 h increases the level of p53 24659749
AML2 Function Assay 10μM 2/4 h increases the level of p53 24659749
MOML13 Apoptosis Assay 2/10 μM 24/48 h induces apoptosis 24659749
AML2 Apoptosis Assay 2/10 μM 24/48 h induces apoptosis 24659749
U2OS  Function Assay 20 μM 24 h increases the mRNA levels of BCL2A1, BCLXL andBCLW 24867259
Hep3B Apoptosis Assay induces apoptosis 24884809
Huh-7 Apoptosis Assay induces apoptosis 24884809
SMMC7721 Apoptosis Assay induces apoptosis 24884809
HepG2 Apoptosis Assay induces apoptosis 24884809
Hep3B Growth Inhibition Assay 72 h DMSO IC50=20.18 ± 1.84 μM 24884809
Huh-7 Growth Inhibition Assay 72 h DMSO IC50=33.96 ± 3.9 μM 24884809
SMMC7721/Ac Growth Inhibition Assay 72 h DMSO IC50=55.21 ± 5.03 μM 24884809
SMMC7721 Growth Inhibition Assay 72 h DMSO IC50=31.28 ± 4.2 μM 24884809
HepG2/As Growth Inhibition Assay 72 h DMSO IC50=68.13 ± 9.6 μM 24884809
HepG2 Growth Inhibition Assay 72 h DMSO IC50=35.86 ± 2.9 μM 24884809
MOLM-13 Function Assay 6 μM 6 h DMSO enhances the acetylation of histone H2B and heat shock proteins Hsp27 and Hsp90 24885082
MOLM-13 Function Assay 6 μM 0-8 h DMSO increases the levels of p53, MDM2, p21 and acetylated p53 24885082
115 Function Assay 5 μM 48 h DMSO induces p53-dependent senescence  25067787
A498 Function Assay 5 μM 48 h DMSO induces p53-dependent senescence  25067787
Caki-2 Function Assay 5 μM 48 h DMSO induces p53-dependent senescence  25067787
ACHN Function Assay 5 μM 48 h DMSO induces p53-dependent senescence  25067787
115 Growth Inhibition Assay 5 μM 48 h DMSO induces cell cycle arrest  25067787
A498 Growth Inhibition Assay 5 μM 48 h DMSO induces cell cycle arrest  25067787
Caki-2 Growth Inhibition Assay 5 μM 48 h DMSO induces cell cycle arrest  25067787
ACHN Growth Inhibition Assay 5 μM 48 h DMSO induces cell cycle arrest  25067787
115 Function Assay 0.5/1/5 μM 48 h DMSO leads to increased expression of p53 and some p53 target genes: MDM2, and p21 25067787
A498 Function Assay 0.5/1/5 μM 48 h DMSO leads to increased expression of p53 and some p53 target genes: MDM2, and p21 25067787
Caki-2 Function Assay 0.5/1/5 μM 48 h DMSO leads to increased expression of p53 and some p53 target genes: MDM2, and p21 25067787
ACHN Function Assay 0.5/1/5 μM 48 h DMSO leads to increased expression of p53 and some p53 target genes: MDM2, and p21 25067787
117 Cell Viability Assay 0.5-10 μM 0-6 d DMSO inhibits proliferation in a dose-dependent manner 25067787
115 Cell Viability Assay 0.5-10 μM 0-6 d DMSO inhibits proliferation in a dose-dependent manner 25067787
A498 Cell Viability Assay 0.5-10 μM 0-6 d DMSO inhibits proliferation in a dose-dependent manner 25067787
Caki-2 Cell Viability Assay 0.5-10 μM 0-6 d DMSO inhibits proliferation in a dose-dependent manner 25067787
ACHN Cell Viability Assay 0.5-10 μM 0-6 d DMSO inhibits proliferation in a dose-dependent manner 25067787
MCF7  Function Assay 2.5 µM 48 h DMSO decreases the homologous DSB repair frequencies 25085902
MCF7  Cell Viability Assay 2.5 µM 5 d DMSO sensitizes MCF7 to PARP inhibition 25085902
