Name: EPZ004777
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7353
Rating: 5 (32 reviews)

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Qualitätskontrolle

Charge: Reinheit: 99.09%

99.09

Verwandte Ziele	HDAC JAK BET PKC PARP HIF PRMT EZH2 AMPK Histone Acetyltransferase
Weitere Histone Methyltransferase Inhibitoren	Pinometostat (EPZ5676) 3-Deazaneplanocin A (DZNep) Hydrochloride BIX-01294 trihydrochloride UNC1999 EPZ015666 (GSK3235025) MM-102 (HMTase Inhibitor IX) Chaetocin SGC 0946 EPZ005687 UNC0638

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration

Zelllinien	Assay-Typ	Inkubationszeit	Aktivitätsbeschreibung	PMID
MOLM13	Antiproliferative assay		Antiproliferative activity against human MOLM13 cells containing MLL-AF9, EC50=0.004μM.	23879463
MV4-11	Antiproliferative assay		Antiproliferative activity against human MV4-11 cells containing MLL-AF4, EC50=0.004μM.	23879463
THP1	Antiproliferative assay		Antiproliferative activity against human THP1 cells containing MLL-AF9, EC50=0.004μM.	23879463
MCF10A	Function assay		Inhibition of DOT1L in human MCF10A cells assessed as reduction of H3K79 level, IC50=0.084μM.	25406853
MLL	Function assay		Inhibition of Meis1 gene expression in human MLL cells, EC50=0.7μM.	23879463
MLL	Function assay		Inhibition of Hoxa9 gene expression in human MLL cells, EC50=0.7μM.	23879463
Sf9	Function assay		Inhibition of human full length PRMT7 expressed in Sf9 cells, IC50=7.5μM.	25893041
BHK	Antiviral assay	8 days	Antiviral activity against Zika virus SMGC infected in BHK cells assessed as inhibition of virus induced cytopathic effect after 8 days by CellTiter-Glo luminescent cell viability assay, IC50=35.19μM.	30170321
MV4-11	Function assay	6 days	Inhibition of DOT1L in human MV4-11 cells assessed as downregulation of HOXA9/MEIS1 mRNA expression after 6 days by real-time PCR analysis, IC50=0.7μM.	ChEMBL
MOLM13	Function assay	6 days	Inhibition of DOT1L in human MOLM13 cells assessed as downregulation of HOXA9/MEIS1 mRNA expression after 6 days by real-time PCR analysis, IC50=0.7μM.	ChEMBL
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Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität

Molekulargewicht	539.67	Formel	C₂₈H₄₁N₇O₄	Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)	3 Jahre-20°CPulver
CAS-Nr.	1338466-77-5	SDF herunterladen		Lagerung von Stammlösungen	1 Jahr-80°Cin Lösungsmittel 1 Monat-20°Cin Lösungsmittel
Synonyme	N/A			Smiles	CC(C)N(CCCNC(=O)NC1=CC=C(C=C1)C(C)(C)C)CC2C(C(C(O2)N3C=CC4=C(N=CN=C43)N)O)O

Löslichkeit

In vitro
Charge:

DMSO : 100 mg/mL (185.29 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 100 mg/mL

Water : Insoluble

DMSO : 50 mg/mL (92.64 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 7 mg/mL

Water : Insoluble

DMSO : 100 mg/mL (185.29 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 100 mg/mL

Water : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse	Konzentration	Volumen	Molekulargewicht
=	×	×

Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo Charge:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 Corn oil Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	5.000mg/ml (9.26mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	5.000mg/ml (9.26mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to make it clear; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

Dosierung: mg/kg Durchschnittsgewicht der Tiere: g Dosiervolumen pro Tier:μL Anzahl der Tiere:

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH₂O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus

Targets/IC₅₀/Ki	DOT1L (Cell-free assay) 0.4 nM
In vitro	EPZ004777 hemmt selektiv die zelluläre H3K79-Methylierung und die Expression wichtiger MLL-Fusionszielgene. Nach der DOT1L-Hemmung hemmt diese Verbindung selektiv die Proliferation von MLL-Rearranged-Zelllinien und MLL-AF9-transformierten murinen hämatopoetischen Zellen. Darüber hinaus induziert sie Differenzierung und Apoptose in MLL-rearrangierten Zellen. Diese Chemikalie hemmt selektiv die Proliferation von MLL–AF10- und CALM–AF10-transformierten murinen Knochenmarkzellen. Die DOT1L-Hemmung durch dieses Mittel führt zu einer signifikant verringerten Proliferation, einer verringerten Expression von MLL-AF6-Zielgenen und einem Zellzyklusarrest von MLL-AF6-transformierten Zellen.
Kinase-Assay	Bestimmung der Inhibitor-IC50-Werte
Kinase-Assay	EPZ004777 wird in DMSO 3-fach seriell verdünnt, für insgesamt zehn Konzentrationen, beginnend bei 1 mM. Ein 1 μL Aliquot jeder Inhibitorverdünnung wird in eine 384-Well-Mikrotiterplatte gegeben. Die 100%ige Hemmkontrolle bestand aus einer Endkonzentration von 2,5 mM des Produkthemmers S-Adenosyl-L-Homocystein (SAH). Diese Verbindung wird 30 Minuten lang mit 40 ml pro Well 0,25 nM DOT1L(1-416) in Assaypuffer (20 mM TRIS [pH 8.0] 10 mM NaCl, 0.002% Tween 20, 0.005% Bovine Skin Gelatin, 100 mM KCl und 0.5 mM DTT) inkubiert. 10 ml pro Well Substratmischung, bestehend aus Assaypuffer mit 200 nM ³H-SAM (American Radiolabeled Chemicals: 80 Ci/mmol), 600 nM unmarkiertem SAM und 20 nM Nukleosomen, werden hinzugefügt, um die Reaktion zu initiieren (beide Substrate sind in der endgültigen Reaktionsmischung zu ihren jeweiligen KM-Werten vorhanden). Die Reaktionen werden 120 Minuten lang inkubiert und mit 10 ml pro Well 800 mM SAM gequencht. Der Einbau von Radioaktivität in das Nukleosomsubstrat wird in einer Flashplate gemessen. IC50-Werte für Enzyme im Histone Methyltransferase-Panel werden unter ähnlichen ausgewogenen Assaybedingungen bestimmt, wobei sowohl SAM als auch Protein-/Peptidsubstrat in Konzentrationen vorliegen, die ihren jeweiligen KM-Werten entsprechen.
In vivo	EPZ004777 erzeugt eine potente Antitumorwirksamkeit und erhöht die mediane Überlebenszeit in einem Maus-Xenograft-Modell der MLL-Leukämie signifikant.
Literatur	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21741596/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23138183/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23361907/

Anwendungen

Methoden	Biomarker	Bilder	PMID
Western blot	H3K79me2 H3K79me1 / H3K4me3 / H3K9me3 / H3R17me2a / H3K27me2 / H3K27me3 / H3K36me2 / H4R3me2s / H4K20me2		23138183
Growth inhibition assay	Cell viability		25596271