RAW 264.7 Function Assay 10 μM 30 min inhibits LPS-induced NO production  25172547
RAW 264.7 Function Assay 10 μM 30 min reduces the LPS-augmented the NF-κB luciferase reporter gene activity 25172547
RAW 264.7 Function Assay 10 μM 30 min prevents the p53 reduction in response to LPS 25172547
SUM102PT Function Assay 10 μM 24 h DMSO inhibits TGF-β3-induced EPHB2 mRNA and protein expression 25257729
SK-BR-7 Function Assay 10 μM 24 h DMSO inhibits TGF-β3-induced EPHB2 mRNA and protein expression 25257729
MCF-10CA1a Function Assay 10 μM 24 h DMSO inhibits TGF-β3-induced EPHB2 mRNA and protein expression 25257729
MCF-10CA1a Function Assay 10 μM 24 h DMSO decreases the TGF-β3-induced mRNA levels ofMMP2, MMP9, and integrin β 3 25257729
MCF-10A1  Function Assay 10 μM 24/48 h DMSO inhibits migration of normal breast epithelial  25257729
MCF-10CA1a Function Assay 10 μM 48 h DMSO inhibits basal invasion and reduced TGF-β3-induced invasion to basal levels 25257729
HCT116  Function Assay 10 µM 24 h causes a p53-dependent tetraploid G1-arrest in diploid HCT116 clones D3 and D8 25380055
A2780 Function Assay 10 μM 21h  DMSO decreases the FoxM1 levels 25426548
NCI-H23 Function Assay 10 μM 21h  DMSO decreases the FoxM1 levels 25426548
A2780 Function Assay 10 μM 21h  DMSO increases p53 protein levels 25426548
NCI-H23 Function Assay 10 μM 21h  DMSO increases p53 protein levels 25426548
OVCAR10 Function Assay 10 μM 21h  DMSO increases p53 protein levels 25426548
MCF-7 Function Assay 10 μM 0-24 h induces p53 and p21/Cip1 25482373
SMMC-7721 Function Assay 10 μM 36 h DMSO causes the ectopic expression of IFI16 25544361
SMMC-7721 Function Assay 10 μM 48 h DMSO increases the expression level of IFNB1 mRNA 25544361
SMMC-7721 Function Assay 10 μM 48 h DMSO induces the chromatin-bound protein IFI16 to partially localize in the cytoplasm  25544361
SMMC-7721 Function Assay 10 μM 48 h DMSO causes DNA DSB damage 25544361
DU4475  Function Assay 5/10/20 μM 24 h downregulates Toca-1 dose dependently 25547174
MCF-7  Function Assay 10 μM DMSO inhibits cyclin D1 and Dicer  25702703
C2C12 Growth Inhibition Assay 10 μM  24/48/72 h DMSO inhibits cells proliferation and differentiation 25871794
L6 Growth Inhibition Assay 10 μM  24/48/72 h DMSO inhibits cells proliferation and differentiation 25871794
CRL-5908 Growth Inhibition Assay 24 h IC50=38.71 ± 2.43 μM 26125230
A549-920 Growth Inhibition Assay 24 h IC50=33.85 ± 4.84 μM 26125230
A549-NTC Growth Inhibition Assay 24 h IC50=19.42 ± 1.96 μM 26125230
A549 Growth Inhibition Assay 24 h IC50=17.68 ± 4.52 μM 26125230
C666-1 Apoptosis Assay 10 µM 48/72 h DMSO sensitizes C666-1 cells to cisplatin-induced apoptosis 26252575
C666-1  Function Assay 10 µM 24 h DMSO activates the p53 pathway, upregulating p53, p21 and Mdm2 26252575
C666-1 Cell Viability Assay 10 µM 48 h DMSO sensitizes C666-1 cells to the cytotoxic effect of cisplatin 26252575
C666-1 Growth Inhibition Assay IC50=19.95±8.93 μM 26252575
NP460 Growth Inhibition Assay IC50=22.85±1.18 μM 26252575
NP69 Growth Inhibition Assay IC50=31.69±2.54 μM 26252575
MCF7 Growth Inhibition Assay 5 μM 48 h blocks 27-OHC-induced cell proliferation comparable to that of basal levels 26350565
HuH-7 Function Assay 10 μM 36 h DMSO down-regulates the protein expression level of phospho-Ser392-p53 24286312
AT2 Function Assay 5/10 μM leads to a substantial accumulation of the p53 protein as well as the expression of its direct targets p21, MDM2 and the pro-apoptotic BAX and PUMA proteins  24240203
REH Function Assay 5/10 μM leads to a substantial accumulation of the p53 protein as well as the expression of its direct targets p21, MDM2 and the pro-apoptotic BAX and PUMA proteins  24240203
UoCB6 Function Assay 5/10 μM leads to a substantial accumulation of the p53 protein as well as the expression of its direct targets p21, MDM2 and the pro-apoptotic BAX and PUMA proteins  24240203
AT2 Cell Viability Assay 0-25 μM inhibits cell viability dose dependently 24240203
REH Cell Viability Assay 0-25 μM inhibits cell viability dose dependently 24240203
UoCB6 Cell Viability Assay 0-25 μM inhibits cell viability dose dependently 24240203
A2780 Function Assay 5/10/20 μM 24 h upregulates p53, MDM2, p21 and DR5 protein levels dose dependently  24136147
H460 Function Assay 5/10/20 μM 24 h upregulates p53, MDM2, p21 and DR5 protein levels dose dependently  24136147
Lovo  Function Assay 5/10/20 μM 24 h upregulates p53, MDM2, p21 and DR5 protein levels dose dependently  24136147
A2780 Apoptosis Assay 5/10/20 μM 24 h enhances apoptosis induction by D269H/E195R over rhTRAIL 24136147
H460 Apoptosis Assay 5/10/20 μM 24 h enhances apoptosis induction by D269H/E195R over rhTRAIL 24136147
Lovo  Apoptosis Assay 5/10/20 μM 24 h enhances apoptosis induction by D269H/E195R over rhTRAIL 24136147
U87MG Function assay 10 mins Binding affinity to MDM2 in human U87MG cells assessed as inhibition of MDM2/p53 protein interaction after 10 mins by quantitative sandwich immuno assay, IC50 = 0.1045 μM. 27050782
U87MG Antiproliferative assay 48 hrs Antiproliferative activity against human U87MG cells expressing wild type p53 after 48 hrs by MTS assay, IC50 = 6.5 μM. 27050782
U343MG Antiproliferative assay 48 hrs Antiproliferative activity against human U343MG cells expressing wild type p53 after 48 hrs by MTS assay, IC50 = 12.6 μM. 27050782
SW620 Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human SW620 cells after 72 hrs by SRB assay, IC50 = 0.38 μM. ChEMBL
A549 Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human A549 cells after 72 hrs by SRB assay, IC50 = 0.41 μM. ChEMBL
SJSA1 Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human SJSA1 cells after 72 hrs by SRB assay, IC50 = 1.81 μM. ChEMBL
HCT116 Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human HCT116 cells after 72 hrs by SRB assay, IC50 = 4.63 μM. ChEMBL
PC3 Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human PC3 cells after 72 hrs by SRB assay, IC50 = 6.37 μM. ChEMBL
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Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Molekulargewicht 581.5 Formel

C30H30Cl2N4O4

 Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)
CAS-Nr. 890090-75-2 SDF herunterladen Lagerung von Stammlösungen

Synonyme N/A Smiles CC(C)OC1=C(C=CC(=C1)OC)C2=NC(C(N2C(=O)N3CCNC(=O)C3)C4=CC=C(C=C4)Cl)C5=CC=C(C=C5)Cl

Löslichkeit

In vitro
Charge:

DMSO : 100 mg/mL (171.96 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 100 mg/mL

Water : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse Konzentration Volumen Molekulargewicht
Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo
Charge:

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

mg/kg g μL

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH2O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus

Targets/IC50/Ki
MDM2
(Cell-free assay)
180 nM
In vitro

Nutlin-3 hemmt potent die MDM2-p53-Interaktion, was zur Aktivierung des p53-Signalwegs führt. Diese Verbindung induziert die Expression von MDM2 und p21 und zeigt eine potente antiproliferative Aktivität mit einer IC50 von ~1,5 μM, ausschließlich in Zellen mit Wildtyp-p53 wie HCT116, RKO und SJSA-1, aber nicht in den p53-Mutantenzelllinien SW480 und MDA-MB-435. In SJSA-1-Zellen induziert diese Verbindung bei 10 μM über 48 Stunden signifikant eine Caspase-abhängige Zell-Apoptosis um ~45 %. Obwohl sie auch das Wachstum und die Lebensfähigkeit der menschlichen Haut (1043SK) und des Mausembryos (NIH/3T3) mit IC50-Werten von 2,2 μM bzw. 1,3 μM hemmt, bleiben die Zellen 1 Woche nach der Behandlung selbst bei 10 μM dieser Chemikalie lebensfähig, im Gegensatz zu den SJSA-1-Zellen, bei denen die Lebensfähigkeit bei 3 μM dieser Chemikalie verloren geht. Sie induziert keine Phosphorylierung von p53 an wichtigen Serinresten und zeigt keinen Unterschied in ihrer sequenzspezifischen DNA-Bindung und Fähigkeit, p53-Zielgene zu transaktivieren, im Vergleich zu phosphoryliertem p53, das durch die genotoxischen Medikamente Doxorubicin induziert wird, was zeigt, dass die Phosphorylierung von p53 an wichtigen Serinen für die transkriptionelle Aktivierung und Apoptosis entbehrlich ist. Obwohl sie MDMX weniger effizient bindet als MDM2, kann diese Verbindung die MDMX–p53-Interaktion blockieren und den p53-Signalweg in Retinoblastomzellen (Weri1) mit einer IC50 von 0,7 μM induzieren. Diese Chemikalie stört bei 30 μM auch die endogene p73-HDM2-Interaktion und verbessert die Stabilität und proapoptotische Aktivitäten von p73, was zu einer dosisabhängigen Zellwachstumshemmung und Apoptosis-Induktion in Zellen ohne Wildtyp-p53 führt.

Kinase-Assay
Biacore-Studie
Kompetitionsassay wird auf einem Biacore S51 durchgeführt. Ein Series S Sensorchip CM5 wird für die Immobilisierung eines PentaHis-Antikörpers zur Erfassung des His-markierten p53 verwendet. Die Erfassungsrate beträgt ~200 Responseeinheiten (1 Responseeinheit entspricht 1 pg Protein pro mm2). Die Konzentration des MDM2-Proteins wird konstant bei 300 nM gehalten. Nutlin-3 wird in DMSO bei 10 mM gelöst und weiter verdünnt, um eine Konzentrationsreihe dieser Verbindung in jeder MDM2-Testprobe herzustellen. Der Assay wird bei 25 °C in Laufpuffer (10 mM Hepes, 0,15 M NaCl, 2 % DMSO) durchgeführt. Die MDM2-p53-Bindung in Anwesenheit dieser Chemikalie wird als Prozentsatz der Bindung in Abwesenheit davon berechnet und die IC50 wird berechnet.
In vivo

Die orale Verabreichung von Nutlin-3 bei 200 mg/kg zweimal täglich für 3 Wochen hemmt das Tumorwachstum von SJAS-1-Xenotransplantaten signifikant um 90 %, vergleichbar mit dem Effekt der Doxorubicin-Behandlung mit 81 % Hemmung des Tumorwachstums.

Literatur
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17700533/
  • [5] http://eprints.lib.hokudai.ac.jp/dspace/bitstream/2115/54893/1/Masaki_Miyazaki.pdf

Anwendungen

Methoden Biomarker Bilder PMID
Western blot MDM2 / p53 / ALKBH2 / p21 / PUMA RRM1 / RRM2 / p53R2 / p21 / p53 / pS6 / S6
S1061-WB1
23258843
Immunofluorescence Lamin A / Lamin C / p16 / H3K9me3 Merlin / cyclin D1 / p53 / MDM2 p53
S1061-IF1
30728349
Growth inhibition assay Cell viability
S1061-viability1
29286113

Technischer Support

Handhabungshinweise

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

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Häufig gestellte Fragen

Frage 1:
Is this a racemic mixture of its enantiomers or just the Nutlin-3a enantiomer?

Antwort:
It is a racemate